物理化学性质

1. 结构组成(三段式)

RB – PEG(n) – DSPE
  • DSPE端(膜锚定)​
    1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺,含两条C18:0饱和脂肪酸链,可稳定嵌入脂质双层、LNP、胶束及外泌体模拟膜。
  • PEG间隔链​
    常规MW:350 / 550 / 1k / 2k / 3.4k / 5k / 10k Da
    提供水化层、柔性间隔与抗非特异性吸附能力,同时拉开荧光团与脂膜距离,缓解膜微环境导致的荧光猝灭。
  • RB端(罗丹明B)​
    阳离子型呫吨类红色荧光染料,通过酰胺/酯键偶联至PEG末端。

2. 关键参数表

项目
参数与特征
外观性状
玫瑰红、粉红至深红色固体粉末;低MW可呈红色粘稠物
纯度
科研级 ≥95%(NMR/HPLC辅助确认)
端基取代率
DSPE端、RB端通常 ≥90%(NMR/UV确认)
荧光参数
Ex ≈ 540–560 nm;Em ≈ 580–625 nm(依共轭形式与盐型略有偏移)
溶解性
易溶于氯仿、DCM、DMSO、DMF;可分散于PBS/水相形成荧光脂质体
两亲性
强两亲性,可自组装入脂质膜
pH适应范围
中性至弱碱较稳定(pH 5–10荧光较稳)
光敏感性
罗丹明B对强光敏感,存在光漂白风险
储存条件
-20℃密封、避光、干燥,充氮保存
保质期
密封完好约12个月(以COA为准)
运输条件
低温冰袋/干冰,避光防潮包装

3. 化学稳定性

  • 中性水相中结构较稳;强酸强碱、高温、过氧化物会加速磷脂氧化与染料降解;
  • 罗丹明B端无自由活性基团(非NHS/MAL类),不需额外偶联步骤,直接共组装即可示踪;
  • 避免与强还原剂长期共存,防止发色团或连接键受影响。

材料相关内容与功能定位

DSPE-PEG-RB 的本质是“膜锚定荧光磷脂”,不是独立载药分子,而是递送系统的光学界面组件。

1. 核心功能

  • 膜嵌入示踪:DSPE疏水尾插入脂膜,RB端朝水相发射红光;
  • 载体可视化:脂质体、LNP、纳米粒一步法制备即带红色荧光;
  • 抗淬灭设计:PEG把RB推离疏水膜区,降低自淬灭与膜极性干扰;
  • 长循环辅助:PEG层降低蛋白吸附,使荧光载体在分散体系中更稳;
  • 多场景兼容:共聚焦、流式、荧光显微镜、活体离体成像均可读取。

2. 与同类荧光磷脂的区别

  • 对比FITC-PEG-DSPE:RB光稳定性更好,背景自发荧光更低;
  • 对比Cy5-PEG-DSPE:RB在可见光区,设备滤片通用性高,无需近红外通道;
  • 对比无PEG荧光磷脂:PEG链显著减少聚集与膜表面荧光湮灭。

产品使用指南(实验流程)

1. 母液配制

  • 称取适量粉末,用氯仿、DMSO或CHCl₃/MeOH(9:1)配成 1–10 mg/mL 母液;
  • 棕色瓶/铝箔包裹,超声助溶(温和不加热);
  • 分装冻存,避免反复冻融。

2. 脂质配方共混

  • 将DSPE-PEG-RB按总脂质 0.5–2 mol%​ 加入脂质混合物;
  • 与DSPC/DPPC、胆固醇、mPEG2000-DSPE等共溶于有机相;
  • 旋蒸成膜(40–60℃水浴,避光),真空除溶剂。

3. 水化与成型

  • PBS/pH7.4水相水化,探针超声或挤出(100/200 nm滤膜);
  • 全程避光,控制温度高于脂质相变温度但低于染料耐受上限;
  • 得到红色荧光脂质体/LNP。

4. 纯化与标记评估

  • 透析、Sephadex G-25或超滤去除游离RB-PEG碎片;
  • 荧光分光光度计测Ex/Em曲线;
  • DLS看粒径/PDI是否因标记比例过高而聚集;
  • 标记效率可通过纯化前后荧光积分面积估算。

5. 使用比例建议

  • 0.5 mol%:弱标记、低猝灭,适合活细胞长时成像;
  • 1.0 mol%:常规示踪,信号/稳定性平衡;
  • 2 mol%:信号强但可能增加自淬灭与膜扰动,需预实验验证。

6. 操作禁忌

罗丹明B-PEG-DSPE 磷脂PEG罗丹明B Rhodamine B标记PEG磷脂 产品使用指南

  • 忌白光长时间直射、忌未回温开盖吸潮;
  • 忌强酸强碱缓冲液长期存放;
  • 忌与游离罗丹明B混用不透析(背景高);
  • 细胞实验需设“无RB空白脂质体”对照。

瑞禧生物供应形态与规格

1. 不同形态

罗丹明B-PEG-DSPE 磷脂PEG罗丹明B Rhodamine B标记PEG磷脂 产品使用指南

  • 固体粉末(主流,利于长期保存)
  • 冻干粉(低MW或高纯定制)
  • 定制浓度溶液(DMSO母液,避光分装)

2. 常规规格

罗丹明B-PEG-DSPE 磷脂PEG罗丹明B Rhodamine B标记PEG磷脂 产品使用指南

  • 小包装:10 mg / 25 mg / 50 mg
  • 科研常规:100 mg / 250 mg / 500 mg
  • 放大定制:1 g及以上(按项目)
  • PEG MW可选:350、550、1k、2k、3.4k、5k、10k

3. 质控与交付

瑞禧生物可配套提供:
  • ¹H-NMR(PEG链、DSPE、RB特征峰确认)
  • UV-Vis(RB吸收峰确认)
  • HPLC(纯度与游离染料残留)
  • GPC(PEG分布)
  • COA、MSDS、结构说明、避光分装建议

4. 同平台相似荧光/功能磷脂产品

  • DSPE-PEG-FITC(绿色荧光)
  • DSPE-PEG-Cy5 / Cy7(近红外示踪)
  • mPEG-DSPE(惰性长循环对照)
  • DSPE-PEG-NH₂ / COOH / NHS / MAL(功能化偶联)
  • DSPE-PEG-FA(叶酸靶向)
  • DPPE-PEG-RB、DOPE-PEG-RB(不同磷脂骨架对照)

应用方向

  1. 脂质体示踪:膜定位、包封率辅助判断、释放过程观测;
  2. LNP与mRNA载体:体内外分布、器官富集分析;
  3. 细胞摄取研究:共聚焦观察内吞、溶酶体共定位;
  4. 膜融合/外泌体模拟:膜动力学与载体-细胞膜相互作用;
  5. 多色成像:与FITC/Cy5体系搭配做双标或三标实验;
  6. 材料界面研究:仿生膜、微流控芯片、传感器膜层可视化。

储存与运输规范

  • 到货后未开封:直接-20℃避光保存;
  • 开盖前:干燥器回温至室温,防冷凝水;
  • 取用后:充氮/氩气,封口膜+拧紧盖,及时回冻;
  • 溶液:分装-20℃,避免>3次冻融;
  • 运输:低温避光,泡沫箱+冰袋/干冰。

温馨提示

本品为科研用功能化荧光磷脂试剂,仅供实验室研究、材料开发与体外实验使用,不能用于人体实验、临床诊断、食用或注射。操作请遵守实验室安全规范与所在机构生物安全管理要求。

小结

DSPE-PEG-RB 把“磷脂成膜能力 + PEG稳定层 + 罗丹明B红色荧光”集成于单一分子:
  • 物理化学上具备两亲自组装、光可读、膜锚定稳的特点;
  • 使用上只需共混成膜即可示踪,无需二次偶联;
  • 瑞禧生物可提供多MW、多形态、带谱图质控的科研级供应,以及同系列荧光/靶向磷脂定制。
该材料适合作为脂质载体、纳米递送系统与仿生膜研究中的标准化红色荧光参照模块。