产品说明

简单描述

Cyanine3 hydrazide是羰基反应型Cy3花菁荧光染料，酰肼官能团可以特异性和醛基、酮基发生缩合，生成腙键，实现含羰基生物分子的橙色荧光标记。该染料属于非磺化脂溶性Cy3衍生物，溶于DMSO、DMF、醇类有机溶剂，水相溶解度有限。Cy3荧光发射在橙光波段，是荧光显微镜、流式设备标配通道，和DAPI、Cy5、Cy7光谱区分度良好，适合多色共染。经典用途是高碘酸钠氧化糖蛋白、多糖，把糖环邻二醇转化为醛基之后，用CY3酰肼标记糖链；也用于标记氧化应激产生羰基修饰的蛋白、还原糖分子、醛基修饰纳米材料，在糖生物学、蛋白羰基化损伤检测、组织多糖荧光染色领域应用广。

基本信息

中文名称：CY3酰肼
英文名称：Cyanine3 hydrazide，Cy3 hydrazide
类别：羰基反应型脂溶性花菁荧光染料
外观：红色固体粉末

纯度：≥95% 
光谱参数：λabs=555 nm，λem=570 nm
消光系数：150000 L·mol⁻¹·cm⁻¹
溶解性：溶于DMSO、DMF、甲醇；水相溶解度一般
反应基团：酰肼（与醛、酮生成腙键） 适宜反应pH：5.0–6.5
储存条件：-20℃避光密封干燥保存
保质期：妥善储存6个月

结构与作用原理

分子由Cy3三甲川花菁荧光骨架和末端酰肼基团构成。Cy3共轭发色团吸收绿光激发光，发射橙红色荧光，光稳定性优于FITC，是TRITC替代染料。酰肼基团和醛/酮羰基在弱酸性条件下发生亲核加成消除，生成腙共价键；腙键在中性、碱性环境下有一定可逆性，如果需要更高稳定性，可以使用氰基硼氢化钠还原，转化为稳定烷基肼键。该反应正交性良好，在温和条件下不会和氨基、巯基发生明显副反应，专门针对羰基位点标记。脂溶性骨架让染料更容易渗透固定组织切片，但水相标记时需要控制助溶剂DMSO终浓度，避免样本损伤。

使用说明

1. 母液配制：无水DMSO配制成2–10 mM母液，避光保存；水相工作液DMSO终浓度控制在5%以内。

2. 糖蛋白标记流程：高碘酸钠低温氧化糖蛋白，生成醛基，脱盐除去过量高碘酸盐；调整缓冲液pH至5.0–6.5，加入CY3酰肼，室温避光孵育2–4 h；如需稳定产物，加入NaCNBH₃还原。

3. 蛋白羰基化检测：氧化应激处理后的蛋白样本，直接加入染料孵育标记，用于电泳荧光检测、细胞荧光成像。

4. 组织切片染色：固定切片氧化处理后，染料孵育标记多糖，PBS漂洗后封片，搭配DAPI、Cy5抗体做多色染色。

5. 成像采集：选用555 nm激发通道，TRITC滤光片采集信号。

6. 注意事项：强氧化剂会破坏Cy3荧光母核；pH过高会大幅降低腙键生成效率。

储存与安全注意事项

避光防潮低温存放，粉末避免长期暴露空气。有机溶剂操作在通风橱，佩戴防护。仅用于体外科研，不可临床使用。废液按有机危废处理。

应用场景与优势

核心面向糖生物学研究，糖蛋白、糖胺聚糖、细胞表面糖链荧光标记；同时用于氧化应激蛋白羰基化修饰检测、醛基功能化纳米颗粒标记。Cy3通道通用性很强，几乎所有荧光设备都支持，多色组合灵活；酰肼标记羰基的路线是糖标记经典方案，是糖化学、氧化损伤研究实验室常备染料。