产品说明

产品介绍

Fmoc-Val-Cit-PAB-PNP是Fmoc保护路线下成熟的预活化ADC连接子，也是行业内标准Val-Cit-PAB-PNP试剂，CAS：863971-53-3。结构包含N端Fmoc碱敏保护基、Val-Cit二肽酶切单元、PAB自消除间隔、C端PNP对硝基苯基碳酸酯活化离去基团。PNP碳酸酯可以在温和弱碱条件直接和氨基payload偶联，无需额外缩合剂；Fmoc可以用哌啶选择性脱除，释放N端伯胺，用于后续和抗体、多肽、配体偶联。释放通路和其他Val-Cit-PAB体系一致：循环血浆稳定，进入溶酶体后组织蛋白酶B剪切二肽，PAB自发1,6消除，释放活性毒素，是多款上市ADC参考骨架的同源结构。和m-PEG3-Val-Cit-PAB-PNP的核心差异：该产品N端不是甲氧基封端，是可脱保护Fmoc氨基，偶联payload之后，依然可以脱Fmoc，再接入抗体或者其他靶向单元，合成路线更灵活，适合N端需要修饰的位点特异性ADC。Fmoc的紫外发色团+PNP的硝基苯紫外吸收，双紫外信号，HPLC监测非常方便，杂质谱容易解析。该试剂是白色至淡黄色粉末，PNP活化酯对水、碱敏感，水解风险高，是Fmoc系列里用量很大、工艺很成熟的一款连接子，绝大多数Fmoc路线Val-Cit ADC都以它为核心原料。

主要应用方向

第一，ADC药物研发主流原料，直接和MMAE、MMAF等氨基类毒素偶联得到Fmoc-Val-Cit-PAB-payload；随后哌啶脱除Fmoc，暴露氨基，再和带羧基、NHS酯、马来酰亚胺的抗体手柄偶联，构建完整ADC，是Fmoc策略合成ADC的标准路线。第二，固相多肽合成终产物，固相上组装Fmoc-Val-Cit-PAB之后，原位活化成PNP酯，直接在固相上偶联payload，简化液相纯化步骤。第三，可激活荧光探针、前药合成，PNP端偶联氨基荧光团，脱Fmoc后接靶向多肽，构建肿瘤特异性激活成像探针。第四，连接子对照实验，作为基准对照，对比PEG修饰、Glu插入、二胺修饰等衍生连接子的酶切活性、细胞毒性、PK特性，是构效研究的标杆试剂。第五，CDMO工艺开发、工艺转移的标准参考品，很多文献、专利里Val-Cit连接子的对照化合物就是该分子。该产品应用非常成熟，文献数据丰富，重复性好，适合预临床体外细胞、体内CDX模型、稳定性评估等全套ADC评价实验，是实验室常备经典linker。

使用指南与操作规范

储存条件：-20℃，避光、氩气密封干燥，分装小份，PNP酯*易水解，DMSO母液现配现用，不隔夜存放。溶剂：无水DMSO、无水DMF，严格控水。payload偶联操作：linker和氨基payload投料比1.05–1.2:1，DIPEA为有机碱，室温避光搅拌2–4h；HPLC 260 nm监测PNP信号下降，LC-MS确认drug-linker分子量，原料消耗完全立刻纯化。Fmoc脱保护步骤：偶联payload、纯化冻干之后，再用20%哌啶/DMF室温5–10 min脱Fmoc；禁止先脱Fmoc再做PNP偶联，游离伯胺会和PNP酯发生分子内自反应，大量生成环合杂质，这是很常见工艺失误。纯化：制备反相HPLC，乙腈+0.1%甲酸水梯度，冻干收集产物，避免碱性条件长时间存放。安全防护：氯甲酸酯衍生原料、哌啶、对硝基苯酚水解产物都有刺激性，全程通风橱，废液分类收集。质控：每批次检测HPLC纯度、LC-MS，同时做血浆稳定性、重组组织蛋白酶B酶切释放验证；重点监控水解杂质（Fmoc-Val-Cit-PAB-OH）含量，水解杂质无偶联活性，会降低后续ADC收率。配套提示：该连接子得到的drug-linker水溶性偏弱，高DAR偶联时容易聚集，如需改善水溶性，优先选用m-PEG3版本或者Fmoc-Glu(Boc)衍生版本；适合常规疏水毒素，不适合对碱敏感的payload分子。