一、基础信息卡

  • 中文名称:链霉亲和素磁珠
  • 英文名称:Streptavidin Magnetic Beads
  • 常用别称:SA磁珠、Streptavidin磁珠、链霉亲和素包被磁珠、SA-MB、亲和素磁珠(链霉亲和素型)
  • 性状:棕黑色或深褐色磁性悬液(超顺磁微球分散于保护液),粒径可选 50 nm / 100 nm / 200 nm / 300 nm / 1 μm / 2 μm / 5 μm
  • 溶解性:可均匀分散于纯水、PBS、Tris缓冲液;保护液含BSA/ProClin/叠氮钠体系,不可自行干燥或冻存
  • 表面偶联物:重组链霉亲和素(四聚体,约53 kDa,非糖基化,pI近中性)
  • 结合能力参考:生物素化IgG ≥10–20 μg/mg磁珠;生物素化寡核苷酸 ≥350–500 pmol/mg磁珠(依粒径与包被密度而异)
  • 纯度:链霉亲和素蛋白 SDS-PAGE ≥95%;磁珠悬浮体系科研级
  • 储存条件:2–8℃避光密封保存,切勿冷冻、干燥或高速离心
  • 保质期:6–24个月(依粒径与保护液配方,COA标注)
  • 运输条件:2–8℃低温蓝冰运输,避光防水
  • 供应商:西安瑞禧生物科技有限公司
  • 应用方向:生物素化核酸/蛋白/抗体捕获、免疫沉淀(IP/Co-IP)、pull-down、细胞分选、杂交捕获、NGS靶标富集、生物传感
  • 温馨提示:本产品仅供科研实验使用,不能用于人体实验、临床诊疗及食品用途。

二、材料相关介绍

1. 结构组成与识别机制

链霉亲和素磁珠 = 超顺磁核(Fe₃O₄基)+ 亲水涂层(PEG/葡聚糖/硅层)+ 共价固定链霉亲和素
链霉亲和素为同源四聚体,每个亚基可结合1个生物素(Biotin),单颗磁珠表面可固定大量SA分子,形成多价捕获界面。生物素-链霉亲和素相互作用特征:
  • 亲和常数 Kd ≈ 10⁻¹⁵ M,属已知强非共价结合之一;
  • 耐受一定浓度变性剂、去垢剂、宽pH范围;
  • 相比鸡蛋清亲和素(Avidin),链霉亲和素无糖基化、中性pH下背景更低。
磁核赋予“外加磁场1分钟内沉降、撤场重悬”的分离能力,省去离心柱层析步骤。

2. 物理化学行为

  • 超顺磁性:无外场不剩磁,悬液长期稳定不团聚;
  • 比表面积随粒径减小而增大:50–200 nm纳米珠适合微量核酸/探针捕获;1–5 μm微球适合细胞分选与高载量蛋白pull-down;
  • 保护液体系:含BSA降低非特异吸附,含抑菌剂延长悬液寿命;
  • 避免冷冻:冰晶会破坏水化层与蛋白构象,导致聚集与容量下降。

3. 实验价值定位

它不是普通“吸附填料”,而是“生物素化世界”的通用固相手:
任何能接生物素的分子(抗体、抗原、寡核苷酸、多肽、细胞表面标记、纳米粒、适配体)都可通过SA磁珠被富集、分离、洗脱与检测。

三、实验应用与操作逻辑

3.1 生物素化分子捕获(通用流程)

链霉亲和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads)技术资料:捕获原理与实验应用

  1. 磁珠使用前涡旋20 s重悬,磁性分离1 min,弃上清;
  2. 用结合缓冲液(PBS/Tris,含0.05% Tween-20、0.1% BSA)洗涤2–3次;
  3. 加入生物素化靶分子(抗体/核酸/蛋白),室温旋转孵育30–60 min;
  4. 磁分离,收上清(未结合),磁珠用缓冲液洗5次;
  5. 用于IP、检测、洗脱或下游建库。

3.2 免疫沉淀与蛋白互作(IP / Co-IP / Pull-down)

链霉亲和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads)技术资料:捕获原理与实验应用

  • 用生物素化抗体捕获抗原或蛋白复合物;
  • 与未标记抗体+Protein A/G磁珠做平行对照;
  • 洗脱条件:
    • 非变性洗脱:游离生物素竞争(1–2 mM,短时);
    • 变性洗脱:SDS上样缓冲液煮沸(磁珠不可重复使用);
    • 核酸脱落:95%甲酰胺+10 mM EDTA,65℃ 5 min。

3.3 核酸杂交捕获与NGS富集

  • 生物素化探针(5′/3′Biotin-oligo)与样本文库杂交;
  • SA磁珠捕获杂交双链,磁分离去除非靶;
  • 洗涤后洗脱靶序列,用于靶向重测序、外显子富集;
  • 纳米珠(100–200 nm)比表面大,适合低输入量样本。

3.4 细胞分选与单细胞前处理

链霉亲和素磁珠(Streptavidin Magnetic Beads)技术资料:捕获原理与实验应用

  • 细胞表面标记生物素化抗体→SA磁珠结合→磁力架分选(阳性/阴性富集);
  • 无菌级SA磁珠可用于流式分选前处理(仍限科研);
  • 配合荧光标记生物素抗体做多色分选。

3.5 载体与探针组装

  • 生物素-PEG-靶向肽 + SA磁珠 → 构建捕获界面;
  • 生物素化脂质体/外泌体 → 磁珠富集外泌体群体;
  • 脱硫生物素(Desthiobiotin)体系可实现温和可逆洗脱。

四、操作注意与对照设计

  1. 缓冲液中严禁游离生物素(酵母提取物、血清、裂解液可能含内源生物素),需用脱盐柱/超滤去除;
  2. 磁分离时间≥1 min,移液慢吸防磁珠丢失;
  3. 不可超声、不可高速离心、不可-20℃冻存;
  4. 结合容量受生物素化密度影响(抗体2–4个生物素/分子较合适);
  5. 必设对照:
    • 无生物素靶标(背景)
    • 游离生物素竞争组
    • 同型IgG-生物素对照
    • 空白磁珠对照

五、瑞禧生物相关产品与配套体系

1. 磁珠矩阵(粒径与功能定制)

  • 链霉亲和素磁珠:50 nm / 100 nm / 200 nm / 300 nm / 1 μm / 2 μm / 5 μm
  • 中性亲和素磁珠(低背景严苛体系)
  • 单体亲和素磁珠(温和可逆)
  • 羧基磁珠(COOH-Fe₃O₄)、氨基磁珠(NH₂)、环氧磁珠、硅羟基磁珠
  • 链霉亲和素包被二氧化硅微球、PS荧光微球

2. 生物素化试剂与桥接分子

  • Biotin-NHS、Biotin-PEG-NHS、Biotin-PEG-MAL
  • Biotin-PEG-Biotin(双生物素桥)
  • Desthiobiotin-PEG4-NH₂(可逆亲和)
  • 可裂解生物素(二硫键/光裂解)
  • 八臂PEG-Biotin、mPEG-Biotin

3. 生物素化探针与靶向分子

  • Biotin-抗体(一抗/二抗定制)
  • Biotin-寡核苷酸(捕获探针)
  • Biotin-cRGDfk、Biotin-FA、Biotin-多肽
  • Biotin-脂质(DSPE-PEG-Biotin)

4. 检测与分离配套

  • 磁力架(1.5 mL / 15 mL / 96孔)
  • 结合缓冲液、洗涤缓冲液、封闭液(BSA/Tween)
  • 游离生物素洗脱液、变性洗脱体系
  • DLS(粒径/PDI)、BCA(蛋白载量)、结合容量测定(pmol/mg)

5. 定制服务

  • 粒径/表面涂层(PEG化、葡聚糖、硅壳)定制
  • 无菌级细胞分选磁珠处理
  • 高容量SA磁珠(>4000 pmol生物素/mg)
  • 偶联密度与磁响应参数COA交付

六、小结

链霉亲和素磁珠的核心价值是“磁分离的效率 + 生物素系统的特异性”。它把复杂的分离问题转化为“先给目标装一个生物素把手,再用SA磁珠去抓”的模块化流程。在免疫捕获、核酸富集、蛋白互作、外泌体分离与靶向界面构建中,都是可复用、可定量的科研基座工具。
温馨提示:本品为科研试剂,仅供实验室研究使用,不能用于人体实验、临床诊断或治疗。