一、材料介绍

中文名称：单磷酸-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯；单磷酸-PEG-活性酯

英文名称：Mono-phosphate-PEG-NHS；Monophosphate-PEG-N-hydroxysuccinimide ester

别称：MP-PEG-NHS；AMP-PEG-NHS；单磷酸聚乙二醇琥珀酰亚胺酯

性状：白色或类白色固体粉末，具体形态随PEG分子量有所差异。

储存：建议-20℃、避光、干燥密封保存。NHS酯基团对水分敏感，取用前应将包装瓶恢复至室温再开启，以避免冷凝水汽进入。溶液状态不稳定，需现配现用。

纯度：科研级产品通常为95%以上（HPLC）。

供应商：西安瑞禧生物科技有限公司

温馨提示：本品仅供科研使用，不能用于人体实验或临床诊断。

单磷酸-PEG-NHS 是一种异双功能聚乙二醇衍生物，一端为单磷酸基团（-PO₃H₂），另一端为NHS活性酯，中间由PEG链段连接。单磷酸端可与金属氧化物（如TiO₂、Al₂O₃、ITO）或羟基磷灰石表面发生配位或吸附作用；NHS端则在弱碱性条件下与伯胺基团反应形成酰胺键。这一双端设计使其适用于无机材料表面功能化与生物分子共价修饰的衔接场景。

二、使用方法与实验条件

NHS酯端与氨基的偶联

缓冲液体系：反应应在不含伯胺的缓冲液中进行。Tris、甘氨酸等含氨基缓冲液会与目标分子的氨基竞争NHS酯，应避免使用。推荐使用PBS（pH 7.2–7.4）或HEPES缓冲液，pH范围宜控制在7.0–8.5之间。缓冲液浓度建议不低于50 mM，以维持反应过程中pH的稳定，因为NHS酯水解会释放酸性的N-羟基琥珀酰亚胺。

溶解与加入：该试剂通常先溶于无水DMSO或DMF配制成储备液（如10 mM），再缓慢加入水相反应体系中。有机溶剂在终反应体系中的体积占比建议控制在10%以内，以降低对蛋白或敏感分子的变性影响。储备液应即配即用，NHS酯在水相中的水解半衰期较短，pH 8.0条件下约为10–20分钟。

摩尔比与反应时间：NHS酯相对于目标氨基的用量需根据目标分子的氨基密度与空间可及性确定。对于蛋白类目标，20倍摩尔过量的NHS-PEG试剂标记1–10 mg/mL IgG通常可获得每分子4–6个连接臂的偶联水平，可作为起始参考。反应可在室温下进行30–60分钟，或冰上/4℃反应2小时。由于水解竞争的存在，延长反应时间并不一定提升偶联效率，建议通过预实验确定适宜的时间窗口。

磷酸端与材料表面的锚定

单磷酸基团与金属氧化物表面的结合通常在弱酸性至中性条件下进行。文献中给出的典型条件为pH 5.5–6.5、低离子强度环境，与TiO₂纳米颗粒或ITO基底孵育即可实现锚定。这一pH范围与NHS端偶联所需的弱碱性条件存在差异，因此在两步操作策略中需注意顺序安排。

顺序选择：若采用“先锚定后偶联”策略，先将单磷酸-PEG-NHS通过磷酸端固定于材料表面，清洗去除未吸附分子后，再调节体系至pH 7.0–8.0进行NHS端与氨基分子的反应。若采用“先偶联后锚定”策略，则先在弱碱性条件下完成NHS端与目标分子的偶联，纯化后以磷酸端锚定至材料表面。前者适合需要控制表面PEG密度的场景，后者适合目标分子对NHS水解敏感或需要精确控制化学计量比的情况。

操作注意事项

NHS酯的水解是影响偶联效率的主要因素。储备液应保持无水，工作液配制后尽快使用，未用完的溶液不宜留存。若发现偶联效率偏低，可排查缓冲液是否被含氨基物质污染、试剂是否因储存不当而部分失活。磷酸基团在强酸性条件下质子化程度增加，可能削弱其与金属表面的结合能力，因此涉及磷酸端锚定的步骤宜避免过低的pH。

三、相关产品

西安瑞禧生物科技有限公司在单磷酸-PEG衍生物及NHS活性酯类试剂方向可供选择的产品包括：

• 单磷酸-PEG-NHS 系列（PEG分子量可选1k、2k、3.4k、5k、10k等，支持定制）

• 双磷酸-PEG-NHS（磷酸基团数量区别于单磷酸版本）

• 单磷酸-PEG-FA（叶酸修饰的单磷酸PEG衍生物）

• NHS-PEG-NHS、MAL-PEG-NHS、NH₂-PEG-NHS 等其他异双功能PEG NHS酯

• 生物素-PEG-NHS、荧光素-PEG-NHS 等功能化NHS酯试剂

包装规格通常包括10 mg、25 mg、50 mg、100 mg等，具体可供规格以供应商实际库存为准。有特定PEG分子量或端基组合需求的用户，可通过定制合成途径与技术人员沟通参数。

温馨提示：以上产品均仅供科研使用，不能用于人体实验。