产品说明

产品介绍
iRGD-PEG-NHS是一端为iRGD肿瘤穿透环肽、另一端为NHS琥珀酰亚胺活性酯的双功能PEG衍生物，是氨基底物一键偶联的热门靶向修饰试剂。NHS活性酯是生化领域很氨基反应基团，在弱碱性缓冲条件下，可以快速和伯氨基发生酰胺化反应，反应速度快、操作简单，不需要额外EDC活化步骤，适合氨基修饰的脂质、纳米颗粒、蛋白、多肽、氨基化水凝胶等底物的直接标记。iRGD肽保留整合素识别、Neuropilin-1结合、肿瘤深部穿透的特性，PEG链作为亲水间隔臂，屏蔽载体表面电荷、降低蛋白吸附、延长体内循环时间，同时拉开肽段与载体表面距离，保障iRGD和受体有效结合。
NHS酯的短板在于水解，在水溶液中会自发水解变成羧基，失去反应活性，水解速率随pH升高、温度升高急剧加快，因此这款试剂对操作时效要求高，适合短时间快速标记。它和iRGD-PEG-NH₂刚好互补：NHS版本是进攻氨基底物，氨基版本是被活化羧基进攻。很多商用氨基化纳米粒、氨基脂质、氨基修饰荧光染料，没有羧基，直接使用iRGD-PEG-NHS就可以一步接枝靶向肽，省去EDC活化步骤，减少活化剂带来的纳米颗粒聚集风险。同时该产品也可以用来标记抗体、白蛋白、细胞表面蛋白，制备靶向生物探针。 该产品非常适合高通量标记实验；但不适合长时间反应、高湿度环境、含大量氨基杂质（Tris）的体系。

基本信息
英文名称：iRGD-PEG-NHS 中文名称：iRGD肽聚乙二醇-活性酯（琥珀酰亚胺酯） 结构：iRGD肽-聚乙二醇-NHS酯 可选PEG分子量：1000、2000、3400、5000、10000 Da 外观：白色至类白色冻干粉末 纯度：HPLC ≥95% 肽序列：CRGDKGPDC（环化iRGD） 溶解性：溶于无水DMSO、DMF；溶于pH7–8 PBS（溶解后快速反应，不宜久放） 活性基团：NHS琥珀酰亚胺活性酯，特异性和伯氨基反应 适配反应：氨基酰胺化反应，pH7.2–8.5 保质期：-20℃密封干燥避光保存12个月；开盖后尽快使用

应用方向
第一，氨基化纳米载体一步靶向修饰：氨基PLGA、氨基介孔硅、氨基脂质体、氨基荧光纳米球，直接加入iRGD-PEG-NHS，弱碱性缓冲液孵育偶联，无需EDC/NHS活化，简化纳米载体制备流程，降低颗粒聚集概率。第二，蛋白、抗体、多肽标记：抗体、白蛋白、酶、重组蛋白表面赖氨酸氨基和NHS反应，制备iRGD靶向蛋白探针、靶向蛋白药物。第三，氨基修饰水凝胶、生物支架表面改性，接枝iRGD肽，调控细胞黏附、肿瘤细胞在支架上的侵袭行为。第四，靶向荧光探针构建，氨基荧光染料和本品偶联，得到iRGD靶向荧光示踪分子，用于细胞、组织切片染色成像。第五，体外靶向摄取、肿瘤球穿透模型实验，三维肿瘤球用来验证iRGD穿透效果。第六，对照实验配套，使用mPEG-NHS作为空白对照，区分iRGD介导特异性靶向与非特异性吸附。

使用操作指引
1.取样操作：严格控湿！取出放干燥器回温，称量全程快速操作，水汽会加速NHS水解。
2.母液配制：优先用无水DMSO配制储备母液，无水DMSO中NHS稳定性远高于水相；水相使用时，底物先溶于pH7.4~8.0碳酸氢钠缓冲液，不要用Tris缓冲液。
3.偶联反应步骤：将iRGD-PEG-NHS DMSO母液按摩尔比滴加到氨基底物缓冲液中，避光室温反应1–2 h；延长反应时间会大量水解，接枝率反而下降。
4.淬灭与纯化：反应结束加入少量甘氨酸淬灭剩余NHS活性；透析、超滤、脱盐柱除去游离未反应iRGD-PEG和甘氨酸。
5.产物表征：HPLC检测游离肽残留、DLS粒径电位、BCA/荧光定量接枝效率；用TNBS检测氨基消耗情况。
6.细胞与肿瘤球实验：共聚焦、流式检测细胞摄取；三维肿瘤球模型用来直观观察iRGD介导的探针深部渗透。
7.体内动物实验：产物透析除菌过滤，设置游离iRGD竞争组、mPEG-NHS修饰空白载体对照组，活体成像评价肿瘤富集。

储存、稳定性与安全注意事项
长期储存：-20℃，密封、干燥、避光、严格防潮。NHS遇水快速水解，是本产品失效的核心原因；DMSO母液分装冻存，避免反复冻融。水溶液体系配制后建议30–60 min内完成反应。 安全提示：普通生化试剂，佩戴手套护目镜，粉末禁止吸入；废液单独收集处理。 重要区分：NHS是和氨基反应；如果你的底物是羧基，不能直接用本品，应当选用iRGD-PEG-NH2配合EDC活化。本产品仅科研用途，禁止人体临床、诊断使用。Tris、甘氨酸、含氨基的缓冲液会直接淬灭NHS，必须规避。