中文名称:刀豆球蛋白 A - 异硫氰酸荧光素

英文名称:Concanavalin A-FITC

别称:FITC 标记刀豆球蛋白 A、荧光素标记伴刀豆球蛋白 A

材料相关内容介绍

刀豆球蛋白 A(Concanavalin A,Con A)是一种从刀豆种子中分离得到的凝集素蛋白,属于糖结合蛋白家族,能够特异性识别并结合含有 α-D - 甘露糖基、α-D - 葡萄糖基结构的多糖、糖蛋白以及糖脂分子。异硫氰酸荧光素(FITC)是应用较多的荧光标记染料,分子结构中带有异硫氰酸活性基团,可在合适的 pH 条件下与蛋白多肽链上赖氨酸残基的氨基发生共价偶联,形成稳定的荧光标记复合物,也就是 Concanavalin A-FITC。

Concanavalin A-FITC 保留了 Con A 本身的糖链识别结合特性,同时被赋予 FITC 的荧光信号特征,实现了糖结合识别功能与荧光示踪能力的结合。该复合物依靠 Con A 的糖识别结构域,和细胞表面、胞内组分、生物样本中的糖基结构发生相互作用;FITC 基团在特定波长光激发后发射荧光,借助荧光显微成像、流式细胞检测、荧光分光检测等手段,可对糖基组分进行定位、示踪与信号采集。

Concanavalin A-FITC  FITC标记刀豆球蛋白 A 结构与性质

在实验体系中,该标记物的结合作用依赖二价阳离子的存在,钙离子、锰离子会参与维持 Con A 蛋白的空间构象,保障其糖识别位点的空间结构稳定,若体系中缺少对应金属离子,蛋白构象会发生改变,结合糖基的能力会出现下降。游离的单糖分子,如甘露糖、葡萄糖,可以和样本中的糖链竞争 Con A 上的结合位点,抑制 Concanavalin A-FITC 与靶标糖结构的结合,该竞争特性常被设置为对照实验条件,用于区分特异性结合信号与非特异性吸附带来的背景信号。

Concanavalin A-FITC  FITC标记刀豆球蛋白 A 结构与性质

该材料多用于生物样本中糖蛋白、细胞膜糖基的可视化观察,也可用于细胞表面糖组分分析、组织切片糖结构染色、多糖样品的荧光检测等方向。在实验设计时,常搭配空白对照组、无阳离子对照组、单糖竞争抑制组共同开展验证,降低非特异性信号对实验结果的干扰。材料使用过程中,蛋白与荧光染料的偶联比例会直接影响荧光强度与蛋白活性,偶联度偏高容易造成蛋白空间结构改变,影响糖结合活性;偶联度偏低则荧光信号偏弱,不利于信号采集,因此制备阶段会对偶联比例进行控制。

Concanavalin A-FITC  FITC标记刀豆球蛋白 A 结构与性质

物理化学性质

Concanavalin A-FITC 属于蛋白 - 荧光染料共价偶联复合物,外观多为淡黄色至黄绿色粉末,配制成水溶液后呈现黄绿色透明液体。该物质可溶于水、中性磷酸盐缓冲液,在高浓度有机溶剂环境中易发生蛋白变性沉淀。

荧光光谱方面,FITC 标记基团激发波长约 495 nm,发射波长约 519 nm,荧光信号处于可见光区域。复合物整体的等电点受 Con A 蛋白骨架与 FITC 修饰量共同影响,在偏碱性环境下荧光稳定性相对更好,强酸性条件容易造成荧光淬灭,同时破坏 Con A 蛋白的天然构象。

该材料对光照、温度敏感,长时间强光照射会加速 FITC 荧光基团淬灭;反复升温冻融也会引发蛋白聚集、空间构象解离,造成活性损失。水溶液状态下容易滋生微生物,带来蛋白降解问题。储存环境需要避光,常规短期保存可置于 4℃条件下,长期储存推荐分装后放置于 - 20℃,避免反复冻融操作。

该材料的分子量由 Con A 单体分子量以及偶联的 FITC 分子数量共同决定;天然 Con A 在不同环境 pH 与离子条件下,存在二聚体、四聚体的动态转换,pH 接近中性、存在二价阳离子时,更容易形成四聚体结构,对应的糖结合位点数量也会发生变化。

瑞禧生物供应的 Concanavalin A-FITC 不同形态、不同规格

西安瑞禧生物可提供 Concanavalin A-FITC 多种形态与规格产品,适配不同实验室操作方案。

产品形态分为粉末型与溶液型两类。粉末型产品经过冻干处理,包装形式为铝箔密封包装,适合长期存放与长途运输,使用前按照实验需求,用合适的缓冲体系复溶配制;溶液型产品为预配缓冲液体系,经过滤除菌处理,开瓶后可直接稀释使用,省去复溶步骤,适合需要频繁取用、短周期内完成实验的场景。

规格设置涵盖小包装科研规格与批量制备规格。小包装规格包含 1 mg、5 mg、10 mg,适合预实验、方法摸索、条件筛选等工作;批量规格支持按需定制,适配样本量大、多次平行实验的需求。同时可提供不同荧光标记比例批次的 Concanavalin A-FITC,可根据实验信号需求选择对应偶联度产品。

配套质控资料包含 COA 文件,提供纯度、荧光标记率、蛋白活性相关检测数据。产品运输采用低温避光包装;同时可配套提供同系列凝集素荧光标记产品,以及配套缓冲液、封闭试剂、竞争对照用单糖等相关试剂,也可承接其他凝集素与荧光染料的标记定制开发服务。