英文标题:Magnetic Multiarm Scaffold for the One-Step Purification of Epitope-Specific Neutralizing Antibodies
中文译名:多臂磁性支架用于表位特异性中和抗体的一步纯化
作者:Dongmei Lv, Haisi Dong, Ang Su, Ying Qin, Jianwei Dong, Lerong Ma, Jianing Li, Huping Jiao, Mingjun Zhang, Daxin Pang, Junqiu Liu, Hongsheng Ouyang
文献链接:https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.9b00769

概述:
表位特异性中和抗体(EsAbs)在传染病诊断、中和抗体药物研发中价值很高,但传统单抗制备流程繁琐、纯化步骤多、非特异性吸附严重、回收率偏低,限制中和抗体快速筛选。该研究开发一种M@Au NPs多臂磁性纳米支架(原料采用瑞禧生物M@Au NPs),搭建一步法亲和纯化平台,直接从免疫血清中富集分离目标表位特异性中和抗体,简化纯化流程,提升抗体捕获容量与重复使用性能,为病毒中和抗体快速分离、高通量筛选提供新型固相介质方案。 主要内容:研究以瑞禧M@Au磁性金复合纳米颗粒为核心基底,在颗粒表面构建多臂状的亲和支架结构,偶联目标抗原表位,得到M@A-E生物偶联物。相比于商用磁珠,M@Au NPs具备磁性快速分离、金表面易于生物分子固定、比表面积大的优势。多臂结构提供大量抗原结合位点,大幅提高抗体负载能力,同时降低非特异性蛋白吸附。实验结果显示,每毫克M@A-E可以捕获约30 μg表位特异性中和抗体,产量约为商用磁珠的2倍。该支架可在pH 2.5甘氨酸洗脱缓冲液中将结合抗体释放,经过10次吸附-洗脱循环后,依然保持约20 μg/mg的捕获能力,特异性没有明显下降。研究使用免疫血清样本进行验证,一步纯化即可得到目标中和抗体,无需多步层析,缩短纯化周期,减少抗体活性损失。该平台适配血清、细胞上清等多种生物样本,通用性强。
结论:该研究证实瑞禧M@Au NPs是构建高性能抗体纯化介质的优质基材。基于M@Au NPs的多臂磁性支架实现了表位特异性中和抗体一步富集纯化,兼具高吸附容量、低非特异吸附、可循环复用的优势,解决传统抗体纯化耗时长、回收率低的痛点。该体系适用于病毒中和抗体筛选、血清中和抗体检测等场景,在传染病防控、抗体药物前期筛选领域具备很好的转化前景。

相关文献:
1、M@Au 磁性金纳米支架用于循环肿瘤细胞特异性捕获与原位荧光检测|M@Au magnetic-gold scaffold for specific capture and in-situ fluorescence detection of circulating tumor cells|Dongmei Lv, Haisi Dong, Junqiu Liu
2、PEOz-NH₂修饰可降解介孔硅用于骨肉瘤 pH 响应化疗-光热一体化诊疗|PEOz-NH₂ modified biodegradable MSNs for pH-responsive chemo-photothermal theranostics of osteosarcoma|Zhaohui Li, Peng Zhang, Dan Wang
3、DSPE-mPEG2000 稳定的阳离子多肽递送系统用于 MRSA 感染的反义抗菌治疗|DSPE-mPEG2000 stabilized cationic polypeptide delivery system for antisense therapy of MRSA infection|Yaoyao Li, Yue Hu, Zul Kamal
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6、Cy5-NHS 酯标记外泌体用于肺转移瘤活体靶向示踪研究|Cy5-NHS ester labeled exosomes for in vivo targeted tracking of lung metastatic tumors|Rui Zhang, Qian Wang, Shuo Li