产品说明

RB-PEG-FA（Rhodamine B-PEG-FA，罗丹明 B 聚乙二醇叶酸），是一款红色荧光叶酸靶向 PEG 探针，分子骨架由罗丹明 B 荧光基团、聚乙二醇亲水间隔臂、叶酸靶向配体三部分共价组装而成，和 FITC-PEG-FA 同属叶酸靶向荧光探针，但光谱区间完全区分开，适合多色共标实验。

罗丹明 B 的激发波长约 555 nm，发射波长在 570–580 nm 区间，荧光信号稳定，抗光漂白能力优于 FITC，荧光背景更低，适配 TRITC、Cy3 通道滤光片，绝大多数荧光设备都可以直接采集信号。叶酸单元的靶向功能和同类叶酸探针保持一致，依靠和叶酸受体的高亲和力结合，介导探针选择性结合叶酸受体阳性肿瘤细胞；PEG 链起到增溶、隔离、降非特异性吸附的作用，和短链小分子叶酸染料相比，PEG 修饰后探针在血清环境中稳定性更强，不容易被蛋白非特异性包裹，同时减少罗丹明 B 本身的疏水聚集，缓解荧光自猝灭。产品形态多为粉红色固体，溶于水、DMSO、DMF，避光低温保存，PEG 分子量可选范围广，短链适合快速细胞结合实验，长链适合后续纳米载体修饰与初步体内分布观察。

RB-PEG-FA 很大优势在于光谱兼容性，经常和 FITC、DAPI 搭配实现多通道共定位染色，在同一视野下同时标记细胞膜靶向配体、胞质、细胞核，用来观察叶酸受体在细胞膜上的分布、配体入胞后和细胞器的共定位情况。

在细胞生物学实验中，它广泛用于叶酸受体表达量半定量分析，对比不同细胞系、不同药物处理前后叶酸受体表达变化，评估药物对叶酸受体表达的调控效果；也用于胞吞动力学实验，设置梯度孵育时间，通过荧光强度变化计算叶酸配体的结合速率、内吞速率，对比不同纳米载体的靶向递送效率。

在纳米材料方向，科研人员常将 RB-PEG-FA 修饰到脂质体、PLGA 纳米粒、二氧化硅纳米球表面，构建红色荧光靶向纳米探针，用来观察纳米颗粒在细胞内的定位，区分游离配体信号和纳米载体信号。

同时该探针也可用于组织切片免疫荧光染色，对肿瘤切片进行叶酸受体原位标记，观察肿瘤组织区域受体分布，辅助评估肿瘤异质性。相比于 FITC，罗丹明 B 荧光受细胞自发荧光干扰更小，适合厚切片成像；但它依然属于可见光区染料，组织穿透能力有限，活体成像深度不足，多用于体外细胞、离体组织实验，不适合深部肿瘤长时间活体追踪。

在实验设计中，RB-PEG-FA 经常作为叶酸靶向体系的红色荧光报告探针，和绿色 FITC 探针形成对照，用于双标竞争结合实验，验证游离叶酸可以竞争性抑制探针结合受体，证明结合过程是叶酸受体特异性介导，排除非特异性吸附带来的假阳性信号，是叶酸靶向研究中不可或缺的对照与成像工具。