一、基本信息

中文名称：二苯并环辛炔-聚乙二醇-马来酰亚胺；二苯基环辛炔-PEG-马来酰亚胺

英文名称：DBCO-PEG-MAL；Dibenzocyclooctyne-PEG-Maleimide；Maleimide-PEG-DBCO

别称：MAL-PEG-DBCO；二苯辛环炔-聚乙二醇-马来酰亚胺

性状：白色或淡黄色固体粉末，或粘稠液体，具体形态取决于PEG链段分子量及储存条件。

储存：建议-20℃、避光、干燥保存，避免频繁溶解与冻融。

纯度：科研级产品通常为95%以上（HPLC）。

供应商：西安瑞禧生物科技有限公司

温馨提示：本品仅供科研使用，不能用于人体实验或临床诊断。

二、材料介绍

DBCO-PEG-MAL 是一种异双功能聚乙二醇衍生物，分子两端分别携带二苯并环辛炔（DBCO）与马来酰亚胺（MAL）两种正交反应基团，中间由PEG链段连接。该分子的设计逻辑在于将两种在生物正交化学与巯基偶联领域各有分工的反应端整合于同一实体：DBCO端可在无铜催化条件下与叠氮基团发生应变促进的环加成反应，MAL端则对巯基表现出选择性反应能力。PEG链段作为间隔臂，承担着调节水溶性、降低空间位阻与减少非特异性吸附的功能。

这一结构使DBCO-PEG-MAL适用于需要分步、正交修饰的实验体系，例如先将一种配体通过MAL端锚定于含巯基的载体或蛋白上，再以DBCO端捕获叠氮化修饰的探针或药物分子，从而在同一个材料平台上实现两种功能模块的序贯组装。

三、实验设计要点

MAL端与巯基的偶联条件

马来酰亚胺与巯基的反应通常在pH 6.5–7.5的缓冲体系中进行。此pH范围有助于保持马来酰亚胺环的稳定性——在碱性偏强的条件下，马来酰亚胺可能发生开环水解而丧失反应活性。反应对含巯基分子具有选择性，但体系中应避免游离巯基试剂（如DTT、β-巯基乙醇）的残留，否则将与目标巯基竞争MAL端。若目标蛋白以二硫键形式存在巯基，需先经还原处理暴露游离巯基，再经脱盐去除还原剂后方可与DBCO-PEG-MAL反应。反应时间通常为室温1–2小时或4℃过夜，具体需根据巯基可及性通过预实验确定。

DBCO端与叠氮的无铜点击反应

DBCO与叠氮基团的环加成反应无需铜催化剂，这一特征使其在活细胞标记或铜敏感体系的操作中具有适用性。反应可在PBS或HEPES缓冲液中进行，pH范围较宽（约6.5–8.5），室温下数小时至过夜可完成。由于DBCO基团在水相中可能发生缓慢的水合或氧化，储备液建议以无水DMSO或DMF配制，工作液现配现用。若实验涉及活细胞或活体体系，需注意叠氮修饰的配对分子在所用浓度下的相容性。

操作顺序的选择

根据实验目标，DBCO-PEG-MAL的使用存在两种顺序策略。若需要先固定连接臂再捕获靶分子，可先将MAL端与巯基化载体反应，纯化后以DBCO端进行点击偶联。若目标分子对MAL反应条件敏感，则可先将DBCO端与叠氮化分子反应，再以MAL端偶联巯基化组分。两种路径的中间纯化步骤均不可省略，以避免未反应试剂干扰后续反应。

四、检测方法

偶联效率的评估可采用以下途径。对于蛋白或抗体类目标分子，SDS-PAGE可直观显示条带迁移变化：成功偶联PEG链段后，蛋白条带通常出现一定程度的位移或展宽，但该方法的分辨率受PEG分子量与偶联比例影响，适用于定性判断。更定量的手段包括MALDI-TOF质谱或ESI质谱，可依据分子量增量推算偶联数目。对于含DBCO端的中间产物，若后续与叠氮-荧光染料反应，可通过荧光分光光度法或凝胶成像检测荧光信号来间接验证DBCO的保留活性。

点击反应完成度的监测可利用DBCO与叠氮反应生成三唑环的特征。若叠氮配对分子携带荧光基团或生物素标签，反应后经透析或脱盐去除游离探针，测定保留荧光或进行链霉亲和素-辣根过氧化物酶显色，可判断偶联是否发生。对于材料表面修饰的场景，X射线光电子能谱（XPS）可检测氮元素信号的变化，接触角测定可反映表面亲水性的改变，二者结合可辅助确认PEG链段的引入。

纯度与稳定性检测方面，HPLC（反相或体积排阻模式）可用于评估产品的纯度及储存过程中的降解情况。DBCO基团在紫外区有特征吸收，可作为检测波长选择的参考。MAL基团在长时间水相储存中可能水解，表现为HPLC图谱中主峰面积下降或出现前置峰，因此工作液不宜长期存放。

五、瑞禧生物相关产品供应

西安瑞禧生物科技有限公司围绕DBCO-PEG衍生物及异双功能PEG试剂可提供以下产品选项：

• DBCO-PEG-MAL 系列（PEG分子量可选1000、2000、3400、5000、10000、20000等，支持定制）

• DBCO-PEG-NHS（DBCO端配合氨基反应型活性酯）

• DBCO-PEG-NH₂、DBCO-PEG-COOH 等单功能或异功能衍生物

• MAL-PEG-NHS、MAL-PEG-MAL 等马来酰亚胺类PEG试剂

• 叠氮-PEG-马来酰亚胺（Azide-PEG-MAL）等点击化学配对试剂

包装规格通常包括100 mg、250 mg、500 mg等，部分产品可提供mg级至g级的定制量。具体分子量、端基组合及缓冲液配方需求可与供应商技术人员沟通确认。

温馨提示：以上产品均仅供科研使用，不能用于人体实验。