产品说明

简单描述

Sulfo-CY5 DBCO是一款集水溶性Sulfo-CY5荧光团与DBCO环炔基团于一体的无铜点击化学荧光标记试剂，专门用于叠氮修饰生物分子的荧光示踪。磺酸基团赋予染料良好水相相容性，在生理缓冲液中直接溶解，无需有机助溶剂；DBCO基团可以和叠氮基团发生SPAAC环张力促进的炔-叠氮环加成反应，反应全程不需要铜离子催化，规避铜离子带来的蛋白氧化、细胞毒性等问题。Cy5远红光荧光信号背景低、检测灵敏度高，适配共聚焦、流式、小动物活体成像等主流设备。该染料反应选择性高，不和蛋白天然氨基、巯基发生交叉反应，适合位点特异性标记叠氮改造抗体、重组蛋白、多肽、核酸以及纳米载体，在ADC定点标记、糖基化标记、代谢标记、活细胞内点击成像领域使用广。

基本信息

中文名称：磺基-CY5 DBCO
英文名称：Sulfo-CY5 DBCO，Sulfo-Cyanine5 DBCO CAS号：1564286-24-3
类别：水溶性点击化学荧光染料、SPAAC标记探针
外观：深蓝色固体粉末

纯度：≥95% 
光谱参数：λabs=649 nm，λem=672 nm
消光系数：271000 L·mol⁻¹·cm⁻¹
溶解性：很易溶于水，溶于DMSO、DMF、甲醇
反应基团：DBCO（环炔，与叠氮基团SPAAC反应）
储存条件：-20℃避光密封干燥保存
保质期：妥善储存6个月

结构与作用原理

分子由三部分构成：Sulfo-CY5荧光发色团、柔性连接臂、DBCO二苯并环辛炔。磺化Cy5母核维持远红光荧光特性与水溶性，抑制染料聚集淬灭；DBCO环炔结构存在环张力，在无铜常温条件下即可和叠氮基团高效发生环加成，生成稳定的三唑环共价键，反应正交性很强，在复杂生物体系中特异性突出。常规铜催化点击反应产生的铜离子容易氧化蛋白、诱导细胞凋亡，而SPAAC反应完美避开该缺陷，支持活细胞、活体层面标记。染料进入体系后，只富集在预先引入叠氮修饰的生物分子位点，实现定点荧光标记；荧光信号处于远红光窗口，组织穿透能力优于短波长染料，自发荧光干扰低。染料本身无细胞毒性，反应条件温和，不会破坏蛋白高级结构与生物活性。

使用说明

1. 母液配制：优先PBS缓冲液或者DMSO配制母液，浓度推荐1–5 mM，避光分装，减少反复冻融。

2. 叠氮修饰生物分子标记：将染料按照1.2–2倍摩尔当量加入叠氮修饰蛋白/抗体溶液，pH7.2–7.4 PBS缓冲体系，室温避光反应4–12 h；无需额外催化剂。

3. 纯化质控：反应结束采用超滤或者尺寸排阻色谱去除未反应游离染料；HPLC、质谱验证标记效率，SEC-HPLC检测蛋白聚集。

4. 活细胞代谢标记：代谢糖工程、叠氮非天然氨基酸标记细胞之后，加入Sulfo-CY5 DBCO孵育，PBS清洗后直接共聚焦成像；注意控制染料浓度，降低非特异性吸附背景。

5. 多色成像搭配：可和Cy3酰肼、Cy7羧酸等染料组合搭建多通道标记方案。

6. 注意事项：体系内不能存在高浓度游离炔类杂质；DBCO基团长期在强碱环境下稳定性下降。

储存与安全注意事项

避光干燥低温存放，回温开盖防潮。操作佩戴防护用具，避免接触皮肤。仅限体外科研、小动物活体成像研究，不用于临床。染料废液统一按荧光危废处置。

应用场景与优势

主打无铜点击化学定点荧光标记，适合代谢糖标记、非天然氨基酸标记、ADC叠氮定点示踪、核酸与纳米载体标记；水溶性版本适配对有机溶剂敏感的蛋白与活细胞体系。对比脂溶性Cy5-DBCO，不容易造成蛋白沉淀、细胞非特异性染色，反应温和、选择性高，是位点特异性生物偶联、活细胞点击成像的主流荧光标记试剂。