产品说明

产品概述

MC-Val-Cit-PAB-NH-C2-NH-Boc是带有正交氨基保护位点的双氨基分支VC连接子。分子前端是MC马来酰亚胺巯基反应基团，中间为Val-Cit-PAB酶切释放骨架，末端延伸乙二胺片段，其中一个氨基被Boc基团封闭保护。这是典型的多官能团正交保护砌块，区别于末端直接活化接毒素的PNP、NHS类试剂：它末端是Boc保护的氨基，需要后续TFA脱Boc之后，才能露出游离伯胺，再和毒素上的羧基、NHS酯、酰氯等亲电基团缩合。乙二胺C2短链提供额外一个氨基反应位点，拓展了连接子的修饰潜力，适合需要在毒素端做二次标记、双载荷、荧光共标记的复杂ADC设计。MC端对碱敏感，Boc端对酸敏感，两套保护体系正交，能够实现分步修饰：先利用MC端偶联抗体，或者先在Boc端脱保护接毒素，根据毒素酸碱耐受特性灵活调整合成顺序。该骨架不自带活化酯，属于中间体砌块，不是即用型payload前体，适合工艺开发、复杂多功能偶联物构建，在单毒素常规ADC中使用频率低于PNP活化系列。

作用机理与结构特点

酶切释放单元依旧是Val-Cit-PAB，溶酶体内组织蛋白酶B剪切二肽后PAB发生1,6-消除释放毒素。MC基团负责和抗体巯基形成硫醚键；Boc是酸敏保护基，在中性、弱碱条件下稳定，只有TFA等酸性条件下脱除，暴露伯胺用于后续酰胺缩合。乙二胺的C2间隔链很短，空间位阻小，脱保护后的伯胺反应活性高；同时正交化学是该分子*大亮点：MC不耐碱但对酸有一定耐受，Boc只被酸脱除，因此可以先接毒素（TFA脱Boc，毒素耐酸），再做抗体偶联；如果毒素不耐酸，则可以先把MC和抗体偶联，再温和脱Boc接毒素，实现顺序调换。需要权衡的是，额外的乙二胺片段增加了连接子极性，但过长的多氨基结构有可能带来非特异性静电吸附，需要在构效实验中评估对PK、富集的影响。单独该分子无法偶联毒素，必须经过脱Boc步骤暴露氨基。

主要应用方向

第一用于复杂多功能ADC构建，脱Boc露出伯胺后，偶联带羧基的毒素、荧光报告基团、放射标记配体，实现毒素+荧光双标记ADC，用于体内示踪、 biodistribution分布研究。第二用于同载体双载荷开发，利用该游离氨基位点，串联第二条响应型连接子，实现双毒素共递送。第三用于正交化学工艺筛选，对比不同合成顺序（先接毒素后偶联抗体 / 先偶联抗体再接毒素）对抗体完整性、聚集率的影响，适合酸稳定毒素体系。第四作为酶切对照骨架，用来研究末端氨基修饰对Val-Cit酶切速率、PAB消除动力学的影响。

详细使用指南

溶剂DMF、DCM，缩合试剂优先HATU/HOAt，条件温和。Boc脱保护标准方案：20–25% TFA/DCM，室温30–45 min；脱Boc阶段必须提前确认毒素耐酸性，酸不稳定毒素不能采用先脱保护再接毒素路线。脱保护后冷乙醚沉淀得到TFA盐，使用前用当量DIPEA中和释放游离伯胺，再和毒素羧酸/NHS酯缩合。全程pH控制不高于8.2，避免MC马来酰亚胺开环。不允许哌啶处理样品。HPLC纯化使用甲酸流动相，减少氨基峰拖尾。抗体偶联依旧选用pH6.0–6.5醋酸铵缓冲，TCEP还原巯基。

储存与质控注意事项

-20℃避光干燥密封保存，防潮，避免酸汽污染导致Boc提前水解。质控重点：HPLC纯度、质谱、Boc水解游离胺杂质、MC开环杂质。Boc水解杂质随储存时间缓慢上升，长期储存定期复测。