产品说明

单磷酸-PEG5K-SH是一款异双功能PEG衍生物，PEG骨架分子量5000 Da，一端为单磷酸基团，另一端为巯基（-SH），是同时具备矿化锚定能力与巯基反应活性的亲水修饰试剂。长链PEG5K带来良好的水溶性与空间位阻效应，相比短链PEG，能够在纳米颗粒表面形成更厚的水化层，显著抑制颗粒团聚，降低蛋白非特异性吸附，延长纳米载体在循环体系中的滞留时间。单磷酸基团可以和钙基矿化材料、金属氧化物、磁性纳米颗粒形成稳定配位键，实现材料表面锚定；末端巯基是生物正交反应基团，能够和马来酰亚胺（MAL）、二硫键、乙烯砜、金银贵金属表面发生特异性反应，反应条件温和、选择性高。

该产品外观为白色絮状固体，可溶于纯水、DMSO、DMF，难溶于乙醚、石油醚；纯度≥95%，PEG分散度控制良好，适合构建响应型矿化纳米载体、金纳米材料修饰、可断裂偶联体系。和双磷酸-PEG2K-NHS对比，本试剂PEG链更长，空间抗吸附效果更强，反应端为巯基，适合和MAL标记多肽、蛋白、小分子探针配对偶联，构建“矿化锚定+巯基偶联”的模块化组装体系，广用于仿生矿化、贵金属纳米生物探针、氧化还原响应递送系统搭建。

产品应用
第一，金纳米颗粒、金纳米棒、银纳米材料表面修饰。巯基与金形成稳定Au-S键，单磷酸端保留矿化活性，制备磷酸化修饰贵金属SERS探针，用于体外生物标记、细胞成像。
第二，磷酸钙、羟基磷灰石、磁性氧化铁纳米载体改性。单磷酸锚定在矿化颗粒表面，暴露巯基，后续和MAL修饰靶向肽、光敏剂、小分子药物偶联，组装靶向递送纳米粒。
第三，氧化还原响应型生物偶联体系。巯基可通过二硫键连接功能分子，在胞内高GSH环境下二硫键断裂，实现分子可控释放，用于响应型药物、核酸载体研究。
第四，生物传感器基底修饰。在电极、芯片表面先固定磷酸化层，再利用巯基偶联抗体、适配体，构建低背景的电化学传感、荧光传感平台。
第五，水凝胶交联体系。巯基参与巯基-烯点击交联，磷酸基团引入水凝胶网络，调控凝胶矿化能力，制备可矿化组织工程支架。
第六，多肽、蛋白定点修饰。将MAL修饰的活性蛋白、多肽与本试剂巯基偶联，再通过磷酸基团固定到固相矿化载体，实现固定化酶、固相多肽捕获体系。
第七，外泌体膜修饰。借助磷酸基团辅助吸附，巯基对外泌体膜上马来酰亚胺标记位点进行偶联，对外泌体进行功能化改造，用于胞内示踪研究。

使用方法
储存前准备：干粉-20℃密封干燥保存，配液优先无水DMSO溶解储备母液，母液避光、隔氧，防止巯基氧化。
贵金属修饰体系：金纳米颗粒分散液调节pH至弱碱性，缓慢加入单磷酸-PEG5K-SH母液，室温避光搅拌4–12 h；反应完成后高速离心，去除未反应游离PEG，反复水洗，得到PEG修饰金颗粒。
MAL配对偶联：底物为MAL修饰多肽/蛋白，缓冲液选用pH 6.0–7.4的磷酸盐缓冲液（不含氧化剂），摩尔比控制为PEG-SH:MAL底物=2:1~5:1，室温避光反应1–3 h。
矿化组装：偶联完成之后，将产物置于含钙离子体系，单磷酸端自发结合矿化相，完成二次组装。
纯化方式：纳米颗粒使用离心洗涤；蛋白/多肽产物采用透析或者凝胶过滤色谱脱盐；小分子产物可采用制备HPLC纯化。
样品保存：纯化后的产物分装，避光低温保存，体系中可少量添加TCEP防止巯基氧化，注意TCEP不能过量干扰后续MAL反应。

注意事项
巯基易被氧气、氧化剂氧化形成二硫键失活，全程尽量隔绝空气，反应体系避免加入双氧水、次氯酸、高浓度金属氧化剂。缓冲液避免含重金属离子，铜离子会加速巯基氧化。Tris缓冲液不影响巯基反应，但如果体系同时存在NHS酯，需要规避氨基干扰。MAL和巯基反应很良好pH区间偏中性偏酸，pH＞8.5时MAL水解速度加快，偶联效率下降。干粉反复开盖会吸水、氧化，建议分装成小规格单次使用。和金颗粒反应时，投料比例需要优化，过高浓度会造成颗粒团聚，过低则修饰密度不足。本试剂仅科研实验使用，不适合直接用于人体。操作佩戴防护手套，粉末避免吸入。废液单独收集，不要和强氧化剂废液混放。如果需要长期存放水溶液，必须除氧、避光，短期使用，不建议水相长期储存。