产品说明

Val-Cit-PAB-MMAE是ADC领域标杆级的linker-payload偶联物，也就是常说的VcMMAE母核结构，是多款已上市ADC所使用的载荷骨架。分子包含Val-Cit酶切二肽、PAB自消除间隔臂以及强效微管抑制剂MMAE（单甲基奥瑞他汀E）。该分子N端没有马来酰亚胺基团，属于不带锚定反应头的载荷中间体，需要在N端接入MC、DBCO、叠氮等反应基团之后，才能和抗体偶联。MMAE是海兔素衍生的有丝分裂毒素，抑制微管聚合，阻断细胞分裂，具备很强细胞杀伤活性；Val-Cit-PAB保证只有进入溶酶体之后才释放MMAE，血清稳定性良好，同时释放出来的MMAE具备膜穿透能力，产生旁观者杀伤效应，对于异质性肿瘤组织杀伤很有优势，是ADC开发阳性对照试剂。

基本信息
中文名称：缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄基-单甲基奥瑞他汀 E
英文名称：Val-Cit-PAB-MMAE
CAS号：644981-35-1
类别：ADC linker-payload中间体，奥瑞他汀类载荷母核
外观：白色至类白色固体粉末
纯度：≥95%
溶解性：易溶于DMSO、DMF；水溶性较差

释放机制：组织蛋白酶B切割Val-Cit，PAB自消除释放游离MMAE
储存条件：-20℃避光干燥密封
保质期：6个月

结构与作用原理
Val-Cit-PAB-MMAE三段核心单元串联：L-Val-L-Cit二肽酶切位点、PAB对氨基苄氧羰基自消除单元、MMAE毒性载荷。Val-Cit是经过大量临床验证的溶酶体可裂解序列，在血液循环中对血浆蛋白酶稳定，当ADC通过抗原介导内吞进入溶酶体，高浓度组织蛋白酶B水解瓜氨酸和PAB之间肽键；PAB随即发生自发消除，断开与MMAE之间的氨基甲酸酯连接，释放出不带残留连接片段的游离MMAE。MMAE结合微管蛋白，阻止微管组装，破坏纺锤体形成，细胞停滞在G2/M周期，进而发生凋亡。MMAE脂溶性较好，释放之后可以穿透细胞膜，杀伤邻近抗原阴性肿瘤细胞，也就是旁观者效应，对肿瘤异质性高的病灶有利。该分子N端为游离氨基，是关键修饰位点：研究者可以在氨基上接MC马来酰亚胺、叠氮PEG、DBCO等不同反应接头，适配巯基偶联、点击化学定点偶联多条技术路线，因此它是平台化开发MMAE系列ADC的通用母核。

使用说明
母液配制：DMSO溶解，浓度建议5–10 mM，避光，避免反复冻融；MMAE毒性强，操作减量。
N端修饰：利用游离氨基，和MC-OSu、Azido-PEGn-NHS、DBCO-NHS等活化酯发生酰化反应，引入需要的生物正交或者巯基反应基团，纯化后得到终可偶联抗体的linker-payload。
偶联组装：修饰完成的产物再和对应官能化抗体偶联（马来酰亚胺对应巯基、叠氮对应DBCO）。
对照实验：作为阳性对照品，评估新接头、新载荷、新偶联工艺的释放效率、细胞活性，是所有ADC实验室的标准参照物质。
活性检测：采用抗原阳性肿瘤细胞株进行细胞增殖抑制实验，同时设置抗原阴性细胞，评估特异性；酶切释放实验使用重组组织蛋白酶B孵育，HPLC监测MMAE释放曲线。

储存与安全注意事项
属于高细胞毒性试剂，所有操作严格隔离，废液耗材单独收集。粉末避光防潮，不要长时间置于室温。仅用于体外科研，禁止体内直接给药。

应用场景与优势
作为行业标准MMAE母核，用于构建各类MMAE基ADC，同时作为阳性对照品评价新型连接子、新型偶联策略。上市维汀类ADC（Vedotin）都是基于这个骨架衍生而来。通用性很强，N端可灵活改造，适配随机半胱氨酸偶联、位点特异性点击偶联等多种ADC技术路线，是多肽药物偶联、靶向蛋白降解、纳米递送系统开发中常用的毒素中间体之一。