产品说明

Gly3-VC-PAB-MMAE是一款在经典VC-PAB-MMAE基础上N端延长三甘氨酸（Gly-Gly-Gly，Gly3）柔性肽段的ADC linker-payload偶联物。三甘氨酸短肽作为亲水柔性间隔，接入Val-Cit前端，保留原有组织蛋白酶B酶切、PAB自消除释放MMAE的核心机制。Gly3链段不具备酶切位点，主要作用是增加N端修饰位点的空间自由度，改善linker-payload的亲水性，降低偶联后ADC分子聚集趋势，同时微调多肽骨架空间构象，改变二肽被蛋白酶识别的动力学速率。该产品同样需要在Gly3末端氨基上引入马来酰亚胺、叠氮、DBCO等反应基团之后，再和抗体偶联，属于MMAE载荷体系的衍生优化版本，用于开发稳定性更高、聚集更少的新一代奥瑞他汀类ADC。
基本信息
中文名称：三甘氨酸-缬氨酸瓜氨酸-对氨基苄基-单甲基奥瑞他汀 E
英文名称：Gly3-VC-PAB-MMAE
CAS号：2684216-48-4
类别：ADC linker-payload，亲水改性MMAE载荷中间体
外观：白色至类白色粉末
纯度：≥95%
溶解性：DMSO、DMF可溶，相比Val-Cit-PAB-MMAE水相分散性略有提升

释放机制：组织蛋白酶B切割Val-Cit位点，PAB自消除释放MMAE 
储存条件：-20℃避光干燥密封
保质期：6个月
结构与作用原理
分子从N端到C端依次是三甘氨酸柔性亲水链、Val-Cit酶敏感二肽、PAB自消除间隔臂、MMAE毒性载荷。Gly3三个甘氨酸连续排列，甘氨酸侧链只有氢原子，空间位阻很小，形成高度柔性的亲水多肽连接段。和直接在Val上修饰相比，Gly3把后续反应锚定基团向外延伸，拉开和VC酶切序列之间距离，减少抗体空间位阻对蛋白酶结合口袋的干扰，提升溶酶体内酶切效率一致性；甘氨酸很性酰胺键提升整个linker-payload亲水性，降低疏水MMAE带来的分子聚集倾向，高DAR ADC尤其容易聚集，该结构是解决聚集问题的改造方案之一。Val-Cit和PAB-MMAE模块功能和经典VcMMAE保持一致：胞外循环稳定，内吞入溶酶体之后蛋白酶切断Val-Cit，PAB消除释放游离MMAE，发挥微管抑制与旁观者杀伤效应。N端三甘氨酸末端保留游离氨基，可通过NHS活化酯完成修饰，接入各类生物正交反应基团。
使用说明
母液配制：无水DMSO配制母液，避光低温保存，避免反复冻融。
N端官能化修饰：Gly3末端伯氨基和MC-NHS、Azido-PEG-NHS、DBCO-NHS等活化酯在弱碱条件酰化，引入偶联反应头；甘氨酸氨基反应活性和Val-Cit前端氨基接近，反应条件温和可控。
ADC组装：修饰完成的linker-payload按照对应偶联方案和抗体偶联，SEC-HPLC重点监测聚集体含量，对比普通VC-PAB-MMAE衍生ADC的聚集差异。
释放与活性评价：平行对照普通VcMMAE，考察酶切释放速率、细胞杀伤活性、旁观者效应变化；Gly3改造一般不会破坏MMAE本身毒性，主要优化理化性质和体内稳定性。
DAR摸索：该分子亲水性更好，更容易实现较高DAR条件下不明显聚集，适合开发高载药量ADC。
储存与安全注意事项
属于MMAE细胞毒性衍生物，操作全套防护，污染耗材单独处理。避光防潮，禁止室温长期放置。仅用于体外科研合成，不用于动物给药以及临床。
应用场景与优势
用于优化MMAE型ADC理化性质，解决高DAR偶联产物易聚集、溶解性差的痛点。Gly3柔性链方案是多肽间隔改造的经典思路，兼顾原有成熟的Val-Cit释放机制，不用更换载荷，改造风险低。适合需要提升ADC单体比例、改善制剂稳定性的项目；同时用来研究多肽间隔长度对酶切动力学、体内药代行为的影响，是连接子构效关系研究常用试剂。