产品说明

DPPE-PEG-Biotin是生物素标记的磷脂PEG共轭物，疏水端DPPE嵌入脂质膜，中间PEG链降低空间位阻，末端偶联生物素（Biotin），依托生物素-链霉亲和素（Streptavidin）超高特异性亲和体系，是脂质体、囊泡、外泌体标记、捕获、靶向桥接很科研试剂之一。生物素与链霉亲和素的结合常数很高，特异性强、反应条件温和，不受普通缓冲液、血清环境明显干扰；PEG链把生物素位点抬离脂质膜表面，避免膜表面空间拥挤造成亲和结合受阻，显著提升链霉亲和素结合效率；DPPE饱和磷脂结构稳定，掺入脂质体后不易渗漏，适合长期孵育、多步标记实验，相比短链DMPE-PEG-Biotin，膜保留稳定性更好，适合体内循环实验。

该产品应用覆盖面很广。
第一是靶向递送的桥接体系：在脂质体表面引入生物素，再结合链霉亲和素标记的抗体、多肽、核酸适配体、荧光探针，间接构建主动靶向脂质体，这种桥接方式灵活，一套生物素化脂质体可以搭配多种链霉亲和素标记靶向分子，不用重新合成不同靶向磷脂；
第二是生物成像与示踪：生物素结合荧光标记链霉亲和素，实现脂质体、外泌体在细胞、活体层面荧光示踪；
第三是分离富集：用链霉亲和素修饰磁珠，捕获生物素标记的脂质囊泡、工程化外泌体，用于囊泡分离、流式分选；
第四是生物芯片、脂质双层传感器，在固相支撑膜上固定生物素脂质，搭建亲和检测平台，用于蛋白、受体结合分析。

制备修饰脂质体有共掺法和后插入法。共掺法：DPPE-PEG-Biotin与胆固醇、辅助磷脂混合溶于氯仿，旋蒸成膜，水化挤压得到生物素化脂质体，操作简单适合批量制备；后插入法适合已经包载药物、荧光染料的成品脂质体，37℃孵育，DPPE脂链自发插入膜上，不会破坏内部包封物。常规推荐掺入比例1~5 mol%，过高会导致生物素位点过于密集，发生空间屏蔽，反而降低链霉亲和素结合能力。储备液用氯仿配制，分装冻存；水溶液中稳定性有限，建议现配现用。缓冲体系优先选用中性PBS，高浓度游离生物素会竞争结合位点，实验体系中要避免添加含游离生物素的培养基添加剂。

储存条件为-20℃避光干燥密封，防止磷脂氧化、生物素降解。操作时，避免反复冻融，反复冻融会造成脂质团聚，粒径变大。细胞实验中，血清内少量内源性生物素会产生微弱背景，必要时可以用封闭液预处理，降低非特异性信号。该试剂仅用于科研，不可临床给药。在链霉亲和素孵育步骤，控制孵育浓度与时间，孵育结束充分洗涤，除去未结合游离蛋白，降低背景噪音。

活体成像实验时，要留意体内内源性生物素的干扰，合理设置空白对照组（不含生物素的DPPE-PEG脂质体）。另外，生物素-链霉亲和素结合不可逆，如果后续需要可逆捕获体系，则不适合选用该材料。使用完毕的样品，长期保存容易发生链霉亲和素聚集，标记后的样品建议尽快检测分析，保证信号稳定。