产品说明

FITC标记芽霉菌糖（FITC-Mannoglucan）是FITC荧光共价标记芽霉菌糖得到的多糖荧光探针。芽霉菌糖是一类来源于真菌细胞壁的甘露葡聚糖，主链以葡萄糖单元构成，侧链连接大量甘露糖残基，属于真菌特征性β-葡聚甘露糖，是宿主先天免疫识别的重要PAMP（病原相关分子模式），可以被巨噬细胞、树突状细胞表面甘露糖受体、Dectin受体识别；FITC标记保留多糖骨架与受体识别活性，提供绿色荧光信号，是真菌免疫、多糖吞噬、模式识别受体研究的经典示踪试剂。 

光谱参数：Ex=494 nm，Em=520 nm，488 nm激光适配，标准FITC荧光通道检测；荧光信号pH依赖性明显，pH7–8.5信号稳定，酸性环境荧光下降，适合在中性胞外环境、细胞培养液体系观测；标记度控制在合理区间，避免多糖链上染料密集引发荧光自淬灭。

科研用途：第一，先天免疫细胞吞噬与胞内转运示踪，用于巨噬细胞、DC细胞、小胶质细胞对真菌多糖的吞噬实验，共聚焦观察多糖内吞、内体转运、溶酶体定位，定量吞噬效率，研究Dectin-1、甘露糖受体、TLR受体介导的识别通路；第二，凝集素与糖受体结合分析，针对甘露糖特异性凝集素、C型凝集素受体开展体外结合、竞争性抑制实验，对比不同糖（甘露糖、葡萄糖）的竞争抑制能力，解析受体糖结合特异性；第三，真菌免疫刺激机制研究，可视化多糖和免疫细胞的相互作用，同时检测细胞因子释放、ROS产生，关联荧光定位和免疫激活表型；第四，体内组织分布示踪，小鼠尾静脉、腹腔给药，追踪芽霉菌糖在脾脏、肝脏、肺等免疫富集器官的富集、清除代谢，研究真菌多糖在体免疫靶向规律；第五，细胞表面糖受体流式检测，利用FITC-Mannoglucan作为配体探针，流式细胞术检测免疫细胞表面功能性多糖受体表达水平；第六，抗真菌药物、免疫调节剂筛选，以多糖吞噬、受体结合荧光信号作为读数，筛选可以调控真菌识别通路的小分子、多肽；第七，真菌模拟微粒构建，将该探针包封或修饰微球，模拟真菌颗粒，用于吞噬模型、免疫成像对照；第八，多糖降解酶活性检测，真菌葡聚糖酶、甘露聚糖酶水解芽霉菌糖，荧光分子随片段释放，用于酶活动力学测定。

注意事项：仅限科研，不可临床使用。全程避光，粉末-20℃干燥避光分装保存，水溶液现配现用，避免反复冻融；反复冻融容易造成多糖链降解、FITC脱落，游离染料升高背景。溶解使用无菌中性PBS，避免含游离氨基缓冲液（Tris）干扰染料稳定性。芽霉菌糖是大分子多糖，溶液黏度较高，配液充分混匀，离心去除不溶絮状沉淀后再使用；高浓度储存容易聚集，建议工作浓度梯度预实验。该多糖容易被血清中的甘露糖结合蛋白、补体成分结合，血清体系实验必须设置严格阴性对照（游离FITC、未标记芽霉菌糖），区分特异性受体结合和血清蛋白非特异黏附。孵育之后充分多轮洗涤，去除未结合探针。高温、强酸会造成多糖糖苷键断裂，孵育温度控制37℃，不要高压灭菌，过滤除菌。长时间光照成像容易光漂白，成像时缩短曝光时间，优先配置抗淬灭剂。不同来源芽霉菌糖分支结构、分子量差异很大，批次之间受体结合活性有区别，实验尽量固定同一批次原料。标记过高时多糖容易聚集沉淀，荧光自淬灭，信号反而降低。