一、材料介绍
- 中文名称：IRDye 800CW-马来酰亚胺、800CW-马来酰亚胺（钠盐）
- 英文名称：IRDye 800CW Maleimide、IRDye 800CW-Maleimide
- 别称：800CW-Mal、马来酰亚胺-IRDye 800CW、近红外巯基标记染料 800CW-Maleimide
- CAS：1279564-25-8
- 分子式/分子量：常见盐型资料给出 C₅₂H₅₇N₄Na₃O₁₆S₄，约 1191.25 Da；钠盐变体也有 1149.3 Da 的报道，以 COA 为准。
IRDye 800CW Maleimide 是把近红外花菁染料 IRDye 800CW 与马来酰亚胺（Maleimide）活性基团连在一起的功能化标记试剂。它的工作逻辑很直接：染料负责“被看见”，马来酰亚胺负责“连上去”。在 pH 6.5–7.5 条件下，马来酰亚胺与半胱氨酸侧链的游离巯基（–SH）发生 Michael 加成，形成稳定硫醚键，从而把 800 nm 附近的近红外荧光挂到蛋白、抗体片段、多肽、适体或巯基化纳米材料上。
二、产品物理化学性质
- 性状：深绿色、蓝黑色或深绿至蓝黑色固体粉末，具体颜色随盐型、纯度和批次变化。
- 溶解性：易溶于 DMSO、DMF、甲醇；也可溶于水相缓冲液，但母液通常用无水 DMSO 配制，再稀释进 PBS/HEPES。
- 光谱：Ex ≈ 774 nm，Em ≈ 789–792 nm；摩尔消光系数约 240,000 M⁻¹cm⁻¹。该波段位于生物组织自发荧光较低的近红外区域，适合活体成像、组织切片成像和 Western blot 近红外检测。
- 反应基团：Maleimide，专一指向游离巯基；在含 DTT、β-巯基乙醇、TCEP 等还原剂的体系中易水解或发生竞争反应。
- 纯度：科研级常见 95%+，高纯级可按项目做更高纯度与 HPLC/MS 确证。
- 储存：-20℃，避光、干燥、密封；母液分装，避免反复冻融。
- 运输：低温运输；到货后尽快入 -20℃。
- 保质期：密封干粉通常参考 1 年或更长，以批次 COA 为准。
- 供应商：西安瑞禧生物科技有限公司
- 温馨提示：IRDye 800CW Maleimide 仅供科研使用，不能用于人体实验、临床诊断、治疗或食用。
三、实验设计与检测方法
1. 实验设计要点
- 目标分子是否含游离 –SH
天然蛋白可借助表面半胱氨酸直接标记；IgG 等分子常需 TCEP/DTT 轻度还原二硫键，再经脱盐柱或透析去掉还原剂，否则还原剂会消耗马来酰亚胺。 - 缓冲液选择
推荐 PBS 或 HEPES，pH 7.0–7.5；避免 Tris、甘氨酸等含胺缓冲液，也避免 DTT、β-ME、TCEP 残留。 - 染料/蛋白摩尔比
常见 3:1–10:1，小分子肽可更高，完整抗体常取较低比例以保留活性。需通过预实验优化 DOL（Degree of Labeling，标记度）。 - 反应条件
避光、4℃ 或室温，温和混匀 1–2 h；时间过长可能增加水解副反应。 - 淬灭与纯化
可用过量半胱氨酸/β-巯基乙醇淬灭未反应马来酰亚胺，再用脱盐柱、超滤、凝胶过滤或 HPLC 去掉游离染料。游离染料不去除会显著提高背景。
2. 检测方法
- 紫外-可见吸收：IRDye 800CW 在 ~774 nm 有强吸收，可用于浓度计算。
- 荧光光谱：Ex/Em ≈ 774/789 nm，近红外成像系统、荧光分光光度计、Western 近红外扫描仪均可检测。
- 标记度计算：测蛋白 A₂₈₀ 与染料 A₇₇₄，校正染料在 280 nm 处的吸收后算 DOL。
- 纯度/均一性：SEC-HPLC、SDS-PAGE、毛细管电泳可看游离染料、聚体和标记产物分布。
- 结构确证：HPLC、LC-MS、¹H NMR 用于原料与偶联物鉴定。
- 活体/离体成像：小动物 NIR 成像、肿瘤靶向分布、淋巴示踪、手术导航模型、组织切片扫描均属于其科研应用场景。
3. 常见应用
- 抗体/纳米抗体/affibody 的近红外示踪；
- 多肽、适体、蛋白药物的体内分布与药代研究；
- 脂质体、LNP、金纳米粒、聚合物纳米粒表面巯基化后荧光标记；
- Western blot、In-Cell Western、免疫荧光、组织切片近红外检测；
- 多通道成像中与 Cy5、Cy7、IRDye 680 等搭配。
四、瑞禧生物能提供该材料不同规格的产品
瑞禧生物围绕 IRDye 800CW 与蛋白/纳米标记平台，可提供：
1. IRDye 800CW 活性基团规格
- IRDye 800CW Maleimide（巯基标记）
- IRDye 800CW NHS Ester（氨基标记）
- IRDye 800CW DBCO / Azide / Alkyne（点击化学）
- IRDye 800CW Hydrazide / Carboxylate 等变体
2. 包装与纯度规格
- 小试：1 mg、5 mg、10 mg、25 mg
- 常规：50 mg、100 mg、250 mg、500 mg
- 放大：1 g 及以上按需定制
- 纯度：95%+、98%+；可附 HPLC、MS、COA、MSDS
3. 标记定制服务
- 蛋白/抗体 800CW 标记（氨基或巯基策略）
- 多肽 800CW 标记
- 纳米粒/脂质体表面 800CW 功能化
- 800CW 标记蛋白 + 纳米金/磁珠/介孔硅复合探针
- DOL 优化、游离染料去除、稳定性与保存方案设计
4. 同平台近红外染料
- IRDye 680RD / 680LT
- IR 750、IR 780、IR 808、IR 825
- ICG、Cy5、Cy5.5、Cy7 及对应 NHS/Mal/DBCO 衍生物
5. 配套试剂与载体
- 脱盐柱、超滤管、SEC 介质
- 巯基化蛋白/纳米粒构建试剂
- DSPE-PEG-Mal、mPEG-SH、NHS-PEG-SH 等表面修饰材料
- 靶向脂质体、LNP、聚合物纳米粒、外泌体表面荧光标记方案
再次提示：IRDye 800CW Maleimide 是科研用近红外标记试剂，仅供实验室研究，不能用于人体实验。