产品说明

描述

FMOC-NH-PEG-NH2是Fmoc单保护双氨基PEG衍生物，一端氨基被Fmoc基团掩蔽，另一端是游离伯氨基；Fmoc基团在哌啶碱性条件下脱除，释放第二个氨基。和BOC-NH-PEG-NH2结构逻辑类似，区别在于保护基脱除条件正交：Boc酸脱、Fmoc碱脱。这款试剂用来实现双氨基顺序激活：先用裸露氨基接枝第一种配体，纯化之后哌啶脱Fmoc，再暴露第二个氨基接枝第二种配体，构建不对称双配体修饰体系。适合酸敏感、不能耐受TFA强酸的底物，替换Boc版本使用。PEG链拉开两个氨基位点距离，降低分子内交联、环合副反应；Fmoc芴环带来紫外特征吸收，方便用紫外分光、HPLC定量追踪脱保护进度，表征比Boc体系更方便。它是Fmoc正交保护工具箱里面不对称双氨基PEG核心原料，在多肽修饰、细胞靶向双配体纳米载体、生物传感异源标记体系应用广。

基本信息

中文名称：芴甲氧羰基聚乙二醇氨基
英文名称：FMOC-NH-PEG-NH2
常用PEG分子量：1000、2000、3400、5000 Da
外观：白色蜡状固体
溶解性：易溶于水、DMF、DCM、DMSO
基团特性：一端游离伯氨基；一端Fmoc保护氨基，碱解脱保护
储存条件：-20℃密封避光干燥保存，远离仲胺、强碱，避免Fmoc提前脱保护

作用原理

FMOC-NH-PEG-NH2依靠Fmoc选择性掩蔽实现氨基分步反应。游离伯氨基具备亲核活性，在弱碱性PBS下可以优先和NHS酯、EDC活化羧基发生酰胺化偶联；另一端氨基被Fmoc保护，芴环的空间位阻抑制氨基亲核性，在第一步偶联全程保持惰性，不会竞争配体，保证单端选择性修饰。第一步产物纯化完成之后，使用哌啶/DMF碱性体系处理，Fmoc发生β消除裂解，释放第二个游离氨基，此时再引入第二种不同配体完成二次偶联。PEG链作为间隔臂，减少两个氨基之间静电吸引与空间干扰，大幅降低双氨基分子内环合、分子间交联杂质；同时PEG水化层提升水相相容性。Fmoc自带紫外信号，301 nm特征吸收，实验人员可以直接用紫外读数判断脱保护程度，相比Boc体系缺少特征紫外标记，质控手段更简单直观。正交碱脱保护路线避开TFA强酸，适合核酸、酸敏感多肽、部分蛋白底物。

使用指南

实验分为第一步游离氨基选择性偶联模块、Fmoc碱性脱保护模块、第二步氨基二次偶联模块，全程设置紫外监测。
模块一：第一步选择性偶联。pH7.4–8.0 PBS缓冲液溶解FMOC-NH-PEG-NH2；加入第一种NHS配体，配体摩尔当量控制0.9 eq，略微不足当量减少双取代杂质；室温孵育2–3 h；反应结束超滤或者透析除去游离配体。取样测301 nm紫外，Fmoc吸收信号保持稳定，证明保护基没有提前脱除；TNBS氨基显色显示氨基信号下降，代表裸露氨基发生偶联。
模块二：Fmoc脱保护。将第一步产物冻干，溶于无水DMF；配制20%哌啶/DMF脱保护液，室温孵育5–10 min，更换新鲜脱保护液重复一次；DMF洗涤沉淀5次除去哌啶与二苯并富烯副产物；乙醚沉淀，真空干燥，重新溶解于中性PBS。检测301 nm紫外吸收大幅升高，是Fmoc脱保护的标志性信号。
模块三：第二步氨基偶联。调节体系pH7.5–8.2，加入第二种NHS配体或者EDC/NHS活化羧基配体，孵育2–4 h；透析纯化得到不对称双配体PEG偶联物。 副反应控制：第一步不要长时间反应；体系禁止Tris、甘氨酸等游离氨基杂质；无水DMF脱保护效果远优于水相；如果底物是蛋白，偶联缓冲液可以添加少量蔗糖保护蛋白构象。 对照设置：①不加配体空白FMOC-NH-PEG-NH2；②不做脱保护对照组。

应用场景

碱敏感底物不对称双配体探针、Fmoc正交体系双功能纳米载体、多肽双位点差异化修饰、核酸靶向双配体构建、异源双标记生物传感探针。

常见热门问题解答

Q1：FMOC-NH-PEG-NH2和BOC-NH-PEG-NH2怎么选？
A1：底物不耐强酸（核酸、部分蛋白）选Fmoc版本；底物对碱不稳定、怕哌啶选Boc版本，二者脱保护正交。
Q2：Fmoc脱保护之后，紫外吸收会不会干扰后续荧光检测？
A2：301 nm属于紫外区，常规Cy、FITC荧光通道不受干扰；如果需要紫外检测样品，需要充分洗涤除去二苯并富烯。
Q3：第一步偶联会不会有少量Fmoc脱落？
A3：中性PBS短时间偶联Fmoc稳定性很好，副产物很低；pH>8.5长时间孵育会增加脱保护风险。
Q4：能不能一锅反应同时修饰两个氨基？
A4：不建议，一锅反应产物是混合物，单保护设计初衷就是分步修饰，获得均一双不对称产物。