作者：
Jianghua Wang, Shuang Wang, Tong Ye, Feng Li, Xiaoyong Gao, Yan Wang, Peng Ye, Shuang Qing, Changlong Wang, Hua Yue, Jie Wu, Wei Wei,* and Guanghui Ma*
引用瑞禧生物产品：
DSPE-PEG2000 and cholesterol
一、研究背景
近年来，纳米疫苗凭借其在抗原递送、免疫激活及肿瘤治疗方面的应用潜力，逐渐成为肿瘤免疫治疗领域的重要研究方向。然而，现有研究主要集中于纳米载体的材料组成、结构设计及免疫刺激功能，对于不同递送方式如何影响疫苗在体内的分布及终免疫效果，仍缺乏系统性认识。
针对这一问题，研究人员以CpG修饰的肿瘤源性纳米囊泡（CpG-modified Nanovesicles，CNVs）为模型，设计了三种不同的疫苗递送策略，系统考察给药模式对纳米疫苗淋巴结分布、免疫细胞相互作用及抗肿瘤效果的影响。
研究发现，纳米疫苗的递送方式不仅影响其进入淋巴结的途径，还能够改变其在淋巴结内部的空间定位及时间分布，进而调控树突状细胞与T细胞之间的相互作用，终影响T细胞介导的抗肿瘤免疫应答。
二、三种纳米疫苗递送策略的设计
为探究递送方式对肿瘤免疫治疗效果的影响，研究人员构建了三种不同的CNVs给药模式。
1. 单脉冲递送（Single-Pulse CNVs）
采用单次给药方式，将CpG修饰的肿瘤源性纳米囊泡直接注入体内。由于CNVs具有纳米级尺寸，部分纳米囊泡可通过淋巴引流被动进入引流淋巴结，从而参与后续免疫激活过程。
2. 交错脉冲递送（Staggered-Pulse CNVs）
通过分时段给药方式，使CNVs在不同时间进入体内，并经淋巴引流向淋巴结转运。
与单次脉冲给药相比，该策略改变了纳米疫苗到达淋巴结的时间过程，为研究持续或分阶段抗原刺激对免疫应答的影响提供了实验模型。
3. 凝胶限域递送（Gel-Confined CNVs）
将CNVs限制于凝胶递送体系中，使纳米疫苗在局部形成相对受限的分布环境。
与前两种主要依赖被动淋巴转运的模式不同，凝胶限域策略能够促进树突状细胞参与纳米疫苗的摄取与运输，并通过树突状细胞迁移将相关疫苗组分主动递送至淋巴结。
这一递送方式改变了纳米疫苗进入淋巴结的主要途径，为调节抗原呈递及T细胞激活提供了新的研究思路。
三、不同递送方式对淋巴结时空分布的影响
淋巴结是机体免疫应答的重要场所，也是抗原呈递细胞与T细胞发生相互作用的关键部位。
纳米疫苗进入淋巴结后，其分布位置、停留时间及与免疫细胞的接触机会，均可能影响后续免疫应答的强度与持续性。
本研究发现，不同递送策略能够显著改变CNVs在淋巴结内的时空分布特征。
单脉冲及交错脉冲递送主要依赖纳米囊泡自身的淋巴转运能力，而凝胶限域递送则更多借助树突状细胞的主动迁移实现疫苗运输。
这种运输机制上的差异，进一步影响纳米疫苗在淋巴结内部的定位、利用效率以及与免疫细胞的相互作用。
尤其是在淋巴结T细胞区域，纳米疫苗的有效分布有助于促进树突状细胞与T细胞之间的功能性接触，为抗原特异性T细胞应答的形成创造有利条件。
四、凝胶限域递送增强T细胞介导的抗肿瘤免疫
树突状细胞（Dendritic Cells，DCs）是连接先天免疫与适应性免疫的重要抗原呈递细胞。
在肿瘤免疫治疗过程中，树突状细胞能够摄取肿瘤相关抗原，并通过抗原加工与呈递激活T细胞，诱导针对肿瘤细胞的免疫应答。
研究结果表明，凝胶限域CNVs能够通过改变疫苗的运输途径及淋巴结内分布特征，改善纳米疫苗与相关免疫细胞之间的相互作用。
与单脉冲和交错脉冲递送相比，凝胶限域模式在所研究的多种肿瘤模型中表现出更优的治疗效果。
这一发现说明，纳米疫苗的抗肿瘤效能不仅取决于抗原组成及免疫刺激剂的活性，还与其在体内的递送方式密切相关。
通过优化递送模式，可在不改变纳米疫苗核心组成的情况下，进一步改善其免疫调节效果。
五、不同递送策略的作用机制示意
本研究以CpG修饰的肿瘤源性纳米囊泡（CNVs）为模型，比较了单脉冲、交错脉冲及凝胶限域三种递送策略对肿瘤免疫治疗的影响。
在单脉冲与交错脉冲给药模式下，CNVs主要依靠纳米尺寸优势，经淋巴引流被动转运至淋巴结。
而在凝胶限域递送模式中，CNVs通过树突状细胞摄取及迁移过程被主动运输至淋巴结，形成不同于被动转运模式的递送路径。
三种递送方式使纳米疫苗在淋巴结内呈现不同的时间与空间分布特征，进而影响疫苗利用效率、树突状细胞与T细胞的接触及相互作用，并终产生不同程度的T细胞介导的抗肿瘤免疫应答。
该机制揭示了纳米疫苗递送方式与免疫治疗效果之间的重要联系，为合理设计肿瘤纳米疫苗提供了理论与实验依据。
六、脂质体纳米疫苗中的适用性验证
为了进一步评估研究结论的适用范围，研究人员将不同递送策略的比较扩展至脂质体纳米疫苗体系。
实验结果显示，在脂质体纳米疫苗中，递送方式同样能够影响疫苗在淋巴结内的分布行为及抗肿瘤治疗效果，且整体变化趋势与CNVs体系中的观察结果一致。
这一发现表明，递送方式对免疫应答的调控作用并非仅局限于特定的肿瘤源性纳米囊泡体系，而可能适用于其他类型的纳米疫苗平台。
因此，在纳米疫苗研发过程中，除了关注材料组成、颗粒尺寸、表面修饰及抗原负载能力外，还应将给药方式与体内递送路径纳入整体设计。
七、研究总结与应用前景
本研究通过比较三种不同的纳米疫苗递送模式，揭示了给药策略对淋巴结内疫苗时空分布及抗肿瘤免疫应答的重要影响。
研究表明，单脉冲、交错脉冲与凝胶限域递送能够通过不同途径影响纳米疫苗进入淋巴结的过程，并进一步调控树突状细胞与T细胞之间的相互作用。
其中，凝胶限域递送在多个实验性肿瘤模型中展现出更优的治疗表现，提示通过合理设计递送方式，有望增强纳米疫苗诱导的T细胞免疫应答。
此外，脂质体纳米疫苗中的验证结果进一步支持了递送策略在不同纳米疫苗体系中的重要性。
总体而言，该研究为肿瘤纳米疫苗的设计与优化提供了新的研究视角，强调应将递送模式与纳米材料结构、免疫刺激功能及抗原呈递效率共同纳入疫苗开发体系。
未来，通过结合智能响应性材料、可控释放水凝胶及多功能纳米递送技术，有望进一步提高肿瘤纳米疫苗的免疫激活能力与治疗效果，为个体化癌症免疫治疗提供更多可能。
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文献摘要
Nanovaccines have attracted booming interests in vaccinology studies, but the profound impacts of their delivery mode on immune response remain unrealized. Herein, immunostimulatory CpG-modified tumor-derived nanovesicles (CNVs) are used as a nanovaccine testbed to initially evaluate the impacts of three distinct delivery modes, including mono-pulse CNVs, staggered-pulse CNVs, and gel-confined CNVs. Fundamentally, delivery mode has enormous impacts on the immunomodulatory effects, altering the spatiotemporal distribution of nanovaccine residence and dendritic cell–T cell interaction in lymph nodes, and finally affecting subsequent T cell-mediated immune performance. As a result, the gel-confined delivery mode offers the best therapeutic performance in multiple tumor models. When extending evaluation to examine how the various delivery modes impact the performance of liposome-based nanovaccines, similar trends in intralymph node distribution and antitumor effect are observed. This work provides a strong empirical foundation that nanovaccine researchers should position delivery mode near the top of their considerations for the experimental design, which should speed up nanovaccine development and facilitate efficient selection of appropriate delivery modes in the clinic.