一、材料基础信息

  • 中文名称：聚-L-赖氨酸-异硫氰酸荧光素（分子量2-5k）
  • 英文名称：Poly-L-Lysine-Fluorescein Isothiocyanate（PLL-FITC, 2-5 kDa）
  • 常用别称：PLL-FITC、FITC-PLL、荧光素标记聚赖氨酸、FITC标记聚-L-赖氨酸、Poly-L-lysine conjugated with FITC
  • 性状：淡黄色至黄绿色冻干粉末或固体粉末（颜色随FITC标记密度变化）
  • 溶解性：易溶于水、PBS、HEPES等水性缓冲液；可溶于DMSO、DMF、甲醇；酸性条件溶解度下降，建议现配现用
  • 分子量：PLL主链 2 kDa – 5 kDa（低聚合度阳离子多肽）
  • 荧光参数：激发波长约 490–495 nm，发射波长约 515–520 nm，呈绿色荧光
  • 纯度：科研级 ≥95%（HPLC、UV定量、荧光光谱质控，可提供COA）
  • 储存条件：-20℃ 避光、干燥、密封保存；避免反复冻融与长时间光照
  • 保质期：原包装合规储存 12 个月
  • 运输条件：低温冰袋或干冰，避光防水，到货后及时回冻
  • 供应商：西安瑞禧生物科技有限公司
  • 应用方向：细胞黏附涂层示踪、基因递送载体追踪、纳米粒表面正电修饰、内吞路径观察、材料界面结合研究
  • 温馨提示：本产品仅供科研实验使用，不能用于人体实验、临床诊疗及食品用途。

二、材料相关介绍

1. 结构组成与偶联原理

PLL-FITC 由两部分构成：
  • PLL（聚-L-赖氨酸）主链：线性阳离子多肽，侧链含大量 ε-氨基，在生理pH下带正电，可与核酸磷酸骨架、细胞膜负电区发生静电结合；
  • FITC（异硫氰酸荧光素）：通过异硫氰酸酯基（–N=C=S）与PLL表面伯胺反应，形成稳定硫脲键（–NH–CS–NH–），共价固定不易脱落。
2-5k 分子量属于短链PLL：溶液黏度低、扩散快、穿膜与铺展行为更灵活，适合做高分辨示踪与静电复合研究。

2. 物理化学特征

  • 正电荷密度高：pH 7.4 附近Zeta呈明显正电，利于结合DNA/siRNA与负电表面；
  • 荧光可视：FITC绿色信号可在共聚焦、流式、荧光显微镜直接读取；
  • 标记密度可调：FITC/PLL摩尔比可控，避免过度标记引起聚集或电荷屏蔽；
  • 对光pH敏感：FITC在强酸/强碱或长时间曝光下会淬灭，需避光操作。

三、实验应用逻辑

3.1 细胞培养基底涂层与黏附示踪

PLL常用于玻片、培养板、微流控芯片表面改性，提升细胞贴壁效率。
  • 用 PLL-FITC（2-5k）稀溶液（如 1–10 μg/mL PBS）包被基底；
  • 荧光下直接看涂层均匀性；
  • 接种细胞后观察黏附、铺展、迁移过程，区分“材料分布”和“细胞响应”。

3.2 基因递送（DNA/siRNA）复合与追踪

短链PLL可通过静电压缩核酸形成 polyplex：
  • PLL-FITC 与 pDNA/siRNA 按 N/P 比 2–10 混合；
  • 形成 50–200 nm 阳离子复合物；
  • 共聚焦观察细胞摄取、内体滞留、胞质释放；
  • 对比非标记PLL，量化转染效率与分布差异。

3.3 纳米载体表面修饰

PLL-FITC 可吸附或共价接枝到：
  • 脂质体、LNP、PLGA粒、金粒、二氧化硅表面；
  • 通过正电层增强与细胞/膜的初始结合；
  • 荧光端用于追踪载体在体内的淋巴结富集与器官分布。

3.4 内吞与亚细胞定位

利用绿色荧光可研究：
  • 网格蛋白/小窝蛋白内吞路径（抑制剂阻断对照）；
  • 内体逃逸效率（与LysoTracker共染）；
  • 载体在溶酶体中的降解与滞留。

3.5 生物材料界面研究

PLL-异硫氰酸荧光素，2-5k PLL-FITC，2-5k 聚-L-赖氨酸-异硫氰酸荧光素 实验应用

用于水凝胶、胶原支架、微针、膜片表面：
  • 示踪聚阳离子在三维基质中的渗透；
  • 定量材料表面正电密度与蛋白吸附关系；
  • 配合流式分析支架浸提液与细胞相互作用。

四、实验操作建议

PLL-异硫氰酸荧光素，2-5k PLL-FITC，2-5k 聚-L-赖氨酸-异硫氰酸荧光素 实验应用

  1. 母液配制：用无菌水/DMSO配 1–5 mg/mL 母液，分装避光，-20℃保存；
  2. 工作液：PBS稀释至 0.1–20 μg/mL，现用现配；
  3. 偶联/混合：与核酸混合时用无酶水/HEPES，避免含胺缓冲（Tris、甘氨酸）；
  4. 成像：488 nm激发，505–530 nm接收绿光；控制曝光时间防光漂白；
  5. 对照设置：
    • 游离FITC（背景泄漏对照）
    • 非标记PLL（电荷对照）
    • 阴性载体（无PLL）

五、相关材料与配套产品（瑞禧生物供应）

PLL-异硫氰酸荧光素，2-5k PLL-FITC，2-5k 聚-L-赖氨酸-异硫氰酸荧光素 实验应用

1. 不同分子量 PLL-FITC

  • PLL-FITC 0.5k / 1k / 2k / 3k / 5k
  • PLL-FITC 15k / 30k / 70k（高黏附涂层用）

2. 未标记与功能化PLL

  • PLL（聚-L-赖氨酸）盐酸盐 2-5k
  • PLL-NH₂、PLL-COOH、PLL-MAL
  • PLL-PEG-FITC（含PEG间隔，降低非特异吸附）
  • ε-聚赖氨酸-FITC（ε-PL-FITC，抗菌界面研究）

3. 其他荧光PLL

  • PLL-RB（罗丹明B，红橙光）
  • PLL-Cy5 / Cy7（近红外）
  • PLL-ICG（近红外示踪）

4. 核酸递送配套

  • siRNA、pDNA标准品
  • 可电离脂质（SM-102、MC3、DODMA）
  • DSPE-PEG、mPEG-DSPE
  • 内体逃逸标记（LysoTracker、Hoechst）

5. 检测与表征

  • 荧光分光光度计（定量FITC标记率）
  • HPLC（游离FITC残留）
  • DLS/Zeta（polyplex粒径与电位）
  • 共聚焦/流式细胞术方案支持

六、使用注意

  1. FITC对光、氧、极端pH敏感，全程避光、低温操作；
  2. 强正电特性易与玻璃/塑料器壁非特异吸附，建议用低吸附管；
  3. 高浓度长时间与细胞接触可能产生一定膜扰动，需做浓度梯度预实验；
  4. 所有动物/细胞实验须在合规科研框架内开展，禁止人体接触。
温馨提示：本品为科研试剂，仅供实验室研究使用，不能用于人体实验、临床诊断或治疗。