产品说明

m-PEG3-Val-Cit是一款带甲氧基封端三甘醇亲水间隔臂的组织蛋白酶B可裂解二肽连接子，也是Val-Cit系列ADC连接子体系的基础母核中间体。分子由m-PEG3亲水链段、L-缬氨酸、L-瓜氨酸依次连接构成，末端为瓜氨酸端游离官能位点，不含PAB自消除基团与活化酯结构，属于前体型连接砌块。m-PEG3甲氧基封端设计消除了N端氨基的反应活性，避免N端副反应，同时引入短链PEG提升二肽在水相缓冲液、DMSO/水混合体系中的溶解度，改善纯Val-Cit二肽水溶性差、容易析出的痛点。Val-Cit二肽序列是成熟的酶响应单元，在人体循环血浆环境下化学稳定性良好，肽键不易被血浆内广谱蛋白酶非特异性剪切；只有进入肿瘤细胞溶酶体、高表达组织蛋白酶B的微环境时，二肽骨架才会被特异性识别并发生酶切断裂，实现响应型解离。相比于长链PEG，PEG3短臂空间位阻适中，不会过度屏蔽酶切位点，能够兼顾水溶性和组织蛋白酶B的底物识别效率，是新一代亲水型可裂解连接子的经典基础骨架。该试剂纯度一般控制在95%以上，性状多为白色或类白色粉末，对湿度敏感，*易吸潮，储存和取用都需要严格控湿。

主要应用方向

该产品核心定位是ADC药物连接子的模块化合成前体，不直接和毒素、抗体偶联，多用于后续衍生化修饰。第一，用于衍生合成m-PEG3-Val-Cit-PAB系列衍生物，在瓜氨酸端偶联对氨基苄醇PAB结构，搭建自消除释放通路，是m-PEG3-Val-Cit-PAB-OH、m-PEG3-Val-Cit-PAB-PNP的上游原料。第二，用于多肽药物偶联物PDC、酶激活型荧光探针、肿瘤微环境响应纳米递送载体的构建，将该二肽接入纳米颗粒、脂质体表面，构建组织蛋白酶B激活的释放体系。第三，用于PROTAC分子的可降解linker开发，在PROTAC两端靶蛋白配体与E3泛素连接酶配体之间插入该酶切敏感单元，实现细胞内可控降解。第四，用于体外酶学筛选模型，构建底物库，评价组织蛋白酶B抑制剂、激活剂，研究Val-Cit序列的酶切动力学参数。在ADC研发管线中，m-PEG3-Val-Cit适合DAR值优化、连接子亲水改性对比实验，用来对比无PEG、PEG4、PEG8等不同长度PEG对ADC聚集、体内清除、脱靶毒性的影响，是连接子构效关系研究的核心对照试剂。

使用指南与操作规范

储存条件推荐-20℃密封避光干燥保存，优先使用充氩/氮气保护的西林瓶包装，反复开盖会快速吸潮降解，建议一次性分装成小规格。溶剂选择上，母液优先使用无水DMSO配制，DMSO储备液可短期-20℃避光存放；水相反应体系可搭配少量DMF助溶，禁止长时间在纯水体系放置，防止肽链缓慢水解。反应场景以酰胺缩合衍生化为主，常用缩合体系HATU/DIPEA、EDC/NHS，反应温度控制在室温，反应体系严格除水，使用无水溶剂。反应监测采用反相HPLC搭配LC-MS，220nm紫外通道跟踪多肽主峰，及时终止反应避免过度水解。纯化方式优先制备型HPLC，流动相采用乙腈+0.1%甲酸水梯度洗脱，收集目标组分后冷冻干燥，不可高温旋蒸浓缩。安全操作方面，佩戴护目镜、丁腈手套，在通风橱操作，粉末吸入会产生刺激，废液按有机多肽危废处理。配套提醒：该分子无活化位点，无法直接偶联氨基类毒素，必须先完成PAB、PNP活化酯衍生之后，才能用于payload偶联；血浆稳定性评价实验建议使用新鲜血浆37℃孵育，不同批次原料需要提前做酶切活性验证，保证后续衍生产品的酶响应一致性。