产品说明

CY3-Estradiol，即 Cy3 荧光标记 17β- 雌二醇，是将花青素类荧光染料 Cy3（Cyanine3）通过化学连接臂与雌二醇母核偶联得到的靶向荧光探针，是内分泌、肿瘤、分子药理与环境检测领域重要的小分子示踪试剂。17β- 雌二醇是人体内源性雌激素，通过结合雌激素受体 ERα、ERβ 调控细胞增殖、分化、凋亡，参与生殖系统发育、骨代谢、心血管稳态以及乳腺、子宫内膜肿瘤发生进程；但天然雌二醇本身无荧光信号，无法在活细胞、组织内直接可视化追踪其分布、转运与受体结合行为，Cy3 标记改造正是为了解决这一痛点，在保留雌二醇与雌激素受体特异性结合活性的基础上，赋予分子稳定可检测的橙色荧光信号。

Cy3 属于经典花青素荧光染料，激发波长约 550 nm，发射波长约 570 nm，荧光信号明亮，摩尔消光系数高，在 pH 4–10 区间荧光强度基本不受酸碱度干扰，适配常规荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计、荧光偏振检测平台，和 TRITC 滤光片组完全兼容，是生物标记中应用成熟的可见光荧光团之一。在偶联工艺上，为避免染料直接修饰雌二醇母核上关键羟基，破坏和雌激素受体结合口袋的识别能力，合成时一般选择在雌二醇的 C3 位或侧链引入氨基、叠氮等反应位点，搭配柔性 PEG 连接臂，采用 Cy3-NHS 酯酰胺化或点击化学（CuAAC）方式完成偶联。柔性连接臂可以降低荧光基团的空间位阻，很大程度维持雌二醇的受体亲和性；反应后通过反相高效液相色谱分离纯化，去除未反应游离雌二醇、游离 Cy3 染料以及副产物，保证探针纯度，游离染料会带来非特异性背景荧光，是制备质控中重点控制指标。

CY3-Estradiol 核心价值在于实现雌二醇的原位可视化示踪。传统研究雌二醇 - 受体相互作用多依赖放射性配体结合实验、ELISA、Western blot，只能获取终点定量数据，无法观察激素在活细胞内的动态转运、受体在胞质与细胞核之间的穿梭过程。使用 CY3-Estradiol 孵育表达雌激素受体的细胞，探针可以穿透细胞膜，特异性结合胞内雌激素受体，共聚焦成像能够直观观察受体在细胞核内聚集、膜雌激素受体介导的快速信号复合体定位；在荧光偏振实验体系中，游离探针分子转动速度快、偏振值低，结合大分子受体后转动受限、偏振信号上升，可用于高通量筛选雌激素受体激动剂、拮抗剂，测定小分子和 ER 的竞争结合常数，广用于靶向雌激素受体新药前期筛选工作。

在肿瘤研究方向，CY3-Estradiol 常用于乳腺癌、子宫内膜癌雌激素受体表达异质性检测。ER 阳性肿瘤细胞会富集该探针，可辅助区分 ER 阳性与阴性细胞，为单细胞水平受体分型提供成像手段；同时也用于研究内分泌耐药机制，观察耐药突变受体是否依然能够结合配体、核转位是否异常。环境分析领域，CY3-Estradiol 作为示踪配体，结合雌激素受体生物传感芯片、适配体荧光传感体系，用于水样、土壤中环境雌激素的竞争性荧光检测，相比仪器法成本更低、检测速度更快，适合批量筛查内分泌干扰物。

该探针也存在固有局限。Cy3 存在一定光漂白效应，长时间连续激光扫描会出现荧光衰减，长时间活细胞成像需要控制曝光参数；偶联修饰尽管保留大部分生物活性，但和天然雌二醇的受体亲和力仍存在小幅差异，实验需要设置天然雌二醇竞争对照，排除非特异性吸附；另外脂溶性较强，在水溶液中易聚集，工作液一般需要少量助溶剂，且现配现用，避光低温保存。总体而言，CY3-Estradiol 打通了雌激素从终点检测到活细胞动态成像的技术路径，弥补传统生化方法无法空间定位的短板，是连接基础内分泌研究、药物开发和环境毒理检测的核心荧光探针，随着超高分辨荧光成像技术普及，该探针在单分子水平解析雌激素信号通路机制方面还有持续拓展空间。