产品说明

Alkyne-PEG-NHS是炔基-琥珀酰亚胺酯异双功能PEG交联试剂，一端炔基（炔丙基），中间亲水PEG链，另一端NHS活性酯，是铜催化点击化学（CuAAC）配套的氨基修饰PEG活化酯。NHS活性酯可以和伯氨基发生酰胺化反应，温和条件下标记蛋白、多肽、氨基纳米材料，给氨基底物引入炔基位点；炔基在铜离子、抗坏血酸钠催化体系下，和叠氮（-N3）分子发生经典铜催化叠氮炔环加成，生成稳定三唑环；PEG亲水间隔臂提升水溶性，降低NHS和炔基之间空间位阻，减少非特异性吸附，保护蛋白生物活性。

该产品外观白色粉末，溶于水、DMSO、DMF，不溶于乙醚；纯度≥95%。Alkyne-PEG-NHS是很基础、使用很广的点击化学活化PEG，适合先标记氨基底物带上炔基，再和叠氮修饰探针配对偶联。和DBCO系列无铜点击试剂区分，本试剂依赖铜催化，反应速度快、成本低，适合固定样本、蛋白、纳米材料等耐受铜离子的体系；不适合活细胞直接标记（铜离子细胞毒性）。 
该试剂模块化强，是蛋白点击标记、纳米载体功能化、生物正交偶联、ADC连接子合成、固相生物修饰的基础原料。

产品应用
第一，蛋白、多肽炔基标记。NHS端和蛋白氨基反应，给蛋白引入炔基，后续和叠氮标记荧光、生物素、多肽进行CuAAC点击偶联，用于蛋白标记、WB、免疫印迹。
第二，氨基纳米颗粒修饰。氨基修饰二氧化硅、磁性微球、脂质体，偶联Alkyne-PEG-NHS，引入炔基位点，后续点击叠氮修饰靶向配体、探针。
第三，固相芯片、树脂修饰。氨基修饰琼脂糖树脂、玻片基底，引入炔基，构建点击化学固相捕获平台。
第四，点击化学水凝胶制备。炔基修饰多氨基大分子，再和叠氮交联剂点击成型，构建CuAAC交联水凝胶。
第五，抗体偶联物、探针合成。标记抗体引入炔基，和叠氮标记小分子、荧光染料偶联，制备靶向探针。
第六，核酸修饰配套。氨基修饰寡核苷酸，标记炔基，后续和叠氮探针点击，用于核酸检测、荧光标记。
第七，生物样本固定后标记。固定组织切片、固定细胞，耐受铜离子，使用本试剂标记后点击染色，适合组织原位标记。

使用方法
NHS偶联阶段：母液无水DMSO配制，缓冲液pH7.2–8.5 HEPES/碳酸盐缓冲液，禁用Tris、甘氨酸氨基缓冲液；Alkyne-PEG-NHS:氨基底物摩尔比3:1~10:1，室温反应2–4 h，4℃可过夜。
淬灭纯化：甘氨酸淬灭剩余NHS；蛋白透析脱盐；纳米颗粒离心洗涤，得到炔基化底物。
CuAAC点击反应：配制铜催化体系（CuSO₄+抗坏血酸钠），加入叠氮底物，室温避光反应1–4 h。
纯化：反应后脱铜，透析、凝胶过滤去除铜离子和游离小分子。
对照设置：无炔基mPEG-NHS对照，区分点击特异性。
注意：活细胞体系不推荐直接使用，铜离子具备细胞毒性。

注意事项
NHS酯遇水易水解，干粉-20℃干燥避光密封保存，母液现配现用。第一步氨基偶联严格避开含氨基缓冲组分，氨基会消耗NHS。CuAAC催化体系铜离子有细胞毒性，活细胞、活体实验优先选用DBCO无铜体系，本试剂多用于固定样本、蛋白、纳米材料。抗坏血酸钠容易氧化，催化体系现配现用。铜离子残留会造成蛋白氧化、荧光淬灭，点击反应后必须充分脱铜纯化。炔基稳定性优于DBCO，但长期光照、高温也会缓慢降解。高浓度铜离子废液单独收集，重金属废液规范处理。本试剂仅科研实验使用，不用于临床。
操作佩戴防护，粉末避免吸入。偶联和点击两步分开进行，不要混合投料，防止NHS水解。