一、基础标识与产品档案

  • 中文名称:异硫氰酸荧光素-聚乙二醇-硅烷
  • 常用中文别称:荧光素-聚乙二醇-硅烷、FITC-PEG-三乙氧基硅烷、硅烷聚乙二醇异硫氰酸荧光素、Silane-PEG-FITC
  • 英文名称:Fluorescein Isothiocyanate-Polyethylene Glycol-Silane
  • 英文别称/缩写:FITC-PEG-SIL、Silane-PEG-FITC、Fluorescein-PEG-Silane
  • 供应商:西安瑞禧生物科技有限公司

性状与基本参数

  • 外观性状:黄色至淡黄色粉末、固体或粘稠半固体(随PEG分子量变化)
  • 溶解性:溶于无水乙醇、甲醇、DMSO、DMF、氯仿;微溶于水,水相中硅烷端易水解
  • 纯度:≥95%(PEG段,GPC/NMR/UV表征)
  • FITC光学参数:激发约490–495 nm,发射约515–520 nm(绿色荧光)
  • 保质期:密封原包装、-20℃避光干燥条件下约12个月
  • 储存条件:-20℃避光、干燥、惰性气体保护,严格防潮
  • 运输条件:低温冷链、避光、干燥包装运输
  • 温馨提示:本产品仅供科研实验使用,不能用于人体实验及临床诊断治疗

二、分子结构与功能分区

FITC-PEG-Silane 为线性三模块嵌段分子:
FITC端 — PEG链 — Silane端
  1. FITC端(光学示踪)​
    异硫氰酸酯基团(–N=C=S)保留荧光与反应双重属性。发色团在488 nm激光下发射绿色荧光,可用于表面分布可视化、接枝密度半定量、洗涤稳定性评价。
  2. PEG间隔臂(空间隔离)​
    常规分子量1K / 2K / 3.4K / 5K / 10K。作用包括:
    • 提升分子在水相中的分散性;
    • 在固液界面形成水化层,降低蛋白与细胞非特异性吸附;
    • 把FITC撑离基底表面,减少荧光自淬灭与位阻屏蔽。
  3. Silane端(表面锚定)​
    多为三甲氧基硅烷(–Si(OCH₃)₃)或三乙氧基硅烷(–Si(OC₂H₅)₃)。在含水体系水解为硅醇,与玻璃、硅片、石英、SiO₂纳米粒、金属氧化物表面–OH缩合,形成稳定 Si–O–Si 共价键。

三、合成路线与反应原理

1. 主流合成逻辑

工业与实验室制备通常采用“端基分步偶联”策略,而非一步法随机缩合。代表性路线如下:

路线A:氨基PEG硅烷 + FITC活性酯/异硫氰酸酯

  1. 起始原料​
    • H₂N-PEG-Silane(氨基端PEG硅烷)
    • 或 HO-PEG-Silane 经端基转化得到氨基PEG硅烷
  2. FITC偶联​
    将 FITC(异硫氰酸荧光素,自身含–NCS)溶于无水DMSO/DMF,在弱碱性(pH 8–9)、避光、惰性气体下与氨基PEG硅烷反应:
    FITC偶联
    生成硫脲键连接。
  3. 水解控制与纯化​
    反应体系严格控水,避免硅烷提前自聚;后经透析、沉淀、柱纯化、冻干得到目标物。

路线B:NHS-PEG-Silane + FITC-NH₂衍生物

异硫氰酸荧光素-聚乙二醇-硅烷	FITC-PEG-Silane	合成路线与反应原理

  • 先制备 Silane-PEG-NHS;
  • 再与氨基化荧光素(FITC-amine)在缓冲液中酰胺化;
  • 适用于对异硫氰酸酯副反应敏感的场景。

路线C:硅烷保护基法

  • 硅烷先以氯硅烷保护或低水活度条件反应;
  • PEG中段完成FITC连接后,去保护恢复烷氧基硅烷;
  • 好处是减少合成过程中硅烷自缩合损失。
关键工艺参数​
  • 溶剂:无水DMSO、DMF、二氯甲烷
  • 温度:室温至40℃,避光
  • 反应时间:12–24 h
  • 质控:¹H NMR确认PEG与FITC取代;UV定量FITC负载;GPC看PDI;接触角/荧光验证表面接枝

2. 两端反应原理

(1)FITC端:亲核加成

异硫氰酸酯对伯氨基亲核进攻,生成稳定硫脲键。反应选择性较好,可在蛋白、多肽、氨基化材料表面进行标记。

(2)Silane端:水解—缩合

异硫氰酸荧光素-聚乙二醇-硅烷	FITC-PEG-Silane	合成路线与反应原理

分两步:
  • 水解:Si–OR + H₂O → Si–OH + ROH
  • 缩合:Si–OH + HO–Surface → Si–O–Surface + H₂O
    或分子间 Si–OH + HO–Si → Si–O–Si(需抑制自聚)
实践中用乙醇/水(如95:5)体系,控制微量水促进水解,但不过量以免试剂自交联。

(3)PEG的中介作用

PEG不是惰性填充,而是决定:
  • 荧光团空间可及性
  • 表面接枝密度
  • 抗污性能
  • 荧光背景高低

四、材料内容与实验价值

FITC-PEG-Silane 的本质是“把荧光探针种在材料表面”的桥梁分子:
  • 传统物理吸附荧光分子易洗脱、易聚集;
  • 该材料通过共价键固定,洗涤后荧光保留率更高;
  • PEG层使表面更亲水,减少假阳性信号。
典型实验流程:
  1. 基底清洗(玻璃/硅片/二氧化硅)
  2. 乙醇-水体系配制试剂母液(现配现用)
  3. 浸渍或旋涂,弱碱条件促进缩合
  4. 梯度乙醇/水洗涤
  5. 荧光显微镜、共聚焦、接触角、XPS表征

五、应用方向

异硫氰酸荧光素-聚乙二醇-硅烷	FITC-PEG-Silane	合成路线与反应原理

方向
具体用途
界面修饰
玻璃、硅片、石英、氧化硅表面荧光功能化
纳米材料
SiO₂纳米粒、介孔硅、磁性硅壳颗粒示踪
生物传感
传感器芯片抗污层+荧光参考通道
细胞与成像
载体摄取、内吞路径、材料-细胞界面观察
微流控
通道表面标记、流体边界可视化
诊疗研究
荧光-硅基探针原型、成像基底构建

六、相关材料:上下游与同平台产品

1. 上游原料

  • 氨基PEG硅烷(NH₂-PEG-Silane)
  • 羟基PEG硅烷(HO-PEG-Silane)
  • NHS-PEG-Silane
  • FITC异构体、FITC-amine、FITC-NHS酯
  • 三甲氧基/三乙氧基氯硅烷

2. 同系列瑞禧可供产品

  • Silane-PEG-NH₂:氨基端,用于醛基/活化羧基偶联
  • Silane-PEG-COOH:羧基端,EDC/NHS后续修饰
  • Silane-PEG-MAL:马来酰亚胺端,偶联巯基分子
  • Silane-PEG-N₃:点击化学界面构建
  • Silane-PEG-Cy5 / Cy3:近红外观光替代通道
  • Silane-PEG-Biotin:亲和素体系界面
  • FITC-PEG-OH / FITC-PEG-NHS:非硅烷对照体系

3. 终制剂与原型

  • FITC-PEG-Silane修饰二氧化硅纳米粒
  • 荧光玻璃基底 / 硅片功能片
  • 抗污-示踪双功能介孔硅载体
  • 微流控亲水荧光通道材料
  • 表面密度梯度对照样品

4. 检测与表征方法

  • 光学:荧光显微镜、共聚焦、荧光分光光度计(Ex 495 / Em 520)
  • 结构:¹H NMR、GPC、UV-Vis(FITC特征吸收)
  • 表面:接触角、XPS、AFM、Zeta电位
  • 稳定性:洗涤前后荧光保留率、不同pH浸泡测试

七、操作与稳定性要点

  • 硅烷端极怕水:称量在干燥环境快速完成,母液用无水DMSO/乙醇配制;
  • 避光:FITC见光易漂白,全程弱光操作;
  • 分装:避免反复冻融,建议配成已知浓度储备液分装冻存;
  • 表面预处理:基底需彻底除油、活化羟基,否则接枝不均;
  • 反应pH:弱碱(pH 8–9)利于缩合,但强碱会加速硅烷自聚。

八、小结

FITC-PEG-Silane 将“荧光示踪—PEG抗污—硅烷锚定”集成于单一分子:
合成上以氨基PEG硅烷与FITC定向偶联为主,原理上依赖异硫氰酸酯-氨基成键与烷氧基硅烷水解缩合双反应通道。它在硅基材料、纳米载体、生物界面与传感芯片研究中,提供了一种可定量、可洗涤、低背景的表面功能化方案。
西安瑞禧生物可提供该材料多PEG分子量规格、同系列Silane-PEG衍生物及表面修饰定制服务,覆盖从分子合成、基底接枝到荧光表征的完整科研链条。
温馨提示:本产品仅限科研实验使用,不能用于人体实验、临床诊断和治疗。