一、文献基础信息

英文标题:Point-of-care detection of Monkeypox virus clades using high-performance upconversion nanoparticle-based lateral flow assay 
中文标题:基于高性能上转换纳米颗粒的侧向流试纸实现猴痘病毒分支现场快速检测
期刊:Mikrochimica Acta 
原文链接:https://link.springer.com/article/10.1007/s00604-024-06241-3
发表时间:2024;
DOI:10.1007/s00604-024-06241-3
作者:Jin B, Ma C, Zhang C 等

基于高性能上转换纳米颗粒的侧向流试纸实现猴痘病毒分支现场快速检测 

二、文献核心主要内容

背景:猴痘病毒存在不同进化分支,不同分支致病性存在差异,现场快速分型检测对于疫情防控至关重要。传统 PCR 检测依赖实验室大型仪器,操作复杂、耗时久,不适合资源匮乏地区现场筛查。上转换纳米颗粒 (UCNP) 具备近红外激发、背景荧光低、信号稳定的优势,适合侧向流免疫 / 核酸试纸的信号报告。需要对 UCNP 进行表面功能化修饰,引入链霉亲和素,借助生物素-链霉亲和素相互作用固定核酸探针;DSPE-PEG-COOH 提供羧基活性位点,实现纳米颗粒与链霉亲和素共价偶联,同时 PEG 链改善纳米颗粒在缓冲液中的分散稳定性,减少非特异性吸附。

主要内容:采用 DSPE-PEG-COOH 修饰上转换纳米颗粒,通过羧基活化偶联 Streptavidin,制备 Streptavidin 功能化 UCNP 探针;探针结合生物素标记的猴痘病毒分支特异性核酸探针;组装侧向流试纸条;优化探针浓度、缓冲液体系、孵育条件;评价试纸的检测灵敏度、特异性,区分不同猴痘病毒分支;模拟临床样本验证试纸条实际检测性能。

实验结果:成功构建链霉亲和素修饰上转换纳米探针;该侧向流试纸可以实现无扩增条件下猴痘病毒不同分支鉴别,检测灵敏度高,和其他痘病毒无交叉反应;整个检测流程操作简便,短时间内即可读取荧光信号;DSPE-PEG-COOH 修饰有效降低了纳米探针在试纸膜材料上的非特异性吸附,降低背景干扰,显著提升试纸信噪比;模拟样本检测获得可靠结果,具备现场快速筛查潜力。

研究结论:基于 DSPE-PEG-COOH 与链霉亲和素修饰的上转换纳米探针侧向流试纸,可实现猴痘病毒分支的现场快速检测;为新发病毒的 POCT 核酸检测试纸开发提供可行的纳米修饰策略。

DSPE-PEG-COOH 修饰上转换纳米颗粒 

三、瑞禧产品

产品名称:DSPE-PEG-COOH、Streptavidin;

DSPE-PEG-COOH 提供羧基用于纳米颗粒表面修饰,共价偶联链霉亲和素;

Streptavidin 用于结合生物素化核酸探针,构建上转换纳米检测探针。

 

四、论文材料部分引用示例

DSPE-PEG-COOH and Streptavidin were purchased from Xi’an Ruixi Biological Technology Co., Ltd. (Xi’an, China). Upconversion nanoparticles and biotin-labeled monkeypox-specific oligonucleotide probes were obtained from commercial suppliers. DSPE-PEG-COOH was used for surface functional modification of up-conversion nanoparticles. Streptavidin was covalently conjugated to the carboxyl group of DSPE-PEG-COOH-modified nanoparticles to capture biotinylated nucleic acid probes for lateral-flow assay construction.