第一部分 材料介绍

• 中文名称：马来酰亚胺-缬氨酸-丙氨酸-对氨基苄氧羰基-依喜替康（常称：MC-VA-PAB-Exatecan）
• 英文名称：Maleimide-Valine-Alanine-PAB-Exatecan（MC-VA-PAB-Exatecan）
• 常用别称：MC-Val-Ala-PAB-Exatecan、MC-VA-PAB-Exatecan、马来酰亚胺-VA二肽-PAB-依喜替康连接子载荷、可裂解ADC drug-linker（Exatecan型）
• 结构组成：
  • MC（马来酰亚胺）：巯基偶联手柄
  • VA（Val-Ala 二肽）：酶敏感裂解区
  • PAB（对氨基苄氧羰基）：自消除间隔基
  • Exatecan：拓扑异构酶I抑制剂型载荷分子
• 应用定位：抗体-药物偶联物（ADC）科研构建中的“连接子-载荷”一体化中间体，用于半胱氨酸定点偶联、酶触发释放与连接子稳定性研究。

第二部分 产品物理化学性质

• 性状：白色至淡黄色固体（依纯度与结晶度而异，具吸湿性）
• 无PEG版参考参数（MC-VA-PAB-Exatecan）：
  • 分子式：C₅₀H₅₄FN₇O₁₁（参考公开类似物数据）
  • 分子量：约 948.0 Da
  • CAS参考：2680543-57-9（对应无PEG结构）
• 含PEG类似物参考（MC-PEG4-VA-PAB-Exatecan）：
  • 分子式：C₅₈H₆₉FN₈O₁₆
  • 分子量：约 1153.2 Da
• 溶解性：DMSO 中溶解性较好（新开封无水DMSO助溶，≥50–100 mg/mL量级参考）；DMF可溶；水溶液直接溶解性差，需DMSO助溶后梯度稀释，避免析出
• 纯度：科研级 ≥95%，高纯定制可至 ≥98%/≥99%（HPLC、LC-MS、¹H-NMR质控）
• 储存条件：粉末 -20℃ 密封、避光、防潮；溶液分装 -80℃（6个月）/-20℃（1个月）
• 运输条件：低温冰袋或干冰，避光防水，到货后及时回冻
• 稳定性注意：马来酰亚胺对水、胺类缓冲液敏感易水解；Exatecan段对光、氧、酸碱敏感，全程避光低温操作
• 供应商：西安瑞禧生物科技有限公司
• 温馨提示：本产品仅供科研实验使用，不能用于人体实验、临床诊疗及食品用途。

第三部分 科研实验中的应用原理与路径

3.1 多级响应释放机制

1. 偶联锚定​
   MC 端与抗体工程化半胱氨酸 –SH 发生迈克尔加成，形成稳定硫醚键，构建定点偶联ADC（DAR可控）。
2. 内吞转运​
   ADC与靶抗原结合后内化，经网格蛋白途径进入内体—溶酶体。
3. 酶切启动​
   溶酶体组织蛋白酶B识别并水解 Val-Ala 二肽键，暴露PAB苯胺氮。
4. 自消除级联​
   PAB发生1,6-消除，释放游离Exatecan原药结构，避免连接子残基干扰载荷活性。

3.2 科研实验中的核心用途

（1）ADC构建与DAR优化

• 与还原抗体（TCEP/DTT部分还原）在pH 7.0–7.5、无胺缓冲中偶联；
• 通过MC投料比控制DAR（如DAR2/DAR4/DAR8）；
• 用HIC-HPLC、LC-MS、UV吸光度核算偶联均一性。

（2）连接子对比研究

• VA vs VC（Val-Cit）二肽：比较组织蛋白酶加工速率、血浆稳定性差异；
• 有无PEG间隔（MC-VA-PAB vs MC-PEG4-VA-PAB）：评估聚集倾向、膜通透与释放动力学；
• PAB自消除效率：用LC-MS监测酶切后游离Exatecan生成量。

（3）体外释放与细胞机制

• 组织蛋白酶B/L孵育（醋酸钠缓冲，pH 5.0–5.5，含DTT）模拟溶酶体裂解；
• 血浆稳定性：37℃人/小鼠血浆中监测连接子完整率；
• 细胞实验：FR+靶细胞 vs 非靶细胞，配合游离Exatecan对照、未偶联抗体对照；
• 观察DNA损伤标志物（γH2AX）、细胞周期阻滞（S期）、凋亡/有丝分裂灾难。

（4）旁观者效应与DDR背景研究

（5）配方与递送延伸

• 可嵌入LNP、聚合物胶束、蛋白纳米粒做“非抗体偶联”递送对照；
• 与可电离脂质、DSPE-PEG衍生物共组装，研究载荷泄漏与刺激释放行为。

3.3 实验操作要点

• 母液：无水DMSO配制（如1–10 mM），分装避光，-80℃保存，避免反复冻融；
• 偶联缓冲：PBS/HEPES，禁用Tris、甘氨酸、β-巯基乙醇；
• 反应温度：冰浴或室温1–2 h，后续脱盐/SEC纯化；
• 酶切验证：CatB孵育2–24 h，HPLC-MS定量Exatecan游离峰；
• 细胞实验：设空白抗体、游离Exatecan、非可切连接子对照，区分靶向与释放贡献。

第四部分 瑞禧生物可提供规格与衍生产品

1. 本体与类似结构供货规格

• MC-VA-PAB-Exatecan（无PEG，约948 Da）
• MC-PEG4-VA-PAB-Exatecan（约1153 Da）
• MC-PEG8-VA-PAB-Exatecan（高水溶版本）
• 包装：1 mg / 5 mg / 10 mg / 25 mg / 50 mg / 100 mg / 500 mg（可克级定制）
• 纯度档位：≥95% / ≥98% / ≥99%（附COA、NMR、HPLC、MS）

2. 连接子中间体（不带载荷）

• MC-VA-PAB-OH
• MC-VA-PAB-NHS
• MC-PEG4-VA-PAB-OH
• MC-PEG8-Val-Ala-PABC 活性酯系列
• 对照连接子：MC-VC-PAB-Exatecan（Val-Cit对照）、MC-SS-Exatecan（还原敏感）、MC-hydrazone-Exatecan（pH敏感）

3. 其他载荷版本（同连接子骨架替换）

• MC-VA-PAB-MMAE
• MC-VA-PAB-MMAF
• MC-VA-PAB-DXd（Deruxtecan型）
• MC-VA-PAB-SN38
• MC-VA-PAB-PBD（二聚体载荷）

4. 偶联与表征配套

• 还原试剂：TCEP、DTT（高纯）
• 纯化耗材：SEC柱、脱盐柱、超滤管、透析袋
• 酶切试剂：组织蛋白酶B/L、溶酶体提取液
• 检测支持：HIC-HPLC、LC-MS/MS、DAR分析、释放曲线构建、kD/聚集评估

5. 定制服务

• 二肽序列定制（Val-Ala / Val-Cit / Ala-Ala / Lys-Lys）
• PEG长度定制（PEG2/PEG4/PEG8/PEG12/PEG24）
• 偶联服务：抗体还原-偶联-纯化-表征一站式
• 稳定性研究：血浆稳定性、酶切动力学、加速破坏试验

小结

温馨提示：本品为科研试剂，仅供实验室研究使用，不能用于人体实验、临床诊断或治疗。