产品说明

中文名：IRDye 800CW琥珀酰亚胺酯
英文名：IRDye 800CW NHS Ester
别称：IRDye800CW SE、800CW活性酯、近红外800CW NHS酯

描述：

IRDye 800CW NHS Ester是一款商业化经典近红外NHS活性酯荧光染料，广适配LI-COR近红外成像平台，是800 nm通道活体成像、Western Blot近红外二抗标记的标杆染料。分子结构为多磺酸修饰的七甲川花菁骨架，末端NHS活性酯基团，磺酸基团保证高水溶性，同时降低染料和生物分子之间非特异性吸附；NHS酯靶向伯氨基，在弱碱性环境下发生酰胺化偶联，把800CW荧光基团共价接枝到蛋白、抗体、多肽、氨基修饰纳米载体表面。
光谱参数：吸收峰778 nm，发射峰794–795 nm，处于第二近红外窗口边缘，组织散射、自体荧光干扰极低，穿透深度优于Cy5.5系列；染料量子产率高，光稳定性优秀，标记后荧光信号持久，非特异结合水平低，非常适合体内示踪、术中荧光成像模型研究。产品外观绿色固体粉末，纯度≥95%，可溶于水、DMSO；NHS酯遇水水解，水溶液稳定性差，母液优先采用无水DMSO配制。对比Cy7.5，IRDye800CW经过结构优化，在血清体系中聚集更少，体内背景更低，是近红外双通道实验（700 nm+800 nm）标配染料之一。

典型应用：

近红外Western blot二抗标记、单克隆抗体荧光标记、小动物活体肿瘤靶向成像、淋巴示踪、血管荧光造影、细胞近红外流式检测、脂质体与聚合物纳米粒体内分布追踪；很多靶向探针、 Annexin V凋亡探针均采用该染料标记。 
标准操作方案：
标记缓冲液推荐无叠氮pH 8.5 PBS，叠氮根含氨基会消耗NHS酯降低标记效率；染料回温后用无水DMSO配制母液，DMSO终浓度控制在体系5%以内；抗体标记摩尔比参考染料/IgG为1.5–3:1，室温避光反应2 h；反应完成使用脱盐旋转柱快速去除游离染料，也可透析纯化；紫外读取778 nm与280 nm吸光度计算标记度，计算时校正染料本身在280 nm的吸收贡献。如果标记对有机溶剂极度敏感蛋白，可以少量用水配制染料，但是水溶液染料必须一次性用完，剩余染料丢弃。标记好的抗体避光4℃短期保存，长期分装添加保护剂-20℃冻存。
储存条件：干粉-20℃避光干燥密封保存；DMSO母液-80℃避光可存放半年，-20℃仅稳定两周；禁止反复冻融、接触水汽；操作全程避光，缓冲液避免含有Tris、甘氨酸等游离氨基组分。本试剂仅限科研模型研究，不用于临床。