产品说明

Mal-amide-PEG8-Val-Ala-PAB-PNP是一款长PEG链修饰的巯基反应型可裂解ADC连接子，属于模块化接头中间体。分子头部为酰胺型马来酰亚胺，中间搭载八聚乙二醇长亲水链、Val-Ala蛋白酶敏感二肽序列以及PAB自消除单元，末端为PNP对硝基苯碳酸酯高活性基团。和Val-Cit体系相比，Val-Ala二肽的血清稳定性更强，毒素提前释放风险更低；PEG8长链显著提升整个接头的水溶性，大幅降低偶联后ADC聚集概率，尤其适配高DAR载药体系。PNP活性碳酸酯可以温和地和各类带伯氨基的细胞毒素发生偶联，不需要额外缩合试剂；马来酰亚胺酰胺结构能够和抗体还原产生的半胱氨酸巯基发生迈克尔加成，完成接头与抗体的锚定。该试剂为研究者提供了更大的配方优化空间，适合开发低聚集、循环稳定性良好、毒性窗口更宽的差异化ADC品种，也广用于多肽偶联、蛋白修饰、靶向纳米递送系统的合成构建。

基本信息
中文名称：马来酰亚胺酰胺基-八聚乙二醇-缬氨酸-丙氨酸-对氨基苄基-对硝基苯碳酸酯
英文名称：Mal-amide-PEG8-Val-Ala-PAB-PNP
CAS号：2415633-29-7
类别：ADC可裂解连接子、巯基反应型活性接头
外观：白色至类白色固体粉末
纯度：≥95%
溶解性：DMSO、DMF易溶，得益于PEG8长链，在水相缓冲液中溶解性明显优于短PEG以及无PEG接头
反应基团：马来酰亚胺（巯基反应）、PNP碳酸酯（氨基偶联） 酶切位点：Val-Ala，组织蛋白酶B识别切割 释放机制：酶切+PAB自消除释放载荷
储存条件：-20℃避光干燥密封保存，分装小份
保质期：6个月

结构与作用原理
分子分为五个功能模块：酰胺连接的马来酰亚胺头部、八聚乙二醇亲水间隔链、Val-Ala二肽酶切位点、PAB自消除苄基单元、PNP活性碳酸酯末端。酰胺键连接马来酰亚胺，相比烷基MC马来酰亚胺，该结构水解稳定性小幅提升，在中性缓冲体系下开环失活速度更慢，延长偶联反应窗口。PEG8长链是本品核心的特征，大量重复乙二醇单元赋予分子强亲水性，能够有效屏蔽下游疏水毒素带来的疏水相互作用，是解决高DAR ADC易聚集、易沉淀的经典改造方案；长间隔链同时拉大抗体和酶切位点之间距离，减少空间位阻，提升溶酶体内蛋白酶识别效率。Val-Ala二肽替换了常用Val-Cit序列，缺少瓜氨酸侧链脲基，多肽整体疏水性下降，血浆中被非特异性蛋白酶识别的概率更低，降低循环过程中毒素渗漏带来的全身毒性。末端PNP碳酸酯属于高活性氨基偶联基团，弱碱条件下即可与毒素分子上伯氨基成键，副产物对硝基苯酚易于色谱去除；接头接好毒素之后，再利用马来酰亚胺端和抗体巯基偶联。ADC进入靶细胞溶酶体后，组织蛋白酶B切断Val-Ala肽键，PAB启动1,6-消除反应，释放完整活性载荷。

使用说明
取用与母液配制：低温取出后充分回温再开盖防潮；无水DMSO配制母液，浓度推荐5–15 mM，避光，含水环境会加速PNP水解失活。
载荷偶联步骤：将Mal-amide-PEG8-Val-Ala-PAB-PNP与氨基修饰毒素按照摩尔比1.1~1.5:1投料，加入DIPEA调节体系pH至7.5–8.5，室温避光搅拌2–4 h；HPLC监测反应进度，反应结束后制备色谱纯化，得到完整linker-payload。
抗体偶联：使用TCEP还原单抗链间二硫键，脱除过量TCEP，避免还原剂消耗马来酰亚胺；在pH6.5–7.0缓冲体系中加入linker-payload进行巯基加成反应。
质控重点：SEC-HPLC重点监测聚集体含量，同步对比短PEG接头产物的聚集差异；HPLC监控PNP水解杂质、马来酰亚胺开环杂质；酶切实验对比Val-Ala和Val-Cit的释放动力学差异。
工艺优化方向：适合摸索高DAR偶联工艺，在较高载药量条件下维持ADC单体占比。

储存与安全注意事项
固体严禁长期暴露在潮湿、室温环境；马来酰亚胺遇强碱、长时间水溶液放置容易开环失效。操作在通风橱内进行，做好防护。仅用于体外化学合成研究，不直接用于体内实验。废液耗材按有机危废处理。

应用场景与优势
面向需要解决ADC聚集难题、想要优化体内循环稳定性、降低脱靶毒性的研发项目。PEG8长亲水链、Val-Ala稳定二肽双重优化，是短PEG-Val-Cit接头的优质替代方案；PNP活性端适配绝大多数氨基类细胞毒素，载荷选择灵活。除ADC之外，也用于酶底物探针、蛋白-小分子偶联物、脂质纳米载体靶向修饰等方向，适合CRO以及高校课题组开展连接子构效关系筛选。