产品说明

DSPE-PEG-lactosyl，也常写作DSPE-PEG-Lactose，中文名称二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-乳糖、DSPE-PEG-乳糖基，是经典半乳糖型肝靶向PEG磷脂，是糖配体靶向磷脂中应用时间久、文献量很大的一款原料，广用于肝细胞靶向脂质体、基因载体、纳米药物递送研究。该分子由疏水DSPE磷脂锚定单元、亲水PEG连接臂、末端乳糖配体三部分共价偶联而成；乳糖由一分子半乳糖和一分子葡萄糖组成，识别核心是末端半乳糖残基，可以特异性结合肝细胞表面的去唾液酸糖蛋白受体ASGPR，该受体在肝实质细胞膜高表达，是肝脏靶向递送很成熟的受体靶点之一。PEG分子量可选2000、3400、5000，行业内DSPE-PEG2000-Lactose使用很多。产品外观为白色固体粉末，溶于氯仿、二氯甲烷、甲醇等有机溶剂，可和磷脂、胆固醇、辅助脂质共组装脂质体、胶束、LNP，HPLC纯度≥95%，糖配体偶联稳定，适合长期靶向配方开发。 结构上，DSPE双链疏水结构嵌入脂质双分子层，牢牢固定在纳米载体表面，不容易在循环过程脱落；PEG柔性链向外伸展，一方面降低网状内皮系统非特异性吞噬，延长循环时长，另一方面拉开乳糖配体和载体表面距离，消除空间位阻，让半乳糖残基能够顺利接触肝细胞表面ASGPR受体；末端乳糖是识别功能单元，依靠糖-受体特异性相互作用，介导纳米颗粒被肝实质细胞主动摄取。对比半乳糖单糖修饰磷脂，乳糖基稳定性更好，合成工艺成熟，批次差异更小，在国内外脂质体靶向文献中被大量引用。
DSPE-PEG-Lactose核心用途集中在肝脏靶向纳米递送体系研发。第一，肝靶向脂质体制备，将该乳糖磷脂按合适比例掺入脂质配方，包载小分子模型药物、荧光探针、核酸siRNA、mRNA，构建ASGPR介导的肝靶向载体，用于体外肝细胞HepG2、原代肝细胞摄取实验，对比普通PEG脂质体，验证肝脏靶向富集效果，是肝靶向方向首选糖配体磷脂原料。第二，基因递送载体改造，用于阳离子脂质、可电离脂质LNP体系表面修饰，提升核酸载体对肝细胞转染效率，降低在肺、脾脏等器官的非特异富集，用于肝脏相关基因沉默、基因编辑的前期载体筛选。第三，糖识别机制研究，构建糖修饰仿生膜界面，在SPR、QCM体系定量研究乳糖、半乳糖和ASGPR受体的结合亲和力、结合动力学，研究糖链长度、糖密度对受体识别的影响，属于糖生物学、肝受体生物学基础研究工具。第四，荧光靶向探针制备，搭配DSPE-PEG-FITC、DSPE-PEG-Cy荧光磷脂，制备乳糖修饰荧光脂质体，在共聚焦显微镜下观察肝细胞吸附、内吞、胞内转运过程，研究载体进入细胞后在溶酶体、内质网的分布规律。第五，载体理化与靶向构效关系研究，系统考察PEG分子量、乳糖磷脂摩尔占比、胆固醇比例、粒径电位对肝细胞靶向效率的影响，优化靶向处方，建立稳定可重复的肝靶向脂质体制备工艺。第六，拓展用于肝相关体外模型，构建乳糖修饰的细胞培养支架、微流控芯片界面，用于肝细胞黏附、类器官培养相关研究。
乳糖磷脂实验稳定性整体优于蛋白、多肽类靶向磷脂，但依然有明确使用规范。第一，储存条件：-20℃密封干燥避光保存，可分装单次用量，虽然乳糖糖配体稳定性高于凝集素、多肽，但长期反复冻融依然会造成PEG酯键缓慢水解，配体脱落，靶向活性下降；防潮是重点，糖基多羟基结构很易吸潮，受潮后粉末结块、溶解性变差。第二，投料比例，常规脂质体配方添加摩尔比例1~5%，梯度优化；比例过高会造成颗粒聚集、糖密度过高引发受体交联沉淀，靶向效率反而下降；过低则受体结合信号弱，难以和空白载体拉开差距。第三，溶剂体系，可溶于氯仿、DCM，水合组装条件温和，乳糖对温度耐受优于蛋白配体，但旋蒸、水合温度建议控制在60℃以内，避免长时间高温。第四，特异性验证关键点：ASGPR受体识别依赖半乳糖残基，游离半乳糖、乳糖会竞争性抑制靶向摄取，细胞孵育实验中，竞争对照组必须加入游离半乳糖，以此证明载体摄取是受体介导，而不是非特异吸附；培养基、缓冲液尽量避免添加高浓度含糖添加剂干扰结合。第五，细胞模型选择：ASGPR主要在成熟肝实质细胞表达，部分肝癌细胞系受体表达水平偏低，正式实验前需要提前检测细胞受体本底表达，避免靶点缺失导致靶向阴性。第六，应用边界：本品仅限科研，不是药物，不能直接人体使用；乳糖修饰载体在体内还会受到肝 Kupffer细胞非特异吞噬干扰，体外肝细胞靶向结果不等于活体肝脏靶向效果，体内实验需要单独评估。第七，过滤与储存成品脂质体：乳糖修饰脂质体水相分散液4℃短期保存，不建议常温久放；过滤选用0.22μm低吸附滤头，缓慢推注，防止聚集；分装后的脂质体分散液尽量避免冻存，冻融容易破坏脂质双层，造成配体丢失、粒径暴涨。第八，对照设置，实验必须使用不含乳糖的DSPE-mPEG作为阴性对照，排除PEG本身带来的细胞吸附、长循环效应，保证靶向结论可靠。