产品说明

TPP-PEG-NHS是靶向线粒体的异双功能PEG衍生物，由三苯基膦（TPP）亲水PEG连接臂、NHS琥珀酰亚胺活性酯构成，是线粒体靶向修饰的经典科研试剂。TPP阳离子三苯基膦基团依靠线粒体膜电位差富集在线粒体内部，线粒体膜内侧负电位可以驱动TPP分子选择性富集，是目前很常用的线粒体靶向基团；中间PEG链提供亲水隔离层，提升分子水溶性，减少TPP的疏水聚集，降低非特异性吸附，同时拉开靶向基团与NHS反应位点之间距离，减少空间位阻；末端NHS活性酯可以和多肽、蛋白、氨基修饰纳米材料、氨基小分子上的伯氨基特异性反应，生成稳定酰胺键，反应条件温和，适合生物大分子修饰。

该产品外观白色至淡黄色粉末，可溶于水、DMSO、DMF，难溶于醚类；纯度≥95%。TPP-PEG-NHS解决游离TPP疏水、容易聚集、难以直接标记蛋白/载体的痛点，通过PEG化改造，兼顾靶向能力与水溶性，一步偶联氨基底物，快速给蛋白、纳米载体、荧光探针赋予线粒体靶向能力。该试剂广用于线粒体成像、线粒体靶向递送、线粒体氧化应激研究、线粒体相关纳米载体构建，是线粒体靶向方向的核心PEG活化酯试剂。

产品应用
第一，线粒体靶向荧光探针合成。将氨基修饰荧光染料和TPP-PEG-NHS偶联，制备线粒体靶向荧光探针，用于活细胞线粒体成像、线粒体形态追踪、线粒体膜电位监测。
第二，纳米载体线粒体靶向修饰。氨基修饰脂质体、PLGA纳米粒、二氧化硅纳米球、磁性纳米颗粒，通过NHS偶联引入TPP，制备靶向线粒体的纳米递送系统，将负载小分子、光敏剂、核酸递送到线粒体。
第三，蛋白、酶的线粒体靶向改造。氨基化蛋白、抗氧化酶通过偶联带上TPP，实现蛋白靶向转运至线粒体，研究线粒体氧化应激、线粒体功能调控。
第四，多肽靶向修饰。氨基端靶向多肽、细胞穿透肽偶联TPP，构建双功能靶向多肽，同时实现细胞穿透与线粒体富集。
第五，线粒体靶向光动力、光热载体研究。光敏剂载体表面修饰TPP，光敏剂富集在线粒体，光照后靶向损伤线粒体，用于相关细胞机制研究。
第六，生物传感器修饰。构建线粒体靶向电化学、荧光传感探针，检测线粒体内部ROS、钙离子、ATP等微环境指标。
第七，外泌体靶向改造。氨基修饰外泌体膜蛋白，偶联TPP-PEG-NHS，赋予外泌体线粒体靶向能力，用于胞内细胞器递送研究。

使用方法
母液配制：干粉无水DMSO溶解配母液，现配现用；水相偶联缓冲液选用pH7.2–8.5 HEPES、碳酸盐缓冲液，禁用Tris、甘氨酸等含氨基缓冲液。
投料配比：TPP-PEG-NHS和氨基底物摩尔比推荐3:1~10:1，载体表面修饰可提升比例。
反应操作：氨基底物溶解于缓冲液，冰浴或者室温条件下缓慢滴加PEG母液，避光混匀；室温反应2–4 h，4℃条件下可过夜反应。
淬灭与
纯化：反应结束后，可以加入甘氨酸淬灭剩余NHS；蛋白/多肽产物用透析脱盐；纳米颗粒离心洗涤；小分子产物HPLC纯化。
对照设置：设置不含TPP的mPEG-NHS同步修饰对照组，区分线粒体靶向富集和非特异性摄取。
样品分装：纯化产物避光分装，低温保存，尽快用于细胞成像、载体实验。

注意事项
NHS酯对水分敏感，干粉-20℃干燥避光密封保存，避免反复开盖吸水水解。配液操作尽量快速，母液一次性用完，不建议长期储存。缓冲体系严禁氨基组分，会竞争性消耗NHS，降低偶联效率。pH高于9.0会加速NHS水解，pH低于7.0反应速率明显下降。TPP具备阳离子属性，高浓度修饰容易造成纳米颗粒团聚，修饰密度需要梯度优化。TPP阳离子在高浓度下会影响线粒体膜电位，细胞实验必须设置浓度梯度，避免高浓度带来非特异性线粒体损伤。本试剂仅科研体外实验，不可用于人体。操作佩戴护目镜、丁腈手套，粉末避免吸入。TPP基团有一定光敏性，全程避光操作。废液按照生化试剂废液规范处理。