产品说明

CY7-PEG-DMG，CY7-聚乙二醇-二肉豆蔻酰-sn-甘油，是一款近红外荧光标记PEG脂质探针，由三部分结构组成：疏水锚定单元DMG（二肉豆蔻酰-sn-甘油）、中间亲水PEG链段、末端花青素CY7近红外荧光基团。DMG为两条C14饱和脂肪酸甘油酯结构，脂溶性强，能够稳定嵌入脂质纳米粒、脂质体、细胞膜脂质双分子层，作为脂质锚，将CY7荧光基团固定在脂质载体表面；PEG亲水链提升分子水溶性，降低载体非特异性吸附，延长体内循环时间，同时隔开荧光染料与脂质疏水区域，减少染料聚集导致的荧光淬灭；CY7属于七甲川花青素近红外染料，激发波长约750 nm，发射波长约770 nm，发射窗口落在近红外一区，组织穿透深度高，生物组织自发荧光干扰很低，适合活体动物体内成像研究。

本品外观为墨绿色或者深绿色固体粉末，可溶于氯仿、DCM、乙醇等有机溶剂，可和其他脂质共溶，在水相中参与自组装形成荧光标记脂质纳米颗粒；整体生物相容性良好，DMG的酯键在体内可被脂酶降解，PEG经肾脏代谢，CY7染料骨架代谢稳定，荧光信号持久。区别于单纯游离CY7染料，CY7-PEG-DMG自带脂质锚，不需要额外化学偶联，可直接和LNP脂质组分共混，一步完成荧光标记，标记过程不破坏LNP原有理化性质、核酸包载能力以及体内递送特性。该产品荧光量子产率稳定，染料纯度高，PEG均一性好，荧光背景低，是LNP活体示踪、脂质载体生物分布研究的经典标记试剂，广用于核酸药物递送、活体光学成像、肿瘤示踪等科研实验，仅用于科研。

产品应用
CY7-PEG-DMG很核心用途是脂质纳米粒LNP、脂质体的近红外荧光标记与活体示踪。在mRNA、siRNA LNP配方中少量添加本品，和其他脂质组分共混，通过微流控制备得到自带CY7荧光信号的LNP；借助近红外成像设备，实时追踪LNP经静脉、瘤内、皮下给药后在小鼠体内的分布、富集、代谢过程，观察载体在肝脏、脾脏、肿瘤部位的富集时序，评估LNP的靶向能力、体内循环时长与清除规律，是核酸递送制剂体内评价必不可少的工具。
其次用于细胞层面脂质载体摄取、胞内转运可视化研究。标记后的荧光LNP与细胞共孵育，借助共聚焦激光扫描显微镜，观察纳米颗粒被细胞内吞、进入内体、胞内释放的全过程，定量分析不同细胞系对LNP的摄取效率，对比不同配方、不同修饰策略对胞内递送的影响，为LNP配方优化提供直观成像数据。
该探针还用于肿瘤活体成像、淋巴循环示踪研究。CY7近红外光穿透深度优于可见光荧光染料，可用于荷瘤小鼠肿瘤荧光成像，评估脂质载体的肿瘤富集效果；也可用于前哨淋巴结示踪、炎症部位富集成像。同时，CY7-PEG-DMG可用于脂质膜、外泌体的荧光标记，借助DMG锚定到外泌体膜表面，实现外泌体细胞摄取、体内迁移示踪；也可用于制剂稳定性考察，通过荧光信号变化监测LNP在储存、血清孵育过程中是否发生聚集、解离。

使用方法
储存与溶解
CY7染料对光照很度敏感，产品必须-20℃避光密封保存，全程避光操作；分装保存，避免反复冻融。母液用无水氯仿或者DCM配制，配好的母液避光冷冻保存，尽量减少光照暴露；不建议长期放置水溶液，防止染料淬灭、酯键水解。
LNP荧光标记制备方案
CY7-PEG-DMG作为微量添加组分，和可电离脂质、DSPC、胆固醇、常规DMG-PEG共同溶于有机相，添加摩尔比例很低，一般0.1%~0.5%即可满足成像需求，添加量过高容易发生荧光淬灭，同时改变LNP理化性质；有机相配制完成后，微流控和核酸水相混合制备荧光标记LNP，后续超滤或者透析纯化，除去有机溶剂。制备全程避光。
细胞成像与活体成像操作
细胞摄取实验：标记LNP按照预设浓度和细胞共孵育，孵育结束后PBS清洗细胞，固定或者活细胞状态下用共聚焦显微镜采集CY7荧光通道信号；活体成像实验：小鼠给药之后，在设定时间点麻醉，放置于近红外活体成像系统采集荧光信号，设置空白对照组扣除组织自发荧光背景。

注意事项
全程避光，所有操作、离心、孵育步骤避光；染料浓度不可过高，防止淬灭；配制脂质混合液时充分混匀，保证染料均匀分散在脂质相中；实验设置未标记空白LNP组，排除脂质本身背景干扰；避免CY7-PEG-DMG长时间接触强氧化剂；标记后的LNP建议现制现用，避光4℃短期保存。