产品说明

C18-PEG-DBCO是脂质功能化点击化学PEG衍生物，一端为C18十八烷基长饱和烷基链，中间亲水PEG间隔臂，另一端DBCO（二苯并环辛炔），属于无铜点击化学脂质探针。C18长烷基链是经典疏水脂质锚定基团，依靠疏水相互作用插入磷脂双分子层，稳定锚定在细胞膜、脂质体、外泌体膜表面；PEG链亲水，在膜外侧形成水化层，降低非特异性蛋白吸附，提升膜修饰稳定性，同时隔开疏水C18和DBCO基团，减少空间位阻，保证DBCO可以顺利和叠氮基团发生SPAAC无铜点击反应；DBCO和叠氮基团在生理条件下直接反应，不需要铜离子，无细胞毒性，适合活细胞膜标记。

该产品外观白色蜡状固体，可溶于DMSO、DMF、氯仿，在水中可以自组装形成胶束；纯度≥95%。C18-PEG-DBCO结合脂质膜锚定能力与无铜点击化学特性，一步给细胞膜、脂质体、外泌体引入DBCO点击位点，后续和叠氮标记荧光、酶、多肽探针偶联，是膜修饰、活细胞点击标记、外泌体工程化、脂质体功能化的核心试剂。对比小分子DBCO脂质，PEG化版本抗吸附更强，膜修饰之后不容易被血清蛋白快速置换，膜停留时间更长。

产品应用
第一，活细胞膜点击标记。C18插入细胞膜磷脂层，给细胞膜引入DBCO位点，后续加入叠氮标记荧光探针、酶探针，无铜点击标记细胞膜，活细胞成像，无铜毒性。
第二，脂质体功能化修饰。在脂质体膜上插入C18-PEG-DBCO，引入DBCO点击位点，后续偶联叠氮修饰靶向多肽、荧光染料，构建点击化学靶向脂质体。
第三，外泌体膜修饰。疏水C18锚定在外泌体膜，引入DBCO，后续点击偶联叠氮标记配体、探针，工程化改造外泌体，用于外泌体示踪、靶向递送。
第四，细胞膜糖代谢标记。代谢标记给细胞糖蛋白带上叠氮，同时用C18-PEG-DBCO标记膜骨架，双标记共定位成像。
第五，膜蛋白邻近标记。在膜上引入DBCO，和叠氮标记邻近探针配对，研究膜蛋白互作。
第六，脂质纳米粒LNP修饰。在LNP膜相插入该试剂，引入点击位点，后续偶联靶向配体，构建点击修饰LNP。
第七，界面脂质单层组装。在疏水基底自组装脂质膜，引入DBCO，构建点击化学传感界面。

使用方法
母液配制：C18疏水，优先氯仿、无水DMSO溶解母液；水相体系需要缓慢滴加母液到缓冲液，超声辅助分散，避免团聚。
膜锚定孵育：细胞、外泌体、脂质体体系，PBS缓冲液，加入C18-PEG-DBCO母液，室温孵育15–60 min，C18疏水插入膜结构。
洗涤去除游离脂质：PBS多次离心漂洗，去除未插入膜的游离C18-PEG-DBCO。
点击反应：加入叠氮标记探针，室温避光孵育2–4 h，完成SPAAC点击。
纯化：细胞直接漂洗；外泌体超速离心纯化；脂质体透析去除游离探针。
对照：不含DBCO的C18-PEG对照，区分点击特异性和非特异性吸附。
全程避光，DBCO有一定光敏性。

注意事项
C18长链疏水，水溶液中浓度过高容易团聚析出，需要控制工作浓度。DBCO点击反应不需要铜催化剂，严禁加入铜离子，铜离子损伤细胞。干粉密封-20℃避光保存，蜡状固体低温储存，高温会融化。孵育时间不能过长，高浓度长时间孵育会改变细胞膜流动性，影响细胞活性。血清蛋白会竞争置换膜上C18脂质，血清体系中需要控制孵育条件。所有操作避光，防止DBCO光降解。
缓冲液避免高浓度去污剂，会破坏脂质锚定结构。本试剂仅科研体外实验，不用于人体。操作时有机溶剂防护，氯仿、DMSO避免皮肤接触。废液有机相和水相分开收集。