产品说明

Cy3-carboxylic acid（Cy3-COOH，Cy3-羧基）是带有游离羧酸基团的Cy3 母核荧光染料，属于未活化的基础荧光砌块。和预活化的Cy3-NHS 活性酯完全不同，游离羧基本身不具备直接偶联能力，必须搭配 EDC、HATU 等缩合试剂活化羧基之后，才能和底物上伯氨基反应，生成稳定酰胺键。它的核心优势是化学稳定性远高于 NHS 活性酯，不易受潮水解，长期储存性能良好，用户可以自主控制活化时机、活化时长，灵活设计多步有机合成路线。Cy3-COOH 拥有脂溶性与磺化水溶性两个版本，脂溶性版本适合有机相固相合成；磺化Cy3-COOH 水溶性好，适合水相生物大分子偶联。

光谱参数：激发波长：555 nm，发射波长：569 nm，橙红色荧光，染料母核荧光性质稳定，羧基活化前后激发发射波长、荧光量子产率几乎无变化，光稳定性优秀，长时间光照下荧光衰减缓慢。脂溶性版本在 DCM、DMF 等有机溶剂溶解性能好，磺化版本在 PBS、MES 缓冲液中可直接溶解，pH4–9 荧光信号稳定。

核心应用：多用于固相多肽合成过程中定点引入Cy3 荧光团；EDC 介导下蛋白、多糖、氨基纳米材料的氨基标记；水凝胶、高分子聚合物支架的表面功能化荧光修饰；全新荧光探针分子的从头化学设计合成；光谱校准、阴性对照染料制备；多步有机合成构建 FRET 荧光共振能量转移探针。该试剂面向有机合成、多肽合成课题组。很多课题组不想直接采购 NHS 活性酯，担心水解失效，就选择Cy3-COOH 自主活化偶联，可灵活控制反应当量，降低成本。对比Cy3-NHS，Cy3-COOH 操作流程更长，需要额外活化步骤，不适合快速批量标记抗体，更适合探针分子定制合成。

使用方法：水相生物偶联方案：采用 EDC+NHS 组合活化体系，选用 pH5.0–6.0 MES 缓冲液，先将Cy3-COOH 与 EDC、NHS 混合，室温避光活化羧基 15–30 min，活化窗口很短，活化完成后立即加入含伯胺的底物避光反应。有机相固相多肽合成，使用 HATU/DIPEA 体系完成缩合。反应结束后，通过萃取、制备色谱纯化，除去未反应原料、活化副产物。活化步骤是成败关键，活化超时会发生染料自身聚合，造成大量副产物，降低标记效率。反应全程避光。

储存：-20℃避光干燥密封保存，稳定性显著优于 NHS 活性酯，有效期更长。

配套相关试剂：Cy5-COOH、Cy5.5-COOH、Cy7-COOH、EDC、HATU、DIPEA、MES 缓冲盐、Cy3-amine、Cy3-NHS。