产品说明

DPPE-PEG-BCN是基于BCN（环丙烷环辛炔）基团的无铜点击化学磷脂PEG，属于SPAAC应变促进叠氮-炔环加成反应试剂，结构由DPPE磷脂、PEG间隔链、BCN环辛炔功能端组成，是生物正交标记、脂质体原位偶联、细胞膜工程化改造的热门材料。BCN属于环张力炔烃，不需要铜离子催化，就能和叠氮（-N3）基团在生理水溶液环境快速反应，生成稳定共价环加成产物；对比DBCO（二苯并环辛炔），BCN分子量更小、疏水性更低，水溶性更好，在PEG链辅助下，不容易在水相中团聚，细胞毒性更低，更适合活细胞、活体层面的生物正交标记；DPPE的C16饱和脂链稳定锚定脂质双层，PEG隔开炔基与膜表面，减少空间位阻，提升叠氮修饰分子的偶联效率，弥补早期点击磷脂水溶性差、易沉淀的短板。

它的核心优势是无铜点击反应，规避铜离子带来的氧化损伤、细胞毒性、荧光淬灭问题，这是和需要铜催化CuAAC点击试剂的区别。主要应用方向：活细胞膜表面修饰，将DPPE-PEG-BCN插入细胞膜，后续加入叠氮标记的多肽、抗体、荧光染料、多糖，在活细胞表面定点接枝功能分子；脂质纳米载体定点偶联靶向配体，先制备BCN修饰脂质体，再和叠氮化靶向分子混合，温和条件下完成偶联，不会破坏包载的蛋白、核酸、光敏剂；外泌体工程化改造，对外泌体膜进行BCN脂质插入，实现外泌体表面可控修饰；还有生物成像探针标记、组织切片原位标记、生物正交化学机制研究。在多步组装、活体示踪、敏感生物大分子修饰场景，BCN磷脂适用性优于传统铜催化点击脂质。

使用方式分为共掺入膜和后插入修饰。共掺法：薄膜水化法制备脂质体时，将DPPE-PEG-BCN和基础磷脂、胆固醇共溶于有机相，成膜水化，得到表面带BCN炔基的脂质囊泡，适合从源头构建点击化学载体；后插入法优先用于活细胞、分离外泌体、预成型载药脂质体，37℃温和孵育，脂链插入膜上，操作温和，不破坏细胞活性与包封药物。配方中摩尔添加量推荐1~4 mol%，过高会造成颗粒聚集，同时炔基密度过高容易发生分子内相互作用，降低和叠氮底物反应活性。点击反应在中性PBS缓冲液即可进行，室温或者37℃孵育，不需要额外催化剂，反应结束后透析或者超滤除去未反应叠氮分子。

储存条件为-20℃、避光、干燥密封保存，隔绝氧气，磷脂双键容易氧化，BCN环辛炔长期暴露于强光、氧化剂环境下活性下降。储备液用无水氯仿或者无水DMSO分装，避免水溶液长期存放。操作上，不需要铜离子，体系内无需添加抗坏血酸钠等还原剂，简化实验流程；但要注意体系内不要含有强亲核试剂、强氧化剂，会干扰BCN活性。该试剂仅限科研使用，不用于临床。细胞实验时，设置不含BCN的DPPE-PEG对照组，区分非特异性吸附和点击共价偶联信号。BCN和叠氮反应专一性强，但需要留意：叠氮基团本身存在一定光敏感性，整个标记流程尽量避光。如果需要多重标记，可以搭配其他正交点击对，实现多组分分别偶联。反应后建议通过HPLC、琼脂糖电泳、荧光检测验证偶联效率，保证后续靶向、成像实验结果可靠。