产品说明

负载 microRNA 的阳离子脂质体是非病毒型核酸递送载体，由阳离子脂质、辅助脂质 DOPE、胆固醇复配组装而成，依靠阳离子头部的正电荷与带负电的 microRNA 磷酸骨架静电结合形成脂质复合物，可保护 microRNA 免于体内核酸酶降解，解决游离 microRNA 稳定性差、细胞穿透弱、易被清除的短板，仅用于科研实验，不可直接作为临床制剂使用PMC。常用阳离子脂质包括 DOTAP、DOTMA 等，DOPE 作为助脂质，在内体酸化环境下促进膜融合，实现内体逃逸，将 microRNA 释放进入胞质发挥基因调控功能；胆固醇用于稳定脂质双分子层结构，提升胶体稳定性，降低载体自身细胞毒性。该类脂质体粒径通常控制在 80–150 nm，可通过 PEG 修饰调控表面电荷，平衡转染效率与体内长循环能力。

该载体适用的 microRNA 种类广，涵盖抑癌 miRNA、促纤维化 miRNA、炎症相关 miRNA 等，应用场景集中在肿瘤基因调控、组织纤维化干预、血管重塑、炎症相关疾病的基础研究。在肿瘤研究中，可递送 Let7、miR145、miR7 等抑癌 microRNA，下调靶癌基因，抑制肿瘤增殖、侵袭与转移；在心血管、肝肺纤维化模型中，递送对应的 miRNA，调控成纤维细胞活化，减轻纤维化进程；也可用于细胞重编程、干细胞分化调控、活体小动物体内分布与基因功能验证实验，同时常作为对照载体，和可电离脂质纳米粒、聚合物载体对比转染与体内递送差异。

主流制备方式为薄膜水化法、乙醇注入法，操作流程简单可控。薄膜水化法：将 DOTAP、DOPE、胆固醇按摩尔比例溶于氯仿，旋转蒸发除去有机溶剂形成均匀脂质薄膜，真空干燥除残留溶剂，加入无酶 PBS 水化，多次冻融后经聚碳酸酯膜挤出，得到均一阳离子脂质体；之后将脂质体与 microRNA 按照合适 N/P 比温和孵育，静电复合得到 microRNA 脂质复合物。乙醇注入法则是将脂质溶于无水乙醇，快速注入搅拌的无酶缓冲液，自发组装脂质体，再和 microRNA 孵育复合。实验关键要点：全程无酶操作，避免 RNase 污染；N/P 比值是核心参数，比值过低包封率不足，过高会带来明显细胞毒性；制备完成后采用琼脂糖凝胶阻滞电泳验证结合能力，DLS、Zeta 电位表征粒径与电位，qPCR 检测细胞内 microRNA 富集水平，荧光标记 microRNA 结合共聚焦显微镜观察细胞摄取与胞内定位；体外释放与转染实验设置游离 microRNA 对照组，评价载体的保护效果与基因沉默效率。该载体配方灵活、成本可控，是 miRNA 功能学研究常用的递送系统之一。