产品说明

产品概述

MC (C5)-Val-Cit，也常简写 MC-Val-Cit，是 VC 体系里直接带上抗体反应官能团（马来酰亚胺己酰）的二肽砌块，是 MC 系列 payload 合成的上游骨架原料，对应 Boc-Val-Cit，区别是氨基端不再是保护基，而是直接接上 MC（马来酰亚胺-C5-己酰）巯基反应基团。马来酰亚胺是 ADC 经典巯基偶联基团，专门和单抗还原暴露的链间二硫键巯基发生迈克尔加成，是 Brentuximab vedotin 采用的偶联化学。该分子只有 MC-己酰-Val-Cit 二肽，缺少 PAB 自消除间隔基，羧基端游离，必须继续缩合 PAB 单元，再活化成 PNP 酯、再接毒素，才能形成完整 payload。它是一条一步到位、跳过 Boc/Fmoc 保护步骤的简化合成路线：直接以 MC-Val-Cit 为起点，延伸 PAB，活化、接毒素，省去保护-脱保护循环，适合希望缩短合成步骤、减少 TFA / 哌啶处理的工艺。马来酰亚胺环对强碱、高温、长时间水溶液都敏感，容易开环失活，所以整套后续合成条件必须温和，不能使用强碱性 Fmoc 脱保护，这是 MC 骨架原料核心的限制点。

作用机理与结构特点

MC 基团负责抗体偶联：马来酰亚胺双键和单抗巯基加成，形成稳定硫醚键，在血浆中稳定性较好；Val-Cit 依旧是 Cathepsin B 酶切识别位点；但没有 PAB，单独这个分子不具备毒素释放能力，酶切之后无法释放游离活性毒素。MC 环的化学特性是本产品约束：马来酰亚胺在 pH＞8.5、强碱、高温、长时间含水环境下，*易水解开环，丧失巯基反应活性，所以所有后续缩合、活化反应都要控制弱碱、低温、短时间。这条路线的优势是：骨架自带抗体反应端，不需要后续再接 MC-OSu，减少一步酰胺缩合，减少杂质生成；适合毒素对酸碱都敏感、希望尽量减少保护脱保护操作的场景。对比 Boc/Fmoc 二肽，MC-Val-Cit 是 “已经装上抗体反应头、等待接 PAB + 毒素” 的中间体，合成顺序发生变化，先固定抗体端官能团，再向毒素端延伸。

主要应用方向

第一用于 MC-VC-PAB 系列 payload 的从头合成，从 MC-Val-Cit 出发，缩合 PAB-OH 得到 MC-Val-Cit-PAB-OH，再 PNP 活化、接毒素，是目前 CDMO 非常主流的直接路线，省去 Boc→脱 Boc→接 MC 步骤，缩短合成周期。第二用于巯基可标记多肽、蛋白探针构建，马来酰亚胺标记蛋白巯基，Val-Cit 作为酶切报告段，接荧光 / 比色基团，构建溶酶体蛋白酶探针。第三用于 ADC 构效研究，对比 “先接 MC” 和 “后再接 MC” 两条合成路线，评估 MC 环在多步合成过程中的开环杂质水平，优化 payload 生产工艺。第四用于纳米抗体、融合蛋白偶联，这些蛋白还原巯基数量少、对苛刻化学条件耐受差，简化合成路线可以降低蛋白提前变性风险。该原料羧基游离，必须延伸 PAB 间隔基，不能直接偶联毒素。

详细使用指南

溶剂无水 DMF/DCM，缩合试剂优先 HATU/HOAt，条件温和，副反应低；EDCI 体系反应偏慢，需要延长时间，会增加 MC 开环风险，不推荐。MC-Val-Cit 和 PAB-OH 缩合：投料 1:1.05，DIPEA 控 pH 7.5–8.0，室温避光 2 h，严禁 pH＞8.5。反应监测重点看两个杂质：原料 MC-Val-Cit，以及马来酰亚胺开环水解杂质（质谱 + 18 峰）。缩合得到 MC-Val-Cit-PAB-OH 之后，再冰浴 PNP-Cl 活化，同样严控弱碱、低温。所有步骤全程避光，马来酰亚胺对光照也会加速降解。纯化 HPLC，甲酸体系，冻干后-20℃快速储存；不建议在水溶液长时间放置。该原料绝对不能经过哌啶、浓 TFA 处理，会直接破坏马来酰亚胺环。

储存与质控注意事项

-20℃、避光、无水密封，分装小份，一次用完；MC 开环是主要降解途径，质控必须监测开环杂质比例。长期储存定期复测马来酰亚胺活性（巯基滴定、质谱）。