产品说明

DSPE-PEG-Estrogen，雌性激素-聚乙二醇PE磷脂，全称二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-雌性激素，是类固醇激素配体修饰PEG磷脂，依靠雌激素受体ER介导靶向识别，多用于雌激素受体阳性细胞靶向脂质载体、激素受体相关纳米递送体系研发，是类固醇靶向磷脂中非常一款原料。该分子由DSPE疏水磷脂锚定段、PEG亲水连接臂、末端雌性激素（雌二醇为主）配体共价偶联而成；PEG分子量可选2000、3400、5000Da，DSPE-PEG2000-Estrogen使用很广。产品外观白色粉末，可溶于氯仿、二氯甲烷、甲醇等有机溶剂，可和磷脂、胆固醇、荧光磷脂共混，通过薄膜分散、乙醇注入法制备ER靶向脂质体、胶束、LNP，HPLC纯度≥95%，类固醇配体化学稳定性优于多肽、蛋白配体，耐受度更高。 DSPE疏水双链嵌入脂质双分子层，稳定锚定在纳米载体表面；PEG柔性链作为间隔臂，隔开载体骨架和雌激素小分子，消除空间位阻，让雌激素配体能够和细胞内/细胞膜雌激素受体正常结合，同时提供PEG长循环、抗蛋白吸附能力，延长载体循环时间；末端雌激素是靶向识别核心，小分子类固醇可以特异性结合雌激素受体ERα、ERβ，ER阳性细胞会通过受体介导途径摄取该配体修饰的纳米载体。对比蛋白、多肽配体，雌激素是小分子，化学稳定性强，不怕蛋白酶降解，有机相兼容性好，脂质体制备工艺窗口更宽，不容易在制备过程失活，批次稳定性更高。
DSPE-PEG-Estrogen科研用途围绕雌激素受体靶向递送展开。第一，ER阳性细胞靶向脂质体制备，将该磷脂掺入脂质配方，包载模型药物、荧光探针、核酸，构建雌激素受体靶向纳米载体，在ER阳性细胞模型上开展细胞摄取实验，对比普通PEG脂质体富集差异，用于ER相关靶向递送体系筛选。第二，雌激素受体结合机制研究，构建类固醇修饰仿生脂质界面，在细胞、SPR体系研究雌激素配体和ER受体的结合亲和力、结合动力学，研究配体修饰密度对受体激活、内化的影响，是核受体、类固醇信号通路基础研究工具。第三，荧光靶向探针开发，搭配DSPE-PEG-FITC、Cy系列荧光磷脂，制备雌激素修饰荧光脂质体，利用共聚焦、流式细胞仪观察ER阳性细胞对载体的吸附、胞吞、胞内转运，追踪载体是否进入细胞核区域，研究受体介导胞内转运路径。第四，LNP核酸载体靶向改性，用于siRNA、mRNA递送，提升载体对ER阳性细胞选择性转染效率，降低ER阴性细胞非特异转染背景。第五，类固醇配体构效研究，对比雌激素、孕激素等不同类固醇修饰磷脂的受体选择性差异，研究PEG长度、雌激素投料比例对靶向效率、载体理化稳定性的影响，优化靶向处方。第六，用于激素受体表达细胞的捕获、分选界面修饰，修饰微球、生物芯片表面，选择性捕获ER阳性细胞，搭建体外细胞筛选模型。
虽然雌激素小分子稳定性优于蛋白多肽磷脂，但依然有专属使用限制。第一，储存条件：-20℃避光密封干燥保存，可分装，相比蛋白配体耐受少量冻融，但不建议频繁反复冻融；雌激素属于类固醇，对紫外强光敏感，长期光照会氧化降解，失去受体结合活性，全程避光；防潮，酯键长期受潮缓慢水解，配体脱落。第二，投料摩尔占比常规1~4%，梯度优化；比例过高，一方面载体容易聚集，另一方面高浓度雌激素配体可能诱发受体持续激活、受体脱敏，反而降低载体摄取；比例过低靶向信号弱，和对照组差异不明显。第三，制备温度，虽然类固醇热稳定性较好，但旋蒸、水合温度建议控制在60℃以内，避免长时间高温氧化；避免强氧化剂接触样品，氧化剂会破坏雌激素酚羟基结构，直接失活。第四，特异性验证，游离雌激素竞争实验是金标准，孵育体系加入过量游离雌二醇，竞争性抢占ER受体，靶向信号显著下降才能证明受体介导摄取，排除疏水吸附、静电吸附假阳性。第五，细胞模型注意：ER受体有亚型差异（ERα、ERβ），不同细胞亚型表达谱不一样，部分细胞受体在胞内，载体需要跨过细胞膜才能接触核受体，细胞摄取动力学和细胞膜表面受体配体有明显区别，解读实验数据需要区分受体亚细胞定位。第六，应用边界：本品仅限科研试剂，仅用于载体研发、受体机制研究，不属于激素类药物，不可用于动物给药治疗、人体使用；雌激素配体具备生物学活性，高浓度条件下会影响细胞增殖、信号通路，同步设置细胞增殖、通路激活对照，区分载体毒性和配体本身激素效应。第七，过滤操作：类固醇磷脂疏水性更强，更容易吸附滤膜，选用低吸附0.22μm滤头，缓慢推注；制备好的脂质分散液4℃短期存放，不建议长期冻存，冻融容易造成脂双层破坏，配体流失。第八，对照设置，阴性对照选用DSPE-mPEG，条件允许可选用无受体亲和力的类固醇类似物修饰磷脂作为对照，排除类固醇疏水骨架带来的非特异结合，保证靶向结论严谨可靠。