产品说明

FITC-Galactinol是异硫氰酸荧光素（FITC）标记的肌醇半乳糖苷荧光探针。肌醇半乳糖苷是植物棉子糖合成通路关键供体底物，参与植物抗逆应答、种子储藏物质积累、韧皮部糖分分配；FITC是经典绿色荧光染料，激发波长约495 nm，发射波长约519 nm，信号明亮，适配绝大多数荧光显微镜、流式、酶标仪的绿色通道。探针采用位点特异性修饰，保留肌醇半乳糖苷糖苷结构完整性，保证探针的转运特性、底物活性和天然肌醇半乳糖苷高度接近，适合作为荧光类似物示踪糖分子行为。
本品为黄绿色固体粉末，水溶性良好，可直接溶于水、缓冲液、稀甲醇。对比RB-Galactinol，FITC标记成本友好，绿色通道兼容性很强，适合和CY3、CY5等红色荧光探针搭配做多色共定位实验；缺点是FITC光漂白速度更快，并且植物叶绿素在绿光波段存在较强自发荧光背景，更适合原生质体、离体细胞、体外酶学实验，透明组织成像。FITC的异硫氰酸酯键连接稳定，在中性、弱酸性植物生理缓冲体系下不容易断裂解离，游离染料污染风险低。产品经过纯化，标记均一性稳定，是植物糖转运、糖代谢体外筛选的常用荧光探针，仅用于科研。

产品应用
FITC-Galactinol核心用途是植物原生质体、离体细胞的肌醇半乳糖苷摄取与胞内转运成像。向原生质体悬浮体系加入探针，借助共聚焦显微镜观察绿色荧光进入细胞、在细胞质以及液泡中的分布动态，定量原生质体对肌醇半乳糖苷的摄取能力，验证糖转运蛋白功能，开展转运动力学测定。搭配红色细胞器标记染料，实现多色共定位，判断糖分子主要储存位点。
其次作为荧光底物用于体外棉子糖合成酶活性检测。FITC-Galactinol在酶催化下将半乳糖转移至蔗糖生成棉子糖，通过荧光色谱分离，根据产物荧光信号定量酶活性，适合高通量筛选调控棉子糖合成通路的小分子；也用于蛋白互作实验，检测糖转运蛋白与肌醇半乳糖苷的结合能力。
该探针还用于悬浮细胞、愈伤组织的糖转运研究。在植物愈伤组织培养体系加入探针，观察细胞团之间的糖分配；也用于植物韧皮部转运的初步筛选实验。在多标记实验方案中，FITC-Galactinol可以和RB-Galactinol以外的红色荧光探针组合，同时追踪两种不同糖分子在植物细胞内的差异化转运路径，解析糖转运网络的分工机制。

使用方法
储存与母液配制
产品-20℃避光密封干燥保存，分装，避免反复冻融；FITC对pH敏感，碱性环境荧光强度下降，母液优先用水或者pH7.2中性缓冲液配制，避光保存，水溶液尽量一周内用完。
原生质体/细胞孵育成像
工作浓度一般10–80 μM，加入原生质体悬浮液室温避光孵育；孵育完成用植物洗涤缓冲液轻柔离心洗涤2–3次，去除游离探针，重悬后上机成像；成像时调低激光功率，减缓FITC光漂白。
体外酶活体系
将FITC-Galactinol、蔗糖、酶蛋白置于合适pH缓冲液孵育，终止反应后采用TLC或者HPLC分离，荧光检测器采集信号分析反应产物。

注意事项
叶绿素绿色自发荧光干扰明显，成熟绿色叶片成像优先选择RB-Galactinol；严格控制体系pH，避免强碱性环境；做好空白对照和游离FITC对照，排除染料非特异性吸附；成像时使用抗淬灭试剂；孵育全程避光操作。