产品说明

N3-PEG-Biotin是一端叠氮、一端生物素（Biotin）的双功能PEG衍生物，将无铜点击化学和生物素-链霉亲和素（Biotin-Streptavidin）超高亲和力识别体系结合在一起，是生物正交标记、亲和捕获实验的经典工具试剂。PEG亲水链作为柔性间隔臂，隔开叠氮与生物素，消除空间位阻，保障叠氮点击效率，同时保证生物素可以自由伸入链霉亲和素结合口袋，不被载体空间结构阻挡；PEG同时降低非特异性蛋白吸附，大幅降低背景信号，提升成像、富集实验信噪比。
叠氮端可以和DBCO基团发生SPAAC无铜点击反应，反应条件温和、无铜离子毒性，适合活细胞、活体样本标记；也可以在铜催化下和端炔发生CuAAC点击，适合有机相、固定样本标记。生物素与链霉亲和素亲和力很高（Kd ~10⁻¹⁵ M），结合几乎不可逆，是生化富集、荧光放大、免疫染色、蛋白pull-down的黄金体系。使用路线分两类：一是先点击，把生物素定点接到DBCO修饰载体、蛋白、纳米探针上，再用荧光标记链霉亲和素进行信号放大；二是先把DBCO标记链霉亲和素和本品叠氮点击，制备生物素化链霉亲和素探针。该试剂优势在于正交性强，氨基、巯基、羧基等细胞内大量基团不干扰点击反应，在血清、细胞裂解液等复杂体系依然可以定点标记，非常适合低丰度生物分子捕获。
基本信息
英文名称：N3-PEG-Biotin 中文名称：叠氮聚乙二醇生物素 结构：N3-PEG-Biotin 可选PEG分子量：1000、2000、3400、5000 Da 外观：白色至类白色粉末 纯度：HPLC ≥95% 溶解性：溶于水、PBS、DMSO、DMF；难溶于乙醚、烷烃 活性官能团：叠氮-N3；识别单元：生物素Biotin 适配反应：叠氮与DBCO无铜SPAAC点击；叠氮与端炔CuAAC铜催化点击；生物素特异性结合链霉亲和素 保质期：-20℃密封干燥避光保存12个月
应用方向
第一，纳米载体生物素化标记，DBCO修饰脂质体、PLGA纳米粒、介孔硅和本品无铜点击，载体引入生物素，后续结合荧光链霉亲和素用于活体荧光成像、流式检测。第二，活细胞生物正交标记，DBCO标记细胞膜蛋白，再点击接上N3-PEG-Biotin，使用链霉亲和素富集、WB检测目标蛋白。第三，蛋白Pull-down富集，对炔基修饰蛋白进行点击标记生物素，链霉亲和素磁珠捕获目标蛋白，用于互作蛋白筛选。第四，组织切片原位标记，固定组织中DBCO探针点击接生物素，链霉亲和素荧光染色放大信号。第五，双靶向体系构建，和DBCO-iRGD、DBCO-Glucose复配，同时引入靶向肽和生物素亲和标签。第六，对照实验采用N3-PEG-mPEG作为空白对照，排除PEG骨架非特异吸附。
使用操作指引
1.取样：干燥器回温，分装单次用量，避光防潮。
2.母液配制：无菌PBS或者DMSO配制，避光保存，水溶液现配现用。
3.无铜SPAAC（推荐细胞/活体）：DBCO修饰底物溶于pH7.2–7.6 PBS，加入N3-PEG-Biotin，室温避光反应6–12 h；透析/脱盐除去未反应原料。
4.铜催化CuAAC（固定样本、有机相）：端炔底物，加入CuSO4、THPTA、抗坏血酸钠，脱氧避光反应2–4 h；反应后必须彻底除铜再用于细胞实验。
5.亲和检测：加入荧光标记链霉亲和素孵育，PBS充分洗涤去除游离链霉亲和素；共聚焦、流式、WB、磁珠富集检测。
6.对照设置：游离生物素竞争对照组，验证结合来自生物素-链霉亲和素特异性识别。
储存、稳定性与安全注意事项
长期储存：-20℃密封干燥避光；生物素稳定，主要风险来自叠氮遇强光、潮湿缓慢降解。 安全提示：常规生化标记试剂，佩戴手套护目镜；叠氮少量稳定，不和强酸混合；铜催化废液单独处理。生物素本身低毒，但链霉亲和素实验注意防止污染。仅限科研使用，不可临床诊断。