产品说明

N3-PEG-COOH是广使用的异双功能PEG，一端叠氮（-N3），一端羧基（-COOH），将点击化学和EDC/NHS酰胺化偶联结合在一起。PEG亲水链作为柔性间隔，隔开叠氮与羧基，降低空间位阻，保证两端基团独立反应，同时改善水溶性，降低纳米载体非特异性蛋白吸附。叠氮基团支持无铜SPAAC（搭配DBCO）、铜催化CuAAC（搭配端炔）两类点击反应；羧基本身活性低，需要EDC/NHS在pH5.5–6.0 MES缓冲液活化为NHS活性酯，才能和伯氨基发生酰胺化反应，生成稳定酰胺键。

该试剂提供两条成熟合成路线：

路线一，先点击，将本品叠氮和DBCO修饰载体偶联，载体表面引入羧基，活化羧基之后接枝氨基多肽、蛋白、氨基荧光小分子；

路线二，先活化羧基，和氨基配体酰胺化偶联，制备配体-PEG-N3中间体，再利用叠氮端点击DBCO修饰纳米内核、探针。和N3-PEG-CHO相比，羧基偶联产物酰胺键化学稳定性更强，耐受更宽pH区间，适合长期储存的探针、载体；缺点是需要EDC/NHS活化步骤，流程更长。正交性良好，点击反应不受氨基、羧基杂质干扰，而羧基活化反应只需要规避Tris、甘氨酸等游离氨基杂质，是复杂多功能纳米体系构建的基础原料。

基本信息
英文名称：N3-PEG-COOH 中文名称：叠氮聚乙二醇羧基 结构：N3-PEG-COOH 可选PEG分子量：1000、2000、3400、5000、10000 Da 外观：白色至类白色粉末 纯度：HPLC ≥95% 溶解性：溶于水、PBS、DMSO、DMF；难溶于乙醚、烷烃 活性官能团：叠氮-N3、羧基-COOH 适配反应：叠氮与DBCO/炔基点击；羧基EDC/NHS活化后与伯氨基酰胺化 保质期：-20℃密封干燥避光保存12个月

应用方向
第一，DBCO修饰脂质体、PLGA纳米粒二次修饰，先SPAAC点击接入本品，载体引入羧基，活化后接枝氨基iRGD、氨基葡萄糖、抗体，构建靶向纳米递送系统。第二，预合成靶向中间体，氨基靶向配体先和活化羧基偶联，得到配体-PEG-N3，再点击DBCO荧光探针、纳米颗粒。第三，蛋白偶联标记，羧基活化后偶联蛋白赖氨酸氨基，叠氮端用于后续点击成像、磁珠捕获。第四，水凝胶功能化，DBCO水凝胶点击接本品，凝胶表面引入羧基，活化接枝细胞黏附多肽。第五，对照实验选用N3-PEG-mPEG、mPEG-COOH作为空白对照。

使用操作指引
1.取样：干燥器回温，分装单次用量，避光防潮。
2.母液配制：PBS、MES缓冲液或者DMSO配制，避光，水溶液现配现用。
3.路线一（先点击，后活化偶联）：DBCO底物在pH7.4 PBS中和N3-PEG-COOH避光SPAAC反应6–12 h；纯化后转入MES pH5.5–6.0，EDC/NHS活化30 min，加入氨基配体，调pH7.5–8.5反应2–4 h。
4.路线二（先活化偶联，后点击）：N3-PEG-COOH在MES缓冲液活化羧基，纯化后加入氨基配体反应，得到配体-PEG-N3，再与DBCO底物点击。
5.纯化表征：超滤、透析脱盐；HPLC监测转化率；DLS表征纳米颗粒粒径电位。
6.细胞实验：活化步骤严禁Tris、甘氨酸；设置游离配体竞争对照组。

储存、稳定性与安全注意事项
长期储存：-20℃密封干燥避光；羧基本身稳定，失效主要来自叠氮强光降解。活化生成的NHS中间体不稳定，必须现活化现用。 安全提示：EDC、NHS具有刺激性，通风橱操作；叠氮不和强酸混合；废液分类处理。佩戴防护用具。本品仅限科研，不可临床使用。