产品说明

DOTA-PEG-Azides是一款叠氮修饰的PEG化DOTA双功能螯合连接子，结构分为DOTA大环螯合头部、柔性PEG亲水间隔链、末端叠氮（-N3）反应基团三部分。DOTA大环拥有四个乙酸侧链，可稳定螯合Gd³⁺、Eu³⁺、Y³⁺、⁶⁴Cu、¹⁷⁷Lu等镧系金属与放射性核素，螯合产物在生理条件稳定性强，是MRI造影、PET/SPECT放射性显像的经典配体；中间PEG链提升分子水溶性，降低DOTA大环本身的疏水聚集，同时拉开螯合金属位点与点击反应位点的距离，减少空间位阻，保证点击反应效率不被大环结构干扰；末端叠氮基团是点击化学核心反应手柄，可在Cu(I)催化条件下和炔基发生CuAAC反应，也可和DBCO、BCN等张力环炔发生无铜SPAAC反应，生物正交性优良，在绝大多数生物条件下稳定，几乎不与细胞内活性基团发生副反应。

本品外观为白色固体粉末，可溶于水、DMSO、甲醇、PBS缓冲液；PEG分子量可选，常见PEG4、PEG5、PEG10等规格，PEG越长水溶性越好，空间位阻调节能力越强。对比DOTA-NHS ester依靠酰胺键偶联蛋白，DOTA-PEG-Azides依靠点击化学偶联，反应选择性更高，不会随机修饰蛋白上大量氨基，适合定点修饰；叠氮基团化学稳定性远优于NHS酯，不受pH小幅波动影响，更适合复杂体系分步合成。产品纯度高，HPLC、MS质控合格，是放射性探针、MRI造影剂、稀土标记生物探针合成的核心中间体，仅限科研使用。

产品应用
DOTA-PEG-Azides首要应用于放射性药物与PET/SPECT显像探针合成。先将DOTA螯合放射性核素，再利用叠氮和DBCO修饰靶向分子（多肽、RGD、抗体片段）进行无铜点击偶联，制备肿瘤靶向放射性显像、放射性治疗探针；PEG链改善探针体内药代，降低肝脏非特异性摄取，提升肿瘤/本底比值，广用于小动物肿瘤显像、预靶向放射治疗研究。
其次用于MRI钆造影剂靶向修饰。DOTA螯合Gd³⁺形成顺磁性复合物，叠氮位点点击偶联靶向配体，构建主动靶向MRI造影剂，实现肿瘤、炎症、动脉斑块特异性磁共振成像；也用于稀土时间分辨荧光探针构建，螯合Eu³⁺、Tb³⁺后和炔基标记生物分子偶联，制备TRF免疫探针。
同时该试剂用于生物正交标记、纳米载体表面功能化。炔基修饰脂质体、LNP、纳米颗粒、水凝胶基质，通过SPAAC反应把DOTA锚定在载体表面，后续螯合金属离子，赋予载体成像、示踪能力；也用于PROTAC、多模态探针、多组分组装材料的linker构建，模块化组装不同功能单元。叠氮低背景副反应的特性，也适合多通道正交标记体系搭建，和环丙烯、BCN等其他点击手柄搭配实现多靶点同时标记。

使用方法
储存与溶解
产品-20℃密封避光干燥保存，叠氮基团稳定性较好，但长期受潮会缓慢降解；母液可用DMSO或者超纯水配制，DMSO母液冷冻避光保存，水溶液建议一周内用完。叠氮试剂避免强还原剂、强光照、高压条件。
核素/稀土螯合操作
螯合优先在醋酸铵缓冲体系pH 5.0–6.5进行，DOTA-PEG-Azides与金属离子摩尔比略过量，升温或者室温孵育完成螯合；螯合完成后使用固相萃取或者HPLC纯化除去游离金属离子；螯合步骤优先在点击偶联之前完成，避免金属离子影响后续点击反应。
点击偶联方案
和DBCO/BCN底物反应（无铜SPAAC）：中性PBS，底物摩尔比1:1.2~1.5，室温避光反应2–6 h；和炔基底物CuAAC反应：加入Cu(I)催化剂、抗坏血酸钠、THPTA配体，严格控制催化剂浓度，反应后用EDTA去除铜离子，防止铜造成生物分子损伤。反应结束超滤、透析纯化。

实验注意事项
叠氮具有一定爆炸风险，禁止大量干品高温撞击；操作尽量在稀溶液体系；CuAAC体系必须严格控制铜浓度，蛋白、活细胞标记优先选用无铜SPAAC路线；设置空白对照评估游离金属信号；螯合完成后建议尽快使用，长期存放金属会缓慢解离。