产品说明

DBCO-PEG2k-NH2，中文名：二苯并环辛炔-聚乙二醇2000-氨基，英文名DBCO-PEG2000-Amine。该产品是一款正交双功能聚乙二醇衍生物，PEG链段分子量为2000，一端为DBCO二苯并环辛炔基团，另一端为伯氨基。DBCO基团属于无铜点击化学反应基团，可与叠氮基团在室温、无铜离子条件下发生环加成反应，不会产生铜离子带来的生物毒性；伯氨基可在EDC/NHS活化体系中，和羧基、羧基修饰多肽、羧基纳米载体发生酰胺化共价偶联。中间PEG2000链段具备良好水溶性，能够降低材料表面非特异性蛋白吸附，提升生物相容性，延长分子在液相体系中的分散稳定性。两套反应位点反应正交、互不干扰，是生物正交标记、纳米载体功能化修饰十分常用的PEG中间体。

主要应用

该试剂首要用途是为羧基修饰的纳米载体引入无铜点击化学位点。羧基化四氧化三铁、羧基PLGA微球、羧基脂质载体、羧基多糖等材料，可通过EDC/NHS活化羧基后，与DBCO-PEG2k-NH2的氨基偶联，使载体表面接枝DBCO，后续可和各类叠氮修饰的靶向肽、荧光染料、核酸、抗体进行无铜点击组装。其次用于生物探针分步构建，氨基端先偶联羧基功能分子，DBCO端预留点击位点，实现后续叠氮配体的可控接枝。在生物传感领域，可对羧基修饰的传感芯片、电*界面进行改性，搭建低背景的点击化学捕获界面，用于叠氮标记样本的捕获与检测。同时广用于活细胞、组织样本的生物正交原位标记，依托无铜点击低毒优势，适合细胞层面标记实验；也用于多糖、透明质酸、葡聚糖等羧基多糖的改性，引入点击交联位点。

下一步衍生用途

DBCO-PEG2k-NH2可作为基础中间体搭建多级功能纳米组装体系。氨基端可和TK、二硫键类响应连接子、羧基荧光分子、羧基靶向多肽偶联，制备带有刺激响应断点或者靶向能力的DBCO功能化PEG衍生物；DBCO端可搭配N3-cRGD、N3-R8、N3-Cy系列染料等叠氮试剂，一键组装靶向、荧光示踪一体化探针。该分子还可以用于水凝胶体系改性，在水凝胶骨架上引入DBCO位点，搭配双叠氮交联剂实现无铜点击原位成胶。也可以用于微流控芯片通道内壁修饰，构建可捕获叠氮标记生物分子的识别通道，开发细胞筛选、分子捕获芯片。此外，可和其他功能PEG衍生物共修饰，在同一个纳米颗粒表面同步引入点击位点、靶向基团、荧光示踪单元，实现多组分协同修饰。

使用指南

氨基与羧基偶联时，优先选用MES缓冲液，pH控制在5.0~6.0，使用EDC搭配NHS活化羧基底物，活化时长需要严格把控，减少活化酯水解副反应，偶联结束后可用甘氨酸封闭残留未反应的活化羧基。DBCO与叠氮的点击反应在中性PBS、HEPES缓冲环境中即可顺利进行，全程避免引入铜离子，防止生物体系损伤与副反应。DBCO基团对强酸、强氧化剂敏感，偶联阶段规避强氧化、*端酸碱条件。粉末样品需要在-20℃干燥避光、密封防潮保存，氨基*易吸收水汽，长期储存防潮是关键；母液优先使用无水DMSO或者DMF现配现用，不建议水溶液长期存放。分步修饰操作顺序建议优先完成氨基和羧基底物的共价偶联，充分纯化洗去游离DBCO-PEG2k-NH2之后，再开展叠氮点击反应，降低游离试剂带来的背景干扰。