产品说明

Cy7.5 NHS ester

中文名：Cy7.5琥珀酰亚胺酯
英文名：Cy7.5 NHS ester，Cyanine7.5 NHS ester
别称：Cy7.5 SE、脂溶性Cy7.5活性酯、花菁7.5-NHS酯

描述：

Cy7.5 NHS ester是脂溶性长波长近红外花菁染料，带有NHS氨基反应活性酯，是活体深层组织成像常用标记染料。分子为非磺化Cy7.5七甲川花菁母核，末端NHS活化酯，无磺酸亲水基团，脂溶性强；NHS酯可与伯氨基反应生成稳定酰胺键，完成蛋白、多肽、氨基小分子的荧光标记。光谱吸收峰788 nm，发射峰808 nm，波长更长，组织穿透深度优于Cy7、Cy5.5；长波长近红外信号背景荧光弱，适合深部组织、荷瘤小鼠全身成像研究。 

该染料特点是脂溶性，在纯水相中溶解度差，容易聚集淬灭，标记体系必须添加DMSO、DMF等有机共溶剂；和磺化IRDye800CW、Sulfo-Cy5.5形成互补。产品外观绿色固体粉末，纯度≥95%，易溶于二氯甲烷、氯仿、DMSO、DMF；干粉避光稳定，NHS基团遇水快速水解失效，配制母液必须使用无水溶剂。除了生物分子标记，脂溶性特点让它也适合直接掺入脂质体、PLGA纳米粒、胶束疏水内核，制备内包载荧光示踪纳米载体，这是磺化水溶性染料很难实现的用法。
典型应用：多肽、疏水蛋白标记、脂质纳米粒包载荧光示踪、小动物活体近红外成像、肿瘤富集成像、荧光纳米载体示踪、近红外免疫荧光检测；常搭配Cy5.5构建双通道近红外成像体系。

标准操作方案：
无水DMSO配制Cy7.5 NHS母液；目标蛋白/多肽溶解于pH7.4–8.2 PBS缓冲液；染料母液缓慢加入水相体系，控制DMSO终体积分数≤5%，过高有机溶剂容易造成蛋白变性；染料与目标分子摩尔比5–10:1，室温避光反应1–3 h，不耐受条件样品4℃避光过夜反应；反应结束加入甘氨酸淬灭活性酯；透析或者脱盐柱去除游离染料；脂溶性游离染料不容易透析除去，优先选择C18 HPLC或者凝胶色谱纯化多肽标记产物；紫外光谱检测788 nm和280 nm吸光度计算标记比率。如果用来掺入脂质体：和磷脂、胆固醇共同溶于氯仿甲醇，旋蒸成膜，跟着薄膜分散法制备荧光脂质体，该路线不需要做氨基偶联。

储存条件：干粉-20℃避光干燥密封保存；无水DMSO母液分装避光-80℃保存；严禁配成水溶液存放；操作避光，避免高温；缓冲液不能含有游离氨基杂质。本试剂仅用于科研，脂溶性标记产物体内代谢行为和水溶性磺化染料差异明显，实验需要单独对照。