产品说明

CY3-Bilirubin，Cy3 荧光标记胆红素，是 Cy3花青素荧光染料与胆红素共价偶联构建的荧光示踪探针，主要用于胆红素代谢、胆红素与白蛋白 / 受体相互作用、肝脏转运、新生儿黄疸、抗氧化及炎症相关机制研究。胆红素是血红素降解的终产物，由血红素加氧酶、 biliverdin 还原酶依次催化生成，生理状态下主要以 Z,Z 构型存在，在血液中绝大部分与白蛋白结合运输，经肝脏 UGT 酶葡萄糖醛酸化后随胆汁排泄；胆红素本身具备弱荧光特性，且光敏感，光照下会发生构型异构转化为光胆红素，天然信号弱、稳定性差，很难直接定量与成像，引入 Cy3 标记后，获得强而稳定的特征橙色荧光，为追踪胆红素在体内外的转运、蛋白结合、细胞摄取过程提供可视化工具。

Cy3 荧光基团激发峰 550 nm、发射峰 570 nm，亮度高、pH 耐受性好，和胆红素偶联之后，荧光信号与胆红素母核行为耦合，区别于胆红素自身依赖蛋白结合才产生荧光的特点，CY3-Bilirubin 在游离状态下也能输出稳定荧光，大幅拓宽检测适用场景。胆红素分子拥有两个丙酸侧链，是主要修饰位点；合成路线一般选择胆红素丙酸羧基活化，和氨基修饰 Cy3 或者 Cy3-NHS 酯发生酰胺缩合，部分方案引入短链 PEG 作为连接臂，缓解 Cy3 疏水聚集，同时减少荧光团对胆红素与白蛋白、转运蛋白识别的干扰。合成产物必须经过 HPLC 纯化，除去游离胆红素、游离 Cy3，游离染料会和白蛋白非特异结合，造成假阳性信号；成品需要避光、-20℃低温保存，避免胆红素母核光异构分解，配制工作液全程避光操作。

CY3-Bilirubin 核心应用方向是胆红素转运与代谢机制研究。胆红素代谢异常是高胆红素血症、新生儿黄疸、吉尔伯特综合征、Crigler-Najjar 综合征的病理基础，长期以来，胆红素进入肝细胞、被 UGT1A1 修饰、通过 MRP2 泵入胆小管的过程很难直接观测。CY3-Bilirubin 可以孵育肝细胞、类肝器官模型，借助共聚焦显微镜直观观察胆红素是否被细胞摄取、在胞内的亚细胞分布，区分是被动扩散还是 OATP1B1/OATP1B3 转运体介导的主动摄取；利用荧光共振能量转移、荧光偏振技术，还可以定量测定胆红素和白蛋白、Z 蛋白、UGT 酶、核受体 PPARα 的结合亲和力，解析胆红素作为信号分子调控炎症、氧化应激通路的分子机制，近年研究证实胆红素不只是代谢废物，还是内源性抗氧化剂，CY3-Bilirubin 为其非经典信号功能研究提供关键工具。

在新生儿光疗相关研究中，CY3-Bilirubin 被用来对比天然 Z,Z 胆红素与光异构产物（光胆红素）的转运差异。光疗原理就是将脂溶性 Z,Z 胆红素转化为水溶性光胆红素，不经葡萄糖醛酸化即可排泄；使用标记探针，能够在细胞模型上对比两种构型被肝细胞摄取、外排的效率差异，评价不同波长光源的转化效率，优化光疗方案。同时该探针也用于药物 - 胆红素相互作用筛查：很多药物会竞争白蛋白胆红素结合位点，诱发胆红素游离升高，增加核黄疸风险，CY3-Bilirubin 结合荧光光谱，可以快速评估候选药物是否会置换白蛋白结合胆红素，在新药早期安全性评价中发挥作用。

该探针的局限性同样需要重视。共价修饰改变了胆红素分子理化性质，标记产物和天然胆红素的转运速率、酶底物活性不能完全等同，所有成像、结合实验都必须搭配天然胆红素竞争对照组；Cy3 光漂白限制长时间活细胞动态拍摄；胆红素母核本身易氧化降解，探针有效期短，不适合长期示踪动物体内长周期代谢；另外胆红素强疏水性，CY3-Bilirubin 在水体系中容易聚集，需要控制浓度，避免聚集导致荧光猝灭。

综合来看，CY3-Bilirubin 把胆红素从单纯生化检测指标转变为可追踪的荧光分子探针，突破传统比色法、酶法只能检测总胆红素浓度的局限，实现从浓度定量到空间定位、动态追踪的升级。在肝病代谢、新生儿黄疸病理、药物安全性评价、胆红素抗氧化功能等前沿方向，CY3-Bilirubin 是不可或缺的工具，为阐释胆红素复杂的双重角色 —— 毒性代谢物与内源保护信号分子，提供了直观、灵敏的可视化研究手段。