产品说明

产品介绍

Fmoc-Val-Cit-PAB-OH是Fmoc保护路线下的核心中间体，在Fmoc-Val-Cit的C端羧基与PAB（对氨基苄醇）氨基缩合得到，结构包含Fmoc保护氨基、Val-Cit酶切二肽、PAB自消除片段，末端是苄羟基。该分子把碱可脱保护的Fmoc端、酶敏感二肽、自消除释放单元整合在一起，是Fmoc系列PNP活化酯产品的直接前体。释放机制和m-PEG3-Val-Cit-PAB-OH一致：组织蛋白酶B剪切Cit-PAB酰胺键，PAB发生1,6-消除释放游离payload；区别在于N端是Fmoc保护氨基，可通过哌啶脱保护，暴露伯胺，继续向前延伸结构，比如接入Boc-Glu、二胺连接单元、靶向配体等，结构拓展灵活性远高于甲氧基封端版本。Fmoc基团自带紫外发色团，265/301 nm特征吸收，HPLC跟踪非常方便，脱保护、缩合、活化三步反应都可以用紫外信号监控。该试剂白色固体，苄羟基稳定性较好，相比PNP酯稳定很多，适合作为中间体库存，适合需要在连接子N端继续修饰、延长骨架的定制ADC开发项目，也是固相合成路线常得到的中间产物。该产品血浆稳定性优秀，在生理循环条件下Val-Cit骨架保持稳定，仅在溶酶体蛋白酶环境下触发剪切，广应用于需要分步修饰、多段组装的复杂linker设计。

主要应用方向

第一，上游中间体，末端苄羟基和对硝基氯甲酸酯反应，制备Fmoc-Val-Cit-PAB-PNP活化酯，用于payload偶联；N端Fmoc可保留，或者脱除后继续接Boc-Glu、二胺、荧光基团、抗体偶联手柄（马来酰亚胺、叠氮、炔基），搭建更复杂的多段连接子。第二，固相多肽合成中间产物，从Fmoc-Val-Cit固相延伸PAB之后得到该中间体，继续在固相上完成PNP活化或者N端延伸修饰。第三，构建位点特异性ADC的模块化骨架，脱Fmoc之后接入不同电荷、不同水溶性的氨基酸，调控ADC等电点、聚集趋势、体内清除速率，适合连接子构效关系研究。第四，酶激活荧光探针、可激活前药中间体，羟基活化后偶联荧光团或者毒素，N端Fmoc作为封闭基团，按需脱保护后偶联靶向多肽、配体。第五，用于PROTAC、多肽-药物偶联物PDC的可降解linker合成，适合需要分步组装、多反应位点的复杂分子构建。对比m-PEG封端版本，Fmoc-Val-Cit-PAB-OH主打可继续延伸N端，适合定制化、复杂多官能团连接子开发，是CDMO定制linker业务的高频中间体。

使用指南与操作规范

储存条件：-20℃，避光、干燥、氩气密封，Fmoc基团怕强光强碱，长期存放尽量避光；苄羟基相对稳定，但湿度高会缓慢发生副反应，分装小份使用。溶剂：无水DMF、DMSO为主，固相合成用DMF/NMP；水相兼容性有限，避免长时间水相放置。两大核心反应位点：N端Fmoc（碱脱保护）、C端PAB苄羟基（活化成PNP碳酸酯）。羟基活化成PNP酯：无水条件，DIPEA为碱，加入4-硝基苯基氯甲酸酯，室温避光反应，HPLC监测原料消耗；Fmoc脱保护：20%哌啶/DMF，室温5–15 min，脱除后暴露伯胺，用于酰胺缩合，脱保护后建议立刻投入下一步反应，氨基长时间放置易氧化。反应跟踪：HPLC同时读取260 nm（PNP、Fmoc）、280 nm（PAB）、301 nm（Fmoc特征峰），LC-MS确认分子量。纯化：液相产物制备HPLC，乙腈-甲酸水体系，冻干收集；固相路线直接在树脂上继续延伸，裂解后纯化终产物。安全操作：哌啶、氯甲酸酯刺激性高，全程通风橱；PNP活化步骤的氯甲酸酯遇水分解，体系严格无水。质控：每批次检测HPLC纯度、LC-MS，体外酶切验证；优先先做羟基活化，再决定是否脱Fmoc；如果先脱Fmoc，游离氨基会和氯甲酸酯发生副反应，造成大量杂质，是该产品很常见的工艺坑点。操作顺序建议：优先活化羟基生成PNP，再选择性脱N端Fmoc，避免氨基干扰活化反应。

ADC 可切割连接子。