产品说明

4-Pentynoyl-Val-Cit-PAB-PNP是带有戊炔酰间隔臂、末端预活化PNP碳酸酯的点击化学型ADC连接子。端炔通过戊炔酰（C5）脂肪链和Val-Cit二肽相连，相比无间隔短炔基版本，增加了柔性碳链，拉开炔基手柄和肽骨架之间距离，降低点击反应的空间位阻；同时末端已经预做成PNP活性酯，拿到原料可直接和伯胺毒素偶联，无需自行醇活化。它属于即用型点击payload前体，是Alkyne-Val-Cit-PAB-OH的下游活化产物。戊炔酰的C5间隔提升了炔基的可及性，对于空间拥挤的叠氮修饰位点，偶联效率明显优于短炔连接子；同时保留VC-PAB成熟酶切释放体系。该试剂兼顾点击化学正交优势与PNP一步接毒素的便捷性，适合定点ADC开发、高通量点击偶联筛选。需要区分：4-戊炔酰是脂肪链炔，和直接连在酰胺上的短炔结构不一样，空间位阻差异是构效筛选重点。PNP活性酯遇水水解，操作依旧需要无水环境。

作用机理与结构特点

溶酶体组织蛋白酶B识别剪切Val-Cit，PAB 1,6-消除释放毒素。4-戊炔酰提供带端炔的柔性C5间隔，CuAAC点击反应后生成稳定三唑环，作为ADC的锚定键；PNP是离去基团，和毒素伯胺形成氨基甲酸酯。长碳炔间隔的优势：叠氮基团经常位于蛋白表面狭小区域，短炔容易被肽骨架遮挡，戊炔酰长臂可以伸出去接触叠氮，提升偶联转化率。炔酰骨架对酸、弱碱稳定，正交性优秀；但PNP活性酯的水解风险和MC-VC-PAB-PNP保持一致，含水环境快速失活。锚定键三唑环化学稳定性很高，血浆中几乎不会非特异性断裂，适合追求很低提前泄露的定点ADC。

主要应用方向

核心用于定点ADC研发，和叠氮定点改造抗体、叠氮纳米抗体发生CuAAC点击反应，制备DAR均一性好的位点特异性ADC。第二用于高通量payload库构建，搭配多种氨基毒素快速得到炔基payload，用于点击化学平台筛选。第三用于纳米载体、外泌体表面点击修饰，构建酶响应毒素递送系统。第四作为间隔臂构效对照，对比短炔、戊炔酰长炔连接子的点击效率、酶切释放速率差异。

详细使用指南

无水DMSO/DMF，连接子:毒素=1.1~1.3:1，DIPEA pH7.2–8.2，室温避光2–4 h，HPLC监测PNP水解杂质。纯化制备HPLC，冻干。后续点击反应：CuSO4、抗坏血酸钠、THPTA配体，pH7.0–7.4缓冲，控制铜浓度，反应后去除铜离子。避免高温、高pH。

储存与质控注意事项

-20℃避光干燥分装，防潮；PNP酯保质期短。质控：HPLC、质谱、水解醇杂质。对硝基苯酚副产物刺激性强，废液单独处理。