产品说明

产品介绍

Fmoc-Glu-(Boc)-Val-Cit-PAB-PNP是在经典Fmoc-Val-Cit-PAB-PNP骨架N端额外插入一个侧链Boc保护谷氨酸的加长型多氨基酸连接子，属于升级型亲水改性Val-Cit连接子。结构顺序：N端Fmoc保护谷氨酸主链氨基，谷氨酸γ羧基侧链被Boc保护，谷氨酸主链羧基和Val-Cit的缬氨酸氨基缩合，后面依次是Val-Cit二肽、PAB自消除单元、末端PNP活化碳酸酯。谷氨酸本身带有羧基，脱Boc之后释放游离羧基，大幅提升整个连接子骨架的亲水能力，相比Fmoc-Val-Cit-PAB-PNP，有效改善drug-linker疏水聚集问题，提高偶联反应投料浓度，减少ADC聚集、沉淀。该分子同样拥有正交保护体系：Fmoc碱脱除（哌啶）、Boc酸脱除（TFA）、PNP可和氨基payload偶联；三段可独立调控位点，组装自由度更高。Val-Cit酶切序列保留，组织蛋白酶B识别、PAB自消除释放机制不变，血浆稳定性良好。插入谷氨酸单元同时可以微调连接子骨架长度、刚性、电荷，谷氨酸侧链羧基脱保护后带负电，调控ADC的等电点、体内网状内皮系统摄取、清除半衰期。该试剂是近年亲水型Val-Cit连接子热门改造方向，兼顾经典酶切释放机制和电荷亲水修饰，很多新一代低聚集ADC管线选用该骨架。性状白色粉末，多保护基体系，杂质来源更复杂，主要是Boc提前脱除、谷氨酸差向异构、PNP水解杂质，质控要求高于基础Val-Cit-PAB-PNP。

主要应用方向

第一，低聚集ADC开发，用来合成水溶性更好的drug-linker，针对MMAE、MMAF等强疏水毒素，有效降低drug-linker聚集，提升高DAR ADC的合成成功率，改善ADC理化稳定性。第二，多官能团分步偶联，正交保护策略：PNP端先偶联payload；Fmoc脱除后主链氨基偶联抗体/靶向多肽；Boc脱除后谷氨酸侧链羧基可进一步修饰亲水基团、靶向配体、荧光标记，实现三组分分步组装，构建多功能偶联分子。第三，连接子电荷与亲水构效研究，对比不带Glu、Glu侧链羧基游离/保护状态对ADC溶解度、细胞摄取、旁观者效应、体内PK的影响，是亲水改造连接子的核心研究工具。第四，酶激活型多肽前药、多模态成像探针，利用谷氨酸羧基修饰荧光、螯合基团，构建诊疗一体化分子。第五，PROTAC、多肽药物偶联物PDC，需要长柔性亲水肽骨架、多修饰位点的可降解linker场景。该产品是Fmoc-Val-Cit-PAB-PNP的升级版本，解决经典Val-Cit连接子疏水缺陷，适合需要提升drug-linker溶解度、降低ADC聚集风险的预临床管线，是CDMO定制ADC里需求量持续上升的一款高阶连接子。

使用指南与操作规范

储存条件：-20℃，氩气密封避光干燥，对酸碱蒸汽敏感，分开存放；PNP酯水解、Boc遇酸脱除、Fmoc遇强碱脱除三重风险，必须严格分装单次用量，减少开盖次数。溶剂：无水DMSO、无水DMF为主，全程无水操作。反应顺序是重中之重：第一步，PNP端优先和氨基payload偶联，DIPEA弱碱、室温避光，HPLC-LC-MS跟踪，纯化冻干；第二步，按需选择脱保护：脱Fmoc（20%哌啶/DMF，碱条件，Boc稳定），用于主链氨基偶联抗体；脱Boc（TFA/DCM，酸性条件，Fmoc稳定），释放谷氨酸侧链羧基，用于EDC/NHS活化羧基做二次修饰；严禁同时酸碱处理，避免多保护基同步脱落产生复杂杂质。偶联payload时，谷氨酸侧链Boc起到封闭羧基的作用，避免侧链羧基和payload氨基发生副反应，偶联完成后再按需脱Boc暴露羧基。反应监测：HPLC多通道紫外（260、280、301 nm）搭配LC-MS，区分PNP水解杂质、单脱Boc、单脱Fmoc、双脱保护杂质；谷氨酸容易发生差向异构，HPLC需要足够梯度分离差向异构体。纯化：制备HPLC，甲酸水体系适合保留Fmoc、Boc全保护产物；脱Boc后的产物要及时中和TFA，避免长时间酸性环境肽键水解。安全操作：哌啶、TFA、氯甲酸酯原料腐蚀性刺激性强，通风橱全套防护，废液单独分类。质控要点：入库检测HPLC纯度、差向异构体含量、LC-MS分子量；体外酶切验证，确认插入Glu-Boc单元不会抑制组织蛋白酶B剪切Val-Cit；血浆稳定性测试，确认亲水改造不降低循环稳定性。重要提醒：如果不需要侧链羧基修饰，可全程保留Boc；Boc脱除后羧基带负电，会改变分子色谱保留、偶联反应pH窗口，后续抗体偶联需要重新优化缓冲液pH与当量。