产品说明

描述

HO-PEG-MAL是异双功能PEG衍生物，一端为马来酰亚胺MAL基团，另一端是伯羟基，中间PEG柔性连接臂。马来酰亚胺是巯基特异性反应基团，在pH 6.0–7.0温和条件下，和巯基（-SH）发生迈克尔加成反应，生成稳定硫醚键；羟基化学活性温和，在巯基加成反应条件下保持惰性，后续可以磺酰化、酯化活化进行二次衍生。该试剂属于巯基标记正交中间体，实验路线优先进行马来酰亚胺-巯基偶联，把PEG骨架锚定到巯基修饰多肽、蛋白、纳米颗粒上，纯化之后再活化羟基拓展新功能基团。马来酰亚胺在碱性环境（pH＞7.5）容易水解开环失活，反应窗口对pH敏感；羟基则在宽泛pH条件下稳定。HO-PEG-MAL弥补了MAL-PEG活性端单一的局限，在巯基标记之后保留一个可拓展位点，适合两步法构建巯基靶向双功能探针。PEG链降低马来酰亚胺的空间位阻，提升巯基偶联效率，同时降低非特异性蛋白吸附。

基本信息

中文名称：羟基聚乙二醇马来酰亚胺
英文名称：HO-PEG-MAL
常用PEG分子量：1000、2000、3400、5000 Da
外观：白色固体粉末
溶解性：溶于DMSO、DMF、DCM，低分子量可溶于水
基团特性：MAL和巯基特异性加成（pH6–7很优）；羟基低活性，需活化衍生
储存条件：-20℃密封避光干燥保存，远离强碱、氨基挥发物，防止马来酰亚胺水解

作用原理

HO-PEG-MAL两端官能团反应正交。马来酰亚胺双键可以特异性识别巯基，在弱酸性至近中性条件发生迈克尔加成，对羟基、氨基、羧基等绝大多数基团惰性；当体系pH超过7.5，马来酰亚胺会逐步水解开环，丧失和巯基反应能力。羟基在MAL加成条件下不参与反应，等巯基偶联完成、产物纯化之后，转移至无水有机体系，使用TsCl、酸酐等活化试剂改造羟基，引入新的功能基团。PEG间隔臂隔开两个功能位点，避免底物空间遮挡，保证两步反应都能顺利进行。该试剂的使用逻辑：先巯基共价标记，再羟基衍生拓展，适合需要在巯基底物上二次修饰的合成方案。如果顺序反过来，先活化羟基，活化产物OTs、羧基等有可能和体系内巯基发生副反应，所以行业常规路线优先MAL-SH加成。

使用指南

实验分为巯基迈克尔加成模块、羟基活化衍生模块两部分，严格控制巯基反应pH。
模块一：巯基偶联反应。配制pH 6.5的PBS或者MES缓冲液；溶解巯基底物（巯基多肽、巯基化纳米颗粒），加入HO-PEG-MAL，MAL摩尔当量1.2–1.5倍；室温避光孵育1–2 h；反应终点可以加入少量半胱氨酸淬灭剩余马来酰亚胺；超滤或者透析除去游离HO-PEG-MAL。pH严禁高于7.5，防止MAL水解。
模块二：羟基磺酰化衍生。将第一步产物冻干，氮气保护溶于无水DCM；加入三乙胺、对甲苯磺酰氯，室温搅拌6–8 h；洗涤沉淀纯化得到MAL加成后的OTs中间体，可继续和亲核试剂取代。也可以选用丁二酸酐路线，把羟基转化为羧基，用于后续氨基偶联。 质控要点：Ellman试剂检测巯基消耗，判断加成转化率；平行不加巯基底物空白组，评估MAL水解；MAL试剂避光操作；缓冲液避免含游离巯基杂质。

应用场景

巯基生物分子分步标记、巯基化纳米颗粒表面修饰、硫醚键连接生物偶联中间体、双功能巯基靶向探针合成。

常见热门问题解答

问题1：马来酰亚胺能不能和氨基反应？
解答：pH＜7条件下和氨基反应很慢，选择性很好；pH偏高时会和氨基发生副反应，同时自身水解。

问题2：MAL水解产物还有活性吗？ 
解答：水解开环之后失去和巯基加成能力，无法继续使用。

问题3：能不能先活化羟基再和巯基反应？ 
解答：不推荐，OTs等活化羟基会和巯基发生亲核取代，副产物复杂。

问题4：巯基反应温度需要控制吗？ 
解答：室温即可，升温会加速MAL水解，不建议加热。