一、名称与基本身份

  • 中文名称：二苯并环辛炔-二硫键-聚乙二醇4-生物素
  • 英文名称：DBCO-SS-PEG4-Biotin、Dibenzocyclooctyne-Disulfide-Tetraethylene Glycol-Biotin
  • 别称：DBCO-二硫键-PEG4-生物素、二苯并环辛炔-SS-PEG4-生物素、Azide-SPAAC cleavable biotin linker、可裂解生物素化点击连接子
该分子把四种功能压进一条短链：
DBCO​ 负责无铜点击，SS​ 负责还原响应裂解，PEG4​ 负责亲水间隔，Biotin​ 负责链霉亲和素/亲和素捕获。它不属于药品、诊断试剂或人体用制剂，而是化学生物学里“先标记、再捕获、可温和释放”的科研连接子。

二、中心内容：产品特性与工作机制

1. DBCO 端：无铜点击偶联

DBCO（二苯并环辛炔）是应变环辛炔，可与叠氮基（–N₃）发生 SPAAC（应变促进叠氮-炔环加成），在生理 pH、水相缓冲液中形成稳定三唑环，不需 Cu(I) 催化。
因此它能接在叠氮化蛋白、抗体片段、多肽、寡核苷酸、脂质体、纳米粒、水凝胶表面，把“生物素标签”装到目标物上。

2. SS（二硫键）：还原响应断裂点

二苯并环辛炔-二硫键-聚乙二醇4-生物素 DBCO-SS-PEG4-Biotin 产品特性

–S–S– 在还原环境下可断裂：
  • 细胞外/血液环境：GSH 约 10 µM，二硫键较稳定；
  • 细胞内/溶酶体环境：GSH 2–10 mM，二硫键可发生裂解；
  • 实验洗脱：DTT、TCEP 可温和还原释放目标物。
和普通 Biotin-PEG-DBCO 不同，它允许“捕获后不放变性条件也能脱开”：用 10–50 mM DTT 或 TCEP 还原二硫键，目标蛋白/多肽可从链霉亲和素树脂上以较接近天然的状态洗脱，减少 SDS、煮沸、8 M 尿素等烈性条件对分子复合物的破坏。

3. PEG4：短而有效的间隔臂

二苯并环辛炔-二硫键-聚乙二醇4-生物素 DBCO-SS-PEG4-Biotin 产品特性

PEG4 = 四乙二醇单元。相比 PEG2 更柔、相比长链 PEG2k/5k 更不臃肿：
  • 提升水相溶解性；
  • 减少 DBCO 芳香环带来的疏水吸附；
  • 给 Biotin 与 Streptavidin 结合留出空间；
  • 又不会把连接子做得过长而导致膜表面/颗粒表面“毛刷化”过度。
在蛋白组学 pull-down、亲和捕获、活细胞表面标记里，PEG4 是常见的平衡选择。

4. Biotin 端：亲和捕获与信号放大

Biotin 与 Streptavidin/Avidin/NeutrAvidin 亲和力高，可用于：
  • 链霉亲和素磁珠富集；
  • 微孔板/芯片二次捕获；
  • HRP-链霉亲和素、荧光链霉亲和素信号放大；
  • AP-MS（亲和纯化质谱）前处理。
所以整条分子的实验逻辑是：
N₃-目标物 → SPAAC 接 DBCO-SS-PEG4-Biotin → Streptavidin 捕获 → DTT/TCEP 还原 SS → 释放目标物。

三、理化参数（简述）

二苯并环辛炔-二硫键-聚乙二醇4-生物素 DBCO-SS-PEG4-Biotin 产品特性

  • 性状：米白色至淡黄色固体粉末，或浅黄油状/半固体（依合成路线与纯度而异）
  • 分子式/分子量：市面资料常见 C45H62N6O9S3，约 927.2；也有供应商按不同保护基/盐型给 C44H60N6O9S3 等，以 COA 为准。
  • 溶解性：DMSO、DMF 溶解性较好；水中有一定分散性，PEG4 提供帮助，但不等于高浓纯水自由溶解；氯仿、二氯甲烷也可用。
  • 纯度：科研级 95%+，高纯可做到 98%+。
  • 储存：-20℃，避光、干燥、密封；DBCO 怕光氧化，SS 怕强还原/强氧化波动。
  • 运输：低温运输；到货后尽快入 -20℃。
  • 保质期：粉末密封避光 -20℃ 通常参考 1 年，溶液状态短于固态，以批次 COA 为准。
  • 供应商：西安瑞禧生物科技有限公司
  • 温馨提示：仅供科研，不能用于人体实验、临床诊断、治疗或食用。

四、主要应用方向

  1. 蛋白质组学 / 互作组学​
    叠氮代谢标记蛋白 → DBCO-SS-PEG4-Biotin 标记 → 链霉亲和素富集 → 质谱鉴定 → DTT 还原回收复合物。
  2. 可逆生物素化​
    细胞表面叠氮糖/叠氮氨基酸标记后，用该连接子加 Biotin 标签；后续可用还原剂把标签从界面上“摘掉”，研究表面蛋白动态。
  3. 纳米载体功能化​
    叠氮脂质体/LNP/金纳米粒接该分子后获得 Biotin 外衣，再用链霉亲和素偶联荧光探针、蛋白、抗体片段；胞内 GSH 环境可触发 SS 断裂。
  4. ADC / 可裂解连接子研究​
    虽 Biotin 不是细胞毒载荷，但该分子的“点击 + 可裂解 + 亲和标签”架构常被用作 ADC linker、探针 linker、纯化 linker 的方法学参照。
  5. 材料界面与生物传感器​
    叠氮硅片、叠氮水凝胶、叠氮聚合物刷表面引入 Biotin 功能；再用亲和素体系做二级组装或检测平台搭建。

五、瑞禧生物可供应的相似 / 上下游产品

1. 同家族：DBCO + SS + Biotin / 亲和标签

  • Biotin-PEG3-SS-DBCO
  • Biotin-PEG4-SS-DBCO
  • Biotin-PEG-SS-DBCO（长链 PEG 版）
  • Desthiobiotin-PEG4-DBCO（脱硫生物素，低 pH/游离生物素温和洗脱）
  • SS-Desthiobiotin-PEG-DBCO
  • Biotin-SS-Azide（点击端换成叠氮）
  • Biotin-SS-Alkyne（点击端换成炔基）

2. 不可裂解对照

  • DBCO-PEG4-Biotin
  • DBCO-PEG3-Biotin
  • DBCO-PEG-Biotin（不同 PEG 长度）
  • Biotin-PEG4-DBCO
这类产品用于和“可裂解版”做 pull-down 洗脱率、目标物活性保留率对照。

3. 其他可裂解连接子

  • DBCO-SS-PEG-NHS
  • DBCO-SS-PEG-MAL
  • DBCO-SS-PEG-SH / OPSS
  • NHS-SS-Biotin
  • Sulfo-NHS-SS-Biotin
  • Azide-SS-Biotin
  • Biotin-PEG3-SS-NHS

4. 点击化学端替换

  • Azide-PEG4-Biotin
  • Alkyne-PEG4-Biotin
  • TCO-PEG-Biotin
  • Tetrazine-PEG-Biotin
  • BCN-PEG-Biotin

5. 链霉亲和素体系配套

  • Streptavidin magnetic beads
  • NeutrAvidin resin
  • HRP-Streptavidin
  • FITC / Cy3 / Cy5-Streptavidin
  • 叠氮化 BSA、叠氮化抗体 Fc、N₃-PEG-DSPE 等模型底物

6. 定制方向

瑞禧生物可沟通：
  • PEG 长度：PEG2 / PEG3 / PEG4 / PEG8 / PEG12 / PEG2k–10k；
  • 端基组合：DBCO / Azide / BCN / TCO / Tetrazine × Biotin / Desthiobiotin / Fluorescent dye / Drug-linker；
  • 裂解键：SS、Tetrazine、腙、酯酶敏感肽、组织蛋白酶敏感 Val-Cit / Val-Ala；
  • 载体级产品：叠氮脂质体、DBCO 表面修饰 LNP、Biotin 功能化纳米金/磁珠/介孔硅。

六、小结

DBCO-SS-PEG4-Biotin 的特点不是“反应快”或“结合强”，而是把四件事放在同一条短链上：
无铜点击 + 亲水间隔 + 还原裂解 + 生物素捕获。
它适合做蛋白互作富集、可逆生物素化、叠氮材料功能化、ADC/探针连接子方法学开发。科研使用时，关键控制点是 DBCO 避光防氧化、SS 避免提前还原、Biotin 端避免游离生物素污染、洗脱时用 DTT/TCEP 而非变性剂来保活性。
再次提示：DBCO-SS-PEG4-Biotin 仅供科研使用，不能用于人体实验。